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前花青素和白芷生物碱抗宫颈癌作用及机理研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-20页
第1章 绪论第20-40页
   ·选题背景第20-22页
   ·宫颈癌发病机理的研究进展第22-28页
     ·细胞凋亡与宫颈癌变第22-25页
     ·HPV 感染第25-26页
     ·端粒和端粒酶的表达第26-27页
     ·生长因子及受体第27页
     ·酶第27页
     ·宫颈癌细胞基因组的改变第27-28页
   ·宫颈癌治疗研究进展第28-37页
     ·中医治疗研究进展第29-32页
     ·西医治疗研究进展第32-35页
     ·红松树皮和白芷药学作用研究进展第35-36页
     ·问题与展望第36-37页
   ·本文的主要研究内容和意义第37-40页
第2章 红松树皮前花青素及白芷生物碱的提取和鉴定第40-54页
   ·材料第41-42页
     ·试剂第42页
     ·主要仪器第42页
   ·方法第42-47页
     ·红松树皮中前花青素的提取第42-43页
     ·红松树皮中前花青素的鉴定第43-45页
     ·白芷生物碱的提取第45-46页
     ·白芷生物碱的鉴定和含量测定第46页
     ·数据处理第46-47页
   ·结果第47-50页
     ·红松树皮中前花青素的提取第47页
     ·红松树皮中前花青素的鉴定第47-49页
     ·白芷生物碱的提取第49页
     ·白芷生物碱的鉴定和含量测定第49-50页
   ·讨论第50-53页
     ·红松树皮中前花青素的提取第50-51页
     ·红松树皮中前花青素的鉴定第51-52页
     ·白芷生物碱的提取第52页
     ·白芷生物碱的鉴定和含量测定第52-53页
   ·本章小结第53-54页
第3章 红松树皮前花青素和白芷生物碱体内抗宫颈癌作用及机制研究第54-80页
   ·材料第55-56页
     ·药品和试剂第55页
     ·主要仪器第55页
     ·试验动物第55-56页
   ·方法第56-59页
     ·U14 宫颈癌荷瘤小鼠模型的制备第56-57页
     ·确定小鼠治疗剂量第57页
     ·试验分组和治疗方案第57页
     ·小鼠急性毒性试验第57页
     ·动物一般情况观察第57页
     ·抑瘤率和生命延长率的测定第57-58页
     ·肝和肾组织病理检测第58页
     ·血象、肝和肾功能的检测第58页
     ·肿瘤组织细胞形态学的观察第58页
     ·肿瘤组织中突变型P53、Ki-67、PCNA 和Bcl-2 蛋白表达的检测第58-59页
     ·细胞周期分析和细胞凋亡检测第59页
     ·数据统计第59页
   ·结果第59-74页
     ·小鼠荷U14 宫颈癌实体瘤模型和腹水瘤模型建立与评价第59-60页
     ·急性毒理试验结果第60页
     ·动物一般情况观察第60-61页
     ·PKBPE 和AAD 对U14 荷瘤鼠的抑瘤作用和生命延长率的影响第61-63页
     ·PKBPE 和AAD 体内对U14 腹水瘤的生长抑制作用第63-64页
     ·PKBPE 和AAD 对U14 荷瘤鼠肝和肾脏的毒性作用第64-65页
     ·PKBPE 和AAD 对U14 荷瘤鼠血象、肝和肾功能的影响第65页
     ·PKBPE 和AAD 对U14 荷瘤鼠肿瘤组织细胞形态学的影响第65-67页
     ·PKBPE 和AAD 对U14 荷瘤鼠肿瘤组织细胞突变型P53、Ki-67、 PCNA和Bcl-2 蛋白表达的影响第67-74页
     ·PKBPE 和AAD 对U14 荷瘤鼠肿瘤组织细胞周期和凋亡的影响第74页
   ·讨论第74-79页
     ·U14 荷瘤鼠模型的建立与评价第75-76页
     ·PKBPE 和AAD 对U14 荷瘤鼠抑瘤作用和生命延长率的影响第76页
     ·PKBPE 和AAD 对U14 荷瘤鼠肿瘤组织细胞形态学的影响第76页
     ·PKBPE 和AAD 对U14 荷瘤鼠肿瘤组织细胞突变型P53、Ki-67、PCNA和Bcl-2 蛋白表达的影响第76-78页
     ·PKBPE 和AAD 对U14 荷瘤鼠肿瘤组织细胞周期和凋亡的影响第78页
     ·PKBPE 和AAD 的毒性试验第78-79页
   ·本章小结第79-80页
第4章 红松树皮前花青素对宫颈癌小鼠的免疫功能和氧化防御系统的影响第80-102页
   ·材料第81-82页
     ·药品和试剂第81页
     ·主要试验器材第81-82页
     ·试验动物第82页
   ·方法第82-85页
     ·U14 宫颈癌荷瘤小鼠模型的制备第82页
     ·试验分组第82页
     ·胸腺(脾)重量指数的测定第82页
     ·血清中TNF-α和白介素-8 含量测定第82-83页
     ·IL-2 产生能力的测定第83页
     ·小鼠耳廓肿胀试验第83页
     ·巨噬细胞吞噬功能试验第83-84页
     ·ConA 诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖的影响第84页
     ·血清中SOD 和MDA 的检测第84-85页
     ·数据处理第85页
   ·结果第85-94页
