| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-10页 |
| 1 引言 | 第10-20页 |
| ·兔产气荚膜梭菌病病源学研究进展 | 第10-16页 |
| ·产气荚膜梭菌培养特性和生化特性 | 第10-11页 |
| ·产气荚膜梭菌毒力因子的分类及其引起的相关疾病 | 第11-12页 |
| ·产气荚膜梭菌α毒素研究进展 | 第12-16页 |
| ·兔产气荚膜梭菌病临床发病特征 | 第16-17页 |
| ·发病原因 | 第16-17页 |
| ·流行特点 | 第17页 |
| ·临床症状和病理变化 | 第17页 |
| ·兔产气荚膜梭菌病的实验室诊断和防治措施 | 第17-19页 |
| ·常规诊断 | 第17页 |
| ·染色荧光诊断 | 第17-18页 |
| ·分子生物学诊断 | 第18页 |
| ·防治措施 | 第18-19页 |
| ·本课题的研究目的和意义 | 第19-20页 |
| 2 材料和方法 | 第20-28页 |
| ·实验材料 | 第20-21页 |
| ·菌株 | 第20页 |
| ·质粒与感受态细胞 | 第20页 |
| ·实验试剂和材料 | 第20页 |
| ·产气荚膜梭菌培养基的配制 | 第20-21页 |
| ·实验动物 | 第21页 |
| ·主要实验仪器 | 第21页 |
| ·实验方法 | 第21-28页 |
| ·产气荚膜梭菌α毒素全基因的克隆和测序 | 第21-22页 |
| ·产气荚膜梭菌α毒素全基因的表达 | 第22-23页 |
| ·产气荚膜梭菌α毒素的提取 | 第23-24页 |
| ·产气荚膜梭菌α毒素部分序列基因表达载体的构建和表达Ⅰ | 第24页 |
| ·产气荚膜梭菌α毒素部分序列基因表达载体的构建和表达Ⅱ | 第24-26页 |
| ·重组蛋白的大量提取 | 第26页 |
| ·复性后蛋白凝胶过滤层析 | 第26-27页 |
| ·蛋白α toxinB和α toxinA的免疫学检测 | 第27-28页 |
| 3 实验结果 | 第28-38页 |
| ·产气荚膜梭菌α毒素全基因的克隆和测序结果 | 第28-29页 |
| ·产气荚膜梭菌α毒素全基因的PCR扩增 | 第28页 |
| ·重组质粒pMD18TCα鉴定 | 第28-29页 |
| ·α毒素全基因序列测定及同源性比较 | 第29页 |
| ·产气荚膜梭菌α毒素全基因的表达结果 | 第29-30页 |
| ·重组表达载体pPROHTbCα的鉴定 | 第29-30页 |
| ·重组表达载体pPROHTbCα在大肠杆菌中的表达 | 第30页 |
| ·重组表达载体pPROHTaPα的鉴定和表达结果 | 第30-32页 |
| ·重组表达载体pPROHTaPα的鉴定 | 第30-31页 |
| ·重组表达载体pPROHTaPα在大肠杆菌中的表达 | 第31-32页 |
| ·重组表达载体pET30bPα的表达及产物纯化结果 | 第32-35页 |
| ·重组表达载体pET30bPα的鉴定 | 第32-33页 |
| ·重组表达载体pET30bPα在大肠杆菌中的表达 | 第33-34页 |
| ·表达产物的纯化和峰值测定 | 第34-35页 |
| ·表达产物Western-blot分析 | 第35页 |
| ·α毒素部分序列基因序列测定及同源性比较结果 | 第35-36页 |
| ·复性后蛋白α toxinB的凝胶过滤纯化结果 | 第36-37页 |
| ·免疫琼脂扩散反应结果 | 第37-38页 |
| 4 讨论 | 第38-42页 |
| ·关于产气荚膜梭菌的培养和α毒素的提取 | 第38页 |
| ·关于α毒素的克隆 | 第38-39页 |
| ·关于α毒素的表达 | 第39-40页 |
| ·关于包涵体的变性及复性蛋白的纯化 | 第40-41页 |
| ·关于复性蛋白α toxinB和α toxinA的免疫原性 | 第41-42页 |
| 5 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-50页 |
| 附录 | 第50-57页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
