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龙葵多糖亚级分1a抗宫颈癌及免疫调节作用研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-24页
第1章 绪论第24-44页
   ·选题背景第24-25页
   ·宫颈癌发生的分子机制和治疗现状第25-38页
     ·宫颈癌发生的分子机制第25-34页
     ·宫颈癌治疗现状第34-37页
     ·龙葵药学作用研究现状第37-38页
   ·多糖类药物抑制肿瘤生长的作用机理研究进展第38-41页
     ·免疫调节作用第38-39页
     ·改变肿瘤细胞周期第39页
     ·诱导细胞凋亡第39-40页
     ·对细胞生化代谢的影响第40页
     ·清除自由基作用第40-41页
     ·抑制肿瘤组织血管生成与肿瘤的侵袭转移第41页
   ·本文的主要研究内容和意义第41-44页
     ·研究内容第41-42页
     ·研究意义第42-44页
第2章 龙葵多糖的分离、纯化和一般特性分析第44-59页
   ·材料第44-45页
     ·主要试剂第44-45页
     ·主要试验仪器第45页
   ·方法第45-49页
     ·SNL-P 的制备第45-46页
     ·龙葵多糖各级分的制备第46-47页
     ·SNL-P1 亚级分的制备第47页
     ·中性糖含量测定第47页
     ·蛋白质含量测定第47-48页
     ·SNL-P1 各亚级分的纯度鉴定第48页
     ·SNL-P1 各亚级分抗小鼠宫颈癌(U14)活性的测定第48页
     ·SNL-P1a 的特征分析第48-49页
     ·数据处理第49页
   ·结果第49-55页
     ·龙葵多糖的提取第49页
     ·龙葵多糖各级分的制备第49-50页
     ·SNL-P1 亚级分的制备第50-51页
     ·SNL-P1 亚级分总糖含量和蛋白质含量第51页
     ·SNL-P1 各亚级分纯度的鉴定第51页
     ·SNL-P1 各亚级分对小鼠宫颈癌(U14)的抑制作用第51-53页
     ·HPLC 对SNL-P1a 的纯度鉴定第53页
     ·SNL-P1a 紫外光谱分析结果第53-54页
     ·SNL-P1a 红外光谱分析结果第54页
     ·SNL-P1a 的单糖组成分析第54-55页
     ·SNL-P1a 的性状第55页
   ·讨论第55-58页
   ·本章小结第58-59页
第3章 龙葵多糖亚级分1a 体内、外抗宫颈癌作用的研究第59-75页
   ·材料第59-60页
     ·药品和试剂第59-60页
     ·主要试验仪器第60页
     ·试验动物和细胞株第60页
   ·方法第60-63页
     ·SNL-P1a 用药安全性检测第60-61页
     ·SNL-P1a 体外对U14 细胞增殖活性作用第61页
     ·荷U14 宫颈癌实体瘤小鼠模型的建立第61页
     ·荷U14 宫颈癌腹水瘤小鼠模型的建立第61页
     ·SNL-P1a 对小鼠治疗剂量的确定第61-62页
     ·试验分组和治疗方案第62页
     ·肿瘤抑制率和生命延长率的测定第62页
     ·SNL-P1a 对宫颈癌U14 肺转移的干扰作用第62-63页
     ·数据处理第63页
   ·结果第63-71页
     ·SNL-P1a 用药安全性检测第63-65页
     ·SNL-P1a 体外对U14 细胞增殖活性的影响第65页
     ·小鼠荷U14 宫颈癌实体瘤模型和腹水瘤模型建立与评价第65-66页
     ·SNL-P1a 体内对小鼠宫颈癌U14 实体瘤的生长抑制作用第66-67页
     ·SNL-P1a 体内对小鼠宫颈癌U14 腹水瘤的生长抑制作用第67-69页
     ·SNL-P1a 对荷瘤小鼠存活时间的影响第69-70页
     ·SNL-P1a 对小鼠宫颈癌U14 肺转移的干扰作用第70-71页
   ·讨论第71-74页
