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转基因棉籽培养料栽培平菇过程中Bt蛋白、转入DNA降解及对平菇、平菇害虫的影响

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
第一章 前言第11-23页
 1.1 转基因棉花及其生态安全问题第11-12页
 1.2 Bt蛋白的测定及在土壤中的降解第12-14页
 1.3 DNA片段的检测及在土壤中的降解第14-15页
 1.4 转Bt基因植物对土壤微生物的影响第15-16页
 1.5 转 Bt基因植物对非标靶节肢动物的直接影响第16-20页
  1.5.1 益虫第16-17页
  1.5.2 天敌第17-18页
  1.5.3 其他昆虫第18-19页
  1.5.4 食用菌害虫第19-20页
 1.6 转基因植物对真核生物细胞内DNA的影响第20-21页
 1.7 本研究的目的意义与技术路线第21-23页
  1.7.1 目的意义第21-22页
  1.7.2 技术路线第22-23页
第二章 转 Bt基因棉棉籽组织中Bt蛋白测定及降解第23-32页
 2.1 材料与方法第23-24页
  2.1.1 棉籽第23页
  2.1.2 主要试剂第23页
  2.1.3 主要仪器第23页
  2.1.4 棉籽、棉籽仁、棉籽壳贮存第23页
  2.1.5 提取液与稀释液制备第23-24页
  2.1.6 Bt蛋白测定第24页
 2.2 结果与分析第24-30页
  2.2.1 Envirologix试剂盒测定棉籽仁中Bt蛋白含量第24-26页
  2.2.2 Envirologix试剂盒和 Agdia试剂盒测得的净吸光值的线性关系第26页
  2.2.3 Agdia试剂盒测得的净吸光值与Bt蛋白浓度的线性关系第26-27页
  2.2.4 棉籽、棉籽仁、棉籽壳贮存过程中Bt蛋白的变化第27-30页
 2.3 讨论第30-32页
第三章 培养料中棉籽量和转Bt基因棉棉籽对平菇生长的影响第32-39页
 3.1 材料与方法第32-33页
  3.1.1 平菇菌种第32页
  3.1.2 棉籽第32页
  3.1.3 平菇栽培第32-33页
 3.2 结果与分析第33-37页
  3.2.1 培养料中棉籽含量对平菇菌丝生长的影响第33-35页
  3.2.2 培养料中棉籽含量对平菇子实体形成的影响第35-36页
  3.2.3 转基因棉籽对平菇菌丝体生长的影响第36-37页
 3.3 讨论第37-39页
第四章 转基因棉籽成分对培养液中平菇菌丝体生长的影响第39-47页
 4.1 材料与方法第39-41页
  4.1.1 平菇菌种第39页
  4.1.2 棉籽第39页
  4.1.3 主要试剂第39页
  4.1.4 主要仪器第39页
  4.1.5 Bt蛋白培养液培养菌丝体第39-40页
  4.1.6 棉籽成分培养液培养菌丝体第40-41页
  4.1.7 数据统计分析第41页
 4.2 结果与分析第41-45页
  4.2.1 Bt蛋白对平菇菌丝体生长的影响第41页
  4.2.2 棉籽成分含量对平菇菌丝体生长的影响第41-43页
  4.2.3 不同棉籽品种对平菇菌丝体生长的影响第43-44页
  4.2.4 中16、中30棉籽成分对不同品种平菇菌丝体的影响第44-45页
 4.3 讨论第45-47页
第五章 转 Bt基因棉棉籽培养平菇过程中Bt蛋白的降解第47-57页
 5.1 材料与方法第47-48页
  5.1.1 平菇菌种第47页
  5.1.2 棉籽第47页
  5.1.3 主要试剂第47页
  5.1.4 主要仪器第47页
  5.1.5 平菇栽培与取样第47-48页
  5.1.6 菌丝体培养与取样第48页
  5.1.7 Bt蛋白测定第48页
 5.2 结果第48-54页
  5.2.1 含3%33B 棉籽的培养料中Bt蛋白的降解第48-49页
  5.2.2 含3%99B 棉籽的培养料中Bt蛋白的降解第49-50页
  5.2.3 含20%33B 棉籽的培养料中Bt蛋白的降解第50-52页
