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铜绿假单胞菌中影响吩嗪合成基因操纵子phzA1的调节基因的研究

中文摘要第1-5页
Abstract第5-6页
缩写对比表第6-9页
图目录第9-10页
表目录第10-11页
第一章 绪论第11-27页
   ·铜绿假单胞菌抗药性的研究概况第11-12页
     ·铜绿假单胞菌的致病因子第11-12页
   ·铜绿假单胞菌的耐药机制第12-15页
     ·外膜的低渗透第12页
     ·主动泵出系统第12-13页
     ·β-内酰胺酶第13页
     ·靶位的改变第13页
     ·细菌生物被膜(biofilm)的形成第13-14页
     ·ABC转运体介导的耐药性第14-15页
   ·群体感应系统研究概况第15-20页
     ·革兰氏阳性菌的群体感应系统第15-16页
     ·革兰氏阴性菌的群体感应系统第16-18页
       ·自诱导物AHLs分子第16-17页
       ·铜绿假单胞菌的群体感应系统调节机制第17-18页
     ·群体感应系统的作用第18-20页
       ·群体感应系统与外排泵的关系第18-19页
       ·QS对β-内酰胺酶的调节第19页
       ·QS影响生物被膜的形成第19页
       ·QS系统控制许多致病因子的表达第19-20页
       ·QS系统控制鞭毛合成基因的表达第20页
   ·吩嗪类化合物的研究概况第20-22页
     ·吩嗪类化合物的基本特性第20-21页
     ·吩嗪类化合物的调节机制第21-22页
   ·抗生素的研究概况第22-26页
     ·抗生素的研究现状第22-23页
     ·抗生素的作用第23-25页
       ·抗生素影响致病菌的致病性第24页
       ·影响细菌的压力反应或由转录调节子负责的诱导反应第24-25页
       ·抗生素调节并影响致病因子的表达第25页
       ·低于抑制浓度抗生素与药物外排泵的关系第25页
     ·研究低于抑制浓度抗生素的意义第25-26页
   ·本课题研究内容和目的第26-27页
第二章 试验材料和方法第27-44页
   ·试验材料第27-30页
     ·菌株,引物和质粒第27-28页
     ·培养基的配置第28-29页
     ·试剂第29-30页
     ·仪器第30页
   ·试验方法第30-44页
     ·质粒的小量提取第30-31页
     ·细菌基因组DNA的提取第31页
     ·感受态细胞的制备第31-32页
     ·电转化第32页
     ·启动子——报道子载体的构建第32-33页
     ·四环素Tc对铜绿假单胞菌PAO的最小抑制浓度MIC的测定第33-34页
     ·测低于MIC的四环素Tc对PAO基因的表达情况第34页
     ·双亲株杂交试验第34页
     ·三亲株杂交试验第34-35页
     ·phzA1调节基因的筛选试验第35-41页
       ·转座突变第35-37页
       ·突变体的筛选第37-38页
       ·随机PCR(Arbitrary PCR)第38-40页
       ·突变体的验证第40页
       ·转座子插入位点的确定即调节基因的确定第40-41页
     ·PA1196的基因敲除试验第41页
     ·互补实验第41-42页
     ·基因表达水平的测定第42-43页
     ·绿脓菌素的测定第43页
     ·丛集运动试验(Twitching mobility)第43页
     ·泳动试验(Swimming mobility)第43页
     ·PA1196对抗生素的敏感性试验第43-44页
第三章 实验结果第44-57页
   ·PA1196基因的研究第44-50页
   ·影响吩嗪合成基因的筛选第50-54页
     ·筛选得到六个未知基因的突变体第50-52页
     ·突变体产量绿脓菌素的测定第52-53页
     ·突变体突变基因的确定第53页
     ·转座子插入位点的核苷酸序列分析第53-54页
     ·转座突变体功能分析第54页
   ·PA4594和PA0602基因的研究第54-57页
     ·PA0602基因受QS系统的调节第54-55页
     ·PA0602和PA4594受低于最小抑制浓度四环素的调节第55-57页
第四章 讨论第57-63页
   ·PA1196新转录调节基因的研究第57-59页
   ·影响吩嗪合成基因的筛选及其鉴定第59-62页
   ·RA4594,PA0602基因的研究第62-63页
第五章 全文小结第63-64页
参考文献第64-70页

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