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鸡奇异变形杆菌致病性相关毒素检测及PCR检测方法的建立

中文摘要第1-10页
Abstract第10-12页
1 引言第12-24页
   ·鸡奇异变形杆菌的研究现状第12-19页
     ·病原学第12-14页
     ·流行病学第14页
     ·临诊症状和病理变化第14-15页
     ·发病机理第15-17页
     ·致病性第17页
     ·诊断第17-18页
     ·防制第18页
     ·公共卫生意义第18-19页
     ·S rRNA 的研究进展第19-20页
     ·23S rRNA 基因技术的应用第20页
     ·23S rRNA 基因检测技术存在的局限性第20页
     ·多重PCR 的研究进展第20-23页
     ·常规PCR 技术第20-21页
     ·多重 PCR 的原理及特点第21-22页
     ·多重PCR 技术检测第22-23页
     ·多重PCR 的最新进展第23页
     ·本研究的内容、目的及意义第23-24页
2. 材料与方法第24-36页
   ·奇异变形杆菌致病性相关毒素的提取及其检测第24-28页
     ·材料第24-26页
       ·菌株第24页
       ·实验动物第24-25页
       ·仪器设备第25页
       ·主要试剂及溶液、培养基配制第25-26页
     ·方法第26-28页
       ·奇异变形杆菌内毒素的制备及其生物学特性检测第26-27页
       ·奇异变形杆菌热稳定性肠毒素的制备及乳鼠灌胃试验第27-28页
       ·奇异变形杆菌鸡胚气管环感染试验第28页
   ·奇异变形杆菌分离株的23S rRNA 序列分析第28-33页
     ·材料第28-29页
       ·菌株第28页
       ·工具酶与主要试剂第28-29页
       ·仪器设备第29页
       ·试验所用溶液及其配制第29页
     ·方法第29-33页
       ·23S rRNA 基因PCR 引物的设计与合成第29-30页
       ·细菌DNA 的准备第30页
       ·PCR 反应体系及电泳第30-31页
       ·目的条带的回收第31页
       ·定量及连接第31页
       ·连接产物的转化第31-32页
       ·重组克隆细菌的扩增及质粒的提取第32-33页
       ·测序第33页
       ·序列同源性比较及系统进化树构建第33页
   ·多重PCR 检测三种重要食源性致病菌方法的建立及应用第33-36页
     ·材料第33-34页
       ·菌株第33页
       ·工具酶及主要试剂第33-34页
       ·试验所用溶液及其配制第34页
     ·方法第34-36页
       ·扩增的目的基因及引物设计第34-35页
       ·细菌的培养和模板的制备第35页
       ·单一PCR 扩增及特异性和敏感性分析第35-36页
       ·单管多重PCR 反应体系的优化第36页
       ·多重PCR 特异性和敏感性测定第36页
       ·人工模拟样品的检测和市售食品的验证第36页
3. 结果第36-45页
   ·奇异变形杆菌致病性相关毒素的提取及其检测第36-40页
     ·奇异变形杆菌内毒素精致品制备及生致病性结果第36-38页
     ·乳鼠灌胃试验结果及致病性检测第38-39页
     ·正常气管环组织的培养物及各毒株TOC-ID50 的计算第39-40页
   ·奇异变形杆菌分离株的23S rRNA 序列分析第40-42页
     ·PCR 扩增结果第40页
     ·目的DNA 克隆鉴定第40-41页
     ·23S rRNA 序列同源性比较及系统发育分析第41-42页
   ·多重PCR 检测三种重要食源性致病菌方法的建立及应用第42-45页
     ·单一PCR 扩增和核甘酸序列分析第42页
     ·单一PCR 敏感性分析第42-43页
     ·单管多重PCR 的扩增及其条件的优化第43页
     ·多重PCR 特异性和敏感性测定结果第43-44页
     ·人工模拟试验和市售食品试验结果第44-45页
4 讨论第45-49页
   ·奇异变形杆菌致病性相关毒素的提取及其检测第45-46页
   ·奇异变形杆菌分离株的23S rRNA 序列分析第46-47页
   ·多重PCR 检测三种重要食源性致病菌方法的建立及应用第47-49页
结论第49-50页
参考文献第50-57页
致谢第57-58页
攻读硕士学位期间发表的论文第58-59页
个人简介第59-60页
硕士学位论文内容简介及自评第60页

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