| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-28页 |
| 1 银耳研究进展综述 | 第12-18页 |
| ·银耳简介 | 第12页 |
| ·银耳的形态特征及其生长环境和主产地 | 第12页 |
| ·形态特征 | 第12页 |
| ·生长环境及主产地 | 第12页 |
| ·银耳的生活史 | 第12-13页 |
| ·银耳菌株的生活条件 | 第13-14页 |
| ·银耳的食用价值与药用价值 | 第14页 |
| ·银耳的栽培模式 | 第14页 |
| ·银耳的生物学研究 | 第14-16页 |
| ·银耳的遗传与育种 | 第15页 |
| ·银耳的保藏方法 | 第15-16页 |
| ·