     ·SNL-P1a 用药安全性的讨论第71页
     ·小鼠荷宫颈癌U14 模型的建立与评价第71-72页
     ·SNL-P1a 体内、外抗宫颈癌活性的讨论第72-73页
     ·SNL-P1a 体内对小鼠宫颈癌肺转移的抑制作用第73-74页
   ·本章小结第74-75页
第4章 龙葵多糖亚级分1a 对荷瘤小鼠机体免疫调节作用的研究第75-98页
   ·材料第75-76页
     ·药品和试剂第75-76页
     ·主要试验仪器第76页
     ·试验动物和细胞株第76页
   ·方法第76-79页
     ·荷小鼠U14 宫颈癌实体瘤模型的建立第76页
     ·试验动物的分组和处理第76页
     ·SNL-P1a 处理对肿瘤组织及免疫器官重量的影响第76-77页
     ·SNL-P1a 处理对荷瘤小鼠外周血单核淋巴细胞亚群的影响第77页
     ·SNL-P1a 处理对荷瘤小鼠血清IFN-γ、IL-4、IL-2 和TNF-α含量的影响第77页
     ·SNL-P1a 处理对荷瘤小鼠胸腺、脾脏显微结构的影响第77页
     ·TUNEL 染色和结果观察第77-78页
     ·免疫组织化学SP 法对凋亡相关基因Bax、Bcl-2 蛋白表达水平的检测第78页
     ·数据统计第78-79页
   ·结果第79-92页
     ·SNL-P1a 处理对荷瘤小鼠体重增长和瘤体重量的影响第79-80页
     ·SNL-P1a 处理对荷瘤小鼠免疫器官重量的影响第80-81页
     ·SNL-P1a 处理对荷瘤小鼠外周血单核淋巴细胞亚群的影响第81页
     ·SNL-P1a 处理对荷瘤小鼠血清IFN-γ、IL-4、IL-2 和TNF-α含量的影响第81-83页
     ·SNL-P1a 处理对荷瘤小鼠胸腺、脾脏组织结构的影响第83页
     ·SNL-P1a 处理对荷瘤小鼠胸腺、脾脏组织细胞凋亡的影响第83-87页
     ·SNL-P1a 处理对荷瘤小鼠胸腺组织细胞Bcl-2、Bax 蛋白表达的影响.第87-90页
     ·SNL-P1a 处理对荷瘤小鼠脾脏组织细胞Bcl-2、Bax 蛋白表达的影响.第90-92页
   ·讨论第92-97页
     ·SNL-P1a 对荷瘤小鼠外周血单核淋巴细胞亚群的影响第92-93页
     ·SNL-P1a 对荷瘤小鼠血清细胞因子的影响第93-94页
     ·SNL-P1a 对免疫器官的影响第94-96页
     ·SNL-P1a 对免疫器官保护作用机制第96-97页
   ·本章小结第97-98页
第5章 龙葵多糖亚级分1a 对荷瘤小鼠抗氧化防御体系的影响第98-117页
   ·材料第98-99页
     ·药品和试剂第98-99页
     ·主要试验仪器第99页
     ·试验动物和细胞株第99页
   ·方法第99-101页
     ·荷小鼠U14 宫颈癌实体瘤模型的建立第99页
     ·试验动物的分组和处理第99-100页
     ·荷瘤小鼠血清抗氧化能力的测定第100页
     ·荷瘤小鼠肝、肾、胸腺、脾脏和肿瘤组织抗氧化能力测定第100页
     ·荷瘤小鼠血清AKP、LDH 水平测定第100页
     ·SNL-P1a 体外清除·OH 自由基能力的测定第100-101页
     ·SNL-P1a 体外清除O_2~(·-)自由基能力的测定第101页
     ·SNL-P1a 体外清除DPPH 自由基能力的测定第101页
     ·数据统计第101页
   ·结果第101-110页
     ·SNL-P1a 处理对荷瘤小鼠体重的影响第101-102页
     ·SNL-P1a 对U14 宫颈癌生长的影响第102-103页
     ·SNL-P1a 对荷瘤小鼠血清抗氧化能力的影响第103-104页
     ·SNL-P1a 对肝、肾组织抗氧化能力的影响第104-105页
     ·SNL-P1a 对荷瘤小鼠胸腺、脾脏抗氧化能力的影响第105-107页
     ·SNL-P1a 对荷瘤小鼠肿瘤组织抗氧化能力的影响第107页
     ·SNL-P1a 对荷瘤小鼠血清AKP、LDH 活性的影响第107-108页