  5.2.4 含20%99B 棉籽的培养料中Bt蛋白的降解第52-53页
  5.2.5 培养液中Bt蛋白的降解第53-54页
 5.3 讨论第54-57页
第六章 转 Bt基因棉棉籽培养平菇过程中有关 DNA的降解第57-62页
 6.1 材料与方法第57-59页
  6.1.1 平菇菌种第57页
  6.1.2 棉籽第57页
  6.1.3 主要试剂第57页
  6.1.4 主要仪器第57页
  6.1.5 平菇栽培与取样第57-58页
  6.1.6 核酸培养液培养的菌丝体第58页
  6.1.7 利用Promega 试剂盒提取 DNA第58-59页
  6.1.8 nest-PCR第59页
 6.2 结果与分析第59-61页
 6.3 讨论第61-62页
第七章 转基因棉籽对平菇酷酶同功酶和过氧化物酶同工酶的影响第62-75页
 7.1 材料与方法第62-64页
  7.1.1 平菇菌种第62页
  7.1.2 棉籽第62页
  7.1.3 主要试剂及配制第62-63页
  7.1.4 主要仪器第63页
  7.1.5 平菇栽培第63页
  7.1.6 菌丝体培养第63页
  7.1.7 蛋白质粗提液的制备第63页
  7.1.8 同工酶电泳与染色第63-64页
 7.2 结果与分析第64-71页
  7.2.1 平菇子实体同工酶电泳第64-67页
  7.2.2 平菇菌丝体同工酶电泳第67-69页
  7.2.3 不同品种平菇菌丝体同工酶电泳第69-71页
 7.3 讨论第71-75页
第八章 平菇组织中和有关外源基因同源的DNA片段的发现及来源探索第75-83页
 8.1 材料与方法第75-77页
  8.1.1 平菇菌种第75页
  8.1.2 棉籽第75页
  8.1.3 主要试剂第75页
  8.1.4 主要仪器第75页
  8.1.5 子实体培养与取样第75页
  8.1.6 菌丝体培养与取样第75-76页
  8.1.7 样品制备第76页
  8.1.8 PCR检测与测序第76-77页
 8.2 结果与分析第77-82页
  8.2.1 不含棉籽成分的培养液培养的平菇菌丝体第77-79页
  8.2.2 含非转基因棉籽的培养料栽培的平菇子实体第79-80页
  8.2.3 含转基因棉籽成分的培养液培养的平菇菌丝体第80页
  8.2.4 含转基因棉籽的培养料栽培的平菇子实体第80-81页
  8.2.5 测序结果第81-82页
 8.3 讨论第82-83页
第九章 转 Bt基因棉棉籽成分培养的平菇子实体与菌丝体 DNA多态性分析第83-93页
 9.1 材料与方法第83-85页
  9.1.1 平菇菌种第83页
  9.1.2 棉籽第83页
  9.1.3 主要试剂第83页
  9.1.4 主要仪器第83页
  9.1.5 子实体培养第83-84页
  9.1.6 菌丝体培养第84页
  9.1.7 样品制备第84页
  9.1.8 RAPD方法第84-85页
 9.2 结果与分析第85-91页
  9.2.1 含 Bt棉棉籽的培养料栽培的平菇子实体第85-87页
  9.2.2 斜面上连续传代(10代)的平菇菌丝体第87-88页
  9.2.3 培养液中连续转代(9代)的平菇菌丝体第88-91页
 9.3 讨论第91-93页
第十章 含转基因棉籽的培养料对3种平菇害虫的影响第93-100页
 10.1 材料与方法第93-94页
  10.1.1 平菇菌种第93页
  10.1.2 棉籽第93页
  10.1.3 培养料配制第93-94页
  10.1.4 菇棚感虫与虫量调查第94页
  10.1.5 含不同品种棉籽的培养料饲养平菇厉眼菌蚊与死亡率调查第94页
  10.1.6 数据统计分析第94页
 10.2 结果分析第94-96页
  10.2.1 对平菇厉眼菌蚊、粪蚊和蚤蝇发生量的影响第94-95页
  10.2.2 对平菇厉眼菌蚊死亡率的影响第95-96页
 10.3 讨论第96-100页
第十一章 结论第100-102页
参考文献第102-116页
致谢第116-117页
作者简介第117-118页

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