| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-14页 |
| ·人白介素-2 概况 | 第7-9页 |
| ·人白介素-2 | 第7页 |
| ·IL-2 的生物学作用及临床应用 | 第7-8页 |
| ·长效IL-2 的研究进展 | 第8-9页 |
| ·人血清白蛋白(HSA)概况 | 第9-10页 |
| ·人血清白蛋白简介 | 第9-10页 |
| ·人血清白蛋白的表达系统研究进展 | 第10页 |
| ·白蛋白融合技术（Albumin fusion technology） | 第10页 |
| ·毕赤酵母（PICHIA PASTORIS）表达系统 | 第10-12页 |
| ·几种毕赤酵母宿主的特性 | 第10-11页 |
| ·毕赤酵母表达载体 | 第11页 |
| ·影响外源基因在毕赤酵母中高效表达的因素 | 第11-12页 |
| ·研究背景与内容 | 第12-14页 |
| 第二章 5L 发酵罐上溶氧和甲醇浓度对IL2-HSA 表达量的影响 | 第14-24页 |
| ·引言 | 第14页 |
| ·材料与方法 | 第14-16页 |
| ·供试菌种 | 第14页 |
| ·主要仪器 | 第14-15页 |
| ·培养基 | 第15页 |
| ·培养方法 | 第15-16页 |
| ·分析方法 | 第16页 |
| ·结果与讨论 | 第16-23页 |
| ·5L 罐中菌体生长阶段发酵过程分析 | 第16-17页 |
| ·诱导阶段溶氧对融合蛋白表达量的影响 | 第17-20页 |
| ·诱导阶段甲醇浓度对融合蛋白表达量的影响 | 第20-23页 |
| ·本章小结 | 第23-24页 |
| 第三章 IL2-HSA 在毕赤酵母三种宿主中的表达 | 第24-36页 |
| ·引言 | 第24页 |
| ·材料与方法 | 第24-27页 |
| ·材料 | 第24-25页 |
| ·方法 | 第25-27页 |
| ·结果与讨论 | 第27-35页 |
| ·重组毕赤酵母的构建 | 第27页 |
| ·高表达转化子的筛选 | 第27-28页 |
| ·一级种子菌龄的确定 | 第28-29页 |
| ·诱导条件对融合蛋白表达量的影响 | 第29-33页 |
| ·表达产物Western Blot 分析 | 第33页 |
| ·表达产物的活性测定 | 第33-35页 |
| ·本章小节 | 第35-36页 |
| 第四章 人血清白蛋白/人白介素-2 C125A 突变体在毕赤酵母中表达 | 第36-47页 |
| ·引言 | 第36页 |
| ·材料与方法 | 第36-38页 |
| ·材料 | 第36-37页 |
| ·方法 | 第37-38页 |
| ·结果与讨论 | 第38-46页 |
| ·IL2m 基因的设计 | 第38-39页 |
| ·融合蛋白表达基因的构建 | 第39-41页 |
| ·表达载体pPHIm 的构建 | 第41-42页 |
| ·阳性转化子的筛选及诱导产物的Western blot 鉴定 | 第42页 |
| ·表达产物的活性测定 | 第42-44页 |
| ·诱导条件对HSA-IL2m 表达量的影响 | 第44页 |
| ·初步优化的诱导条件下目的蛋白的表达 | 第44-45页 |
| ·融合蛋白HSA-IL2m 降解条带的分析 | 第45-46页 |
| ·本章小结 | 第46-47页 |
| 第五章 主要结论 | 第47-48页 |
| ·结论 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第54页 |
