| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 符号说明 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-19页 |
| 1．1 早熟禾组织培养的研究状况 | 第10-11页 |
| 1．2 早熟禾的遗传转化的方法 | 第11-12页 |
| 1．3 早熟禾耐盐性研究和耐盐育种 | 第12-14页 |
| 1．4 甜菜碱相关基因工程研究 | 第14-16页 |
| 1．4．1 甜菜碱的生物合成 | 第15-16页 |
| 1．4．2 甜菜碱生物合成的基因工程 | 第16页 |
| 1．5 筛选标记基因 | 第16-18页 |
| 1．6 本工作的目的和意义 | 第18-19页 |
| 2 早熟禾丛生芽再生体系的建立及遗传转化 | 第19-46页 |
| 2．1 材料与方法 | 第19-26页 |
| 2．1．1 植物材料 | 第19页 |
| 2．1．2 菌株和质粒 | 第19页 |
| 2．1．3 培养基、试剂和溶液 | 第19-21页 |
| 2．1．4 丛生芽再生体系的建立 | 第21页 |
| 2．1．5 组织学观察 | 第21-23页 |
| 2．1．6 农杆菌培养 | 第23页 |
| 2．1．7 除草剂筛选浓度的确定 | 第23页 |
| 2．1．8 草地早熟禾的遗传转化 | 第23-24页 |
| 2．1．9 转基因植株的分子检测 | 第24-26页 |
| 2．2 结果与分析 | 第26-39页 |
| 2．2．1 草地早熟禾丛生芽再生体系的建立 | 第26-27页 |
| 2．2．2 影响丛生芽形成的因素 | 第27-31页 |
| 2．2．3 丛生芽的继代、生根与移栽 | 第31-32页 |
| 2．2．4 组织学观察结果 | 第32-34页 |
| 2．2．5 除草剂绿黄隆筛选浓度的确定 | 第34页 |
| 2．2．6 转化植株的产生和分子生物学检测 | 第34-36页 |
| 2．2．7 影响早熟禾茎尖遗传转化效率的因素 | 第36-39页 |
| 2．3 讨论 | 第39-46页 |
| 2．3．1 不同因素对丛生芽形成的影响 | 第39-41页 |
| 2．3．2 组织学观察 | 第41-42页 |
| 2．3．3 农杆菌介导的草地早熟禾丛生芽遗传转化体系的建立 | 第42-44页 |
| 2．3．4 本试验有待解决的问题 | 第44-46页 |
| 3 betA基因高效早熟禾表达载体的构建 | 第46-56页 |
| 3．1 材料与方法 | 第46-50页 |
| 3．1．1 菌株和质粒 | 第46-47页 |
| 3．1．2 培养基、药品及试剂 | 第47页 |
| 3．1．3 质粒 DNA的提取和酶切 | 第47页 |
| 3．1．4 DNA片段的回收和定量 | 第47-48页 |
| 3．1．5 单链寡核苷酸退火和接头磷酸化 | 第48页 |
| 3．1．6 磷酸化接头的连接和酶切 | 第48-49页 |
| 3．1．7 DNA片段的去磷酸化反应 | 第49页 |
| 3．1．8 目的 DNA片段与载体 DNA的连接 | 第49-50页 |
| 3．1．9 连接产物的转化和重组子的筛选 | 第50页 |
| 3．1．10 重组质粒转化根癌农杆菌 | 第50页 |
| 3．2 结果与分析 | 第50-54页 |
| 3．2．1 质粒pCAMBIA1300-P UbibetATnos 的构建 | 第50-52页 |
| 3．2．2 质粒pCAMBIA1300-P UbibetATnos-als 的构建 | 第52-53页 |
| 3．2．3 质粒pCAMBIA3300-P UbibetATnos 的构建 | 第53-54页 |
| 3．3 讨论 | 第54-56页 |
| 附:质粒构建流程图 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第66页 |