     ·SNL-P1a 体外对·OH 自由基的清除作用第108-109页
     ·SNL-P1a 体外对0_2~(·-)自由基的清除作用第109-110页
     ·SNL-P1a 体外对DPPH 自由基的清除作用第110页
   ·讨论第110-115页
     ·SNL-P1a 对荷瘤小鼠血清抗氧化防御体系的影响第111-112页
     ·SNL-P1a 对肝脏、肾脏抗氧化防御体系的影响第112页
     ·SNL-P1a 对胸腺、脾脏组织抗氧化防御体系的影响第112-113页
     ·SNL-P1a 对肿瘤组织抗氧化防御体系的影响第113页
     ·SNL-P1a 对荷瘤小鼠血清AKP 和LDH 活性的影响第113-114页
     ·SNL-P1a 体外对自由基的清除作用第114-115页
   ·本章小结第115-117页
第6章 龙葵多糖亚级分1a 干扰细胞周期及诱导肿瘤细胞凋亡机制的研究第117-150页
   ·材料第117-119页
     ·药品和试剂第117-118页
     ·主要试验仪器第118页
     ·试验动物和细胞株第118-119页
   ·方法第119-124页
     ·荷小鼠U14 宫颈癌实体瘤模型的建立第119页
     ·试验动物的分组和处理第119页
     ·SNL-P1a 对移植性小鼠宫颈癌U14 的抑制作用第119页
     ·SNL-P1a 处理对小鼠肿瘤组织细胞周期的影响第119-120页
     ·SNL-P1a 处理对小鼠肿瘤组织形态的影响第120页
     ·TUNEL 染色和结果观察第120页
     ·AnnexinⅤ-FITC/PI 双标流式细胞术检测凋亡第120-121页
     ·免疫组织化学SP 法对肿瘤组织相关基因蛋白水平的检测第121页
     ·RT-PCR 对肿瘤相关基因m RNA 表达水平的检测第121-123页
     ·肿瘤组织线粒体膜电位(Δψm)的测定第123页
     ·肿瘤组织胞浆内[Ca~(2+)]的测定第123-124页
     ·流式细胞术对肿瘤组织特异性蛋白的检测第124页
     ·数据统计第124页
   ·结果第124-142页
     ·SNL-P1a 处理对荷瘤小鼠肿瘤生长的影响第124-125页
     ·SNL-P1a 处理对小鼠肿瘤组织细胞周期的影响第125-126页
     ·SNL-P1a 处理对小鼠肿瘤组织显微结构的影响第126-127页
     ·SNL-P1a 处理对肿瘤组织超微结构的影响第127-128页
     ·TUNEL 染色检测SNL-P1a 对肿瘤凋亡细胞数量的影响第128-129页
     ·AnnexinⅤ-FITC/PI 双标检测凋亡结果第129-130页
     ·SNL-P1a 对肿瘤组织细胞Δψm 的影响第130-132页
     ·SNL-P1a 对肿瘤组织细胞内游离[Ca~(2+)]的影响第132页
     ·免疫组化法对小鼠肿瘤组织肿瘤相关蛋白的检测结果第132-138页
     ·流式细胞术对小鼠肿瘤组织肿瘤相关蛋白表达的分析结果第138-140页
     ·SNL-P1a 对肿瘤组织Bcl-2 和Bax 基因mRNA 表达水平的影响第140-142页
   ·讨论第142-148页
     ·SNL-P1a 对小鼠肿瘤组织细胞周期及PCNA 和c-myc 蛋白表达的影响第142-143页
     ·SNL-P1a 处理对肿瘤组织细胞周期相关蛋白的影响第143-145页
     ·SNL-P1a 处理诱导细胞凋亡的发生第145-146页
     ·SNL-P1a 处理对肿瘤组织细胞凋亡相关蛋白的影响第146-148页
   ·本章小结第148-150页
结论第150-152页
附录 缩略语表第152-154页
参考文献第154-172页
攻读博士学位期间承担的科研任务与主要成果第172-174页
致谢第174-175页
作者简介第175页

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