     ·PKBPE 和AAD 对U14 荷瘤鼠的体重增长和瘤体重量的影响第85-86页
     ·PKBPE 和AAD 对U14 荷瘤小鼠胸腺和脾指数的影响第86-87页
     ·PKBPE 和AAD 对U14 荷瘤小鼠血清中TNF-α和IL-8 含量影响第87-88页
     ·PKBPE 和AAD 对U14 荷瘤小鼠IL-2 活性的影响第88-89页
     ·PKBPE 和AAD 对U14 荷瘤小鼠耳廓肿胀的影响第89-90页
     ·PKBPE 和AAD 对U14 荷瘤小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响第90-91页
     ·PKBPE 和AAD 对ConA 诱导的U14 荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖的影响第91-92页
     ·PKBPE 和AAD 对U14 荷瘤小鼠血清中SOD 和MDA 活性的影响第92-94页
   ·讨论第94-101页
     ·PKBPE 和AAD 对U14 荷瘤小鼠胸腺和脾指数的影响第95-96页
     ·PKBPE 和AAD 对U14 荷瘤小鼠血清中TNF-α和IL-8 含量影响第96-97页
     ·PKBPE 和AAD 对U14 荷瘤小鼠IL-2 活性的影响第97-98页
     ·PKBPE 和AAD 对U14 荷瘤小鼠耳廓肿胀的影响第98页
     ·PKBPE 和AAD 对U14 荷瘤小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响第98-99页
     ·PKBPE 和AAD 对ConA 诱导的U14 荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖的影响第99-100页
     ·PKBPE 和AAD 对U14 荷瘤小鼠血清中SOD 和MDA 的影响第100-101页
   ·本章小结第101-102页
第5章 红松树皮前花青素和白芷生物碱体外诱导人宫颈癌HELA 细胞凋亡的研究第102-136页
   ·材料第103-105页
     ·细胞株第103页
     ·试剂和药品第103页
     ·主要仪器第103-105页
   ·方法第105-114页
     ·细胞培养及收集第105页
     ·MTT 方法检测细胞增殖作用第105-106页
     ·光镜观察HeLa 细胞凋亡的形态学特征第106页
     ·荧光染色观察凋亡细胞形态并计算凋亡指数第106-107页
     ·电镜观察凋亡细胞超微结构第107页
     ·HeLa 细胞DNA 片断化的凝胶电泳检测第107-108页
     ·比色法检测Caspase-3 活性的变化第108页
     ·流式细胞仪检测细胞周期的变化第108-109页
     ·HeLa 细胞端粒酶活性的检测第109-110页
     ·western blot 免疫印记法测定Bax、Bcl-2 和Survivin 蛋白的表达第110-112页
     ·RT-PCR 对肿瘤组织相关基因mRNA 表达水平的检测第112-114页
     ·数据处理第114页
   ·结果第114-128页
     ·PKBPE 和AAD 对HeLa 细胞株生长抑制作用第114-116页
     ·HE 光镜观察PKBPE 诱导HeLa 细胞凋亡的形态学特征第116-117页
     ·荧光染色观察AAD 诱导凋亡细胞形态和凋亡指数的变化第117-118页
     ·PKBPE 和AAD 诱导HeLa 细胞凋亡的电镜观察第118-120页
     ·PKBPE 和AAD 诱导HeLa 细胞DNA 片断化的观察第120页
     ·PKBPE 和AAD 对Caspase-3 活性的影响第120-122页
     ·PKBPE 和AAD 对细胞周期的影响第122-123页
     ·PKBPE 和AAD 对HeLa 细胞端粒酶活性的影响第123页
     ·PKBPE 和AAD 对HeLa 细胞Bax 和Bcl-2 蛋白表达的影响第123-124页
     ·PKBPE 和AAD 对HeLa 细胞Survivin 蛋白表达的影响第124页
     ·PKBPE 和AAD 对HeLa 细胞Bax 和Bcl-2 基因表达水平的影响第124-128页
   ·讨论第128-134页
     ·PKBPE 和AAD 对HeLa 细胞生长的抑制的作用第128页
     ·PKBPE 和AAD 诱导HeLa 细胞凋亡的形态学变化第128-129页
     ·PKBPE 和AAD 诱导HeLa 细胞DNA 片断化的作用第129-130页
     ·PKBPE 和AAD 对Caspase-3 活性的影响第130页
     ·PKBPE 和AAD 对细胞周期的影响第130-131页
     ·PKBPE 和AAD 对HeLa 细胞端粒酶活性的影响第131-132页
     ·PKBPE 和AAD 对HeLa 细胞Survivin 蛋白表达的影响第132-133页
     ·PKBPE 和AAD 通过Bax/Bcl-2 途径诱导HeLa 细胞凋亡第133-134页
   ·本章小结第134-136页
结论第136-138页
附录第138-142页
参考文献第142-153页
攻读博士学位期间承担的科研任务与主要成果第153-155页
致谢第155-156页
作者简介第156页

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