| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-20页 |
| ·1,3-丙二醇的性质，生产方法及应用领域 | 第9-13页 |
| ·1,3-丙二醇的理化性质 | 第9页 |
| ·1,3-丙二醇的主要用途 | 第9-10页 |
| ·1,3-丙二醇的生产情况和主要生产方法 | 第10-11页 |
| ·1,3-丙二醇的生产菌株及其合成路径 | 第11-13页 |
| ·甘油合成1,3-丙二醇的关键酶 | 第13-14页 |
| ·甘油脱水酶的结构及性质 | 第13页 |
| ·1,3-丙二醇氧化还原酶的结构及性质 | 第13-14页 |
| ·1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶的结构及性质 | 第14页 |
| ·产1,3-丙二醇基因工程的研究进展 | 第14-16页 |
| ·微生物发酵法生产1,3-丙二醇的研究进展 | 第16-17页 |
| ·培养基优化 | 第16页 |
| ·培养条件 | 第16页 |
| ·培养方式 | 第16-17页 |
| ·氧化还原酶催化过程中辅酶作用 | 第17-18页 |
| ·课题背景及意义 | 第18-20页 |
| ·课题背景 | 第18-19页 |
| ·课题意义 | 第19页 |
| ·本课题研究内容 | 第19-20页 |
| 第二章 产1,3-丙二醇关键酶的酶活分析方法研究 | 第20-27页 |
| ·材料与方法 | 第20-22页 |
| ·实验材料 | 第20-21页 |
| ·培养基 | 第21页 |
| ·培养方法 | 第21页 |
| ·酶活测定方法 | 第21-22页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第22页 |
| ·结果与讨论 | 第22-26页 |
| ·GDHt，PDOR 和YQHD 在细胞的内外分布 | 第22页 |
| ·二硫苏糖醇对酶活保持的影响 | 第22页 |
| ·破碎频率对酶活测定的影响 | 第22-23页 |
| ·1,3-丙二醇氧化还原酶酶活测定所用缓冲液的选择 | 第23页 |
| ·缓冲液的浓度对甘油脱水酶和1,3-丙二醇氧化还原酶酶活测定的影响 | 第23-24页 |
| ·缓冲液的pH 值对甘油脱水酶和1,3-丙二醇氧化还原酶酶活测定的影响 | 第24-25页 |
| ·温度对甘油脱水酶和1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶酶活的影响 | 第25-26页 |
| ·本章小结 | 第26-27页 |
| 第三章 重组克雷伯式杆菌(KLEBSIELLA PNEUMONIAE (PETAC-DHAB-TAC-YQHD)) 的构建 | 第27-34页 |
| ·材料与方法 | 第27-29页 |
| ·菌株和质粒 | 第27页 |
| ·工具酶与试剂 | 第27页 |
| ·培养基 | 第27-28页 |
| ·PCR 引物 | 第28页 |
| ·PCR 扩增反应体系及反应条件 | 第28页 |
| ·PCR 产物胶回收 | 第28页 |
| ·质粒DNA 的提取 | 第28-29页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第29页 |
| ·转化大肠杆菌 | 第29页 |
| ·克雷伯氏杆菌感受态细胞的制备以及转化 | 第29页 |
| ·提高抗生素浓度筛选高产转化子 | 第29页 |
| ·结果与讨论 | 第29-33页 |
| ·重组质粒pEtac-dhaB-tac-yqhD 的构建 | 第29-31页 |
| ·重组克雷伯氏杆菌(Klebsiella pneumoniae (pEtac-dhaB-tac-yqhD))的构建与高产1,3-PDO 重组子的筛选 | 第31页 |
| ·重组菌全细胞蛋白SDS-PAGE 电泳分析 | 第31-32页 |
| ·酶活测定结果 | 第32页 |
| ·讨论 | 第32-33页 |
| ·本章小结 | 第33-34页 |
| 第四章 重组克雷伯氏杆菌(KLEBSIELLA PNEUMONIAE (PETAC-DHAB-TAC-YQHD))的发酵特性研究 | 第34-42页 |
| ·材料与方法 | 第34-36页 |
| ·实验材料 | 第34页 |
| ·培养基 | 第34-35页 |
| ·培养方法 | 第35页 |
| ·抗生素浓度梯度实验 | 第35页 |
| ·野生Klebsiella pneumoniae和重组Klebsiella pneumoniae (pEtac-dhaB-tac-yqhD)生长曲线的绘制 | 第35页 |
| ·分析方法 | 第35-36页 |
| ·结果与讨论 | 第36-41页 |
| ·抗生素浓度梯度实验 | 第36-37页 |
| ·野生Klebsiella pneumoniae和重组Klebsiella pneumoniae (pEtac-dhaB-tac-yqhD)生长曲线的获得 | 第37页 |
| ·摇瓶发酵结果 | 第37-38页 |
| ·发酵过程中各种产物的含量变化 | 第38-39页 |
| ·自动发酵罐发酵实验 | 第39-41页 |
| ·本章小结 | 第41-42页 |
| 主要结论与展望 | 第42-44页 |
| 参考文献 | 第44-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第51页 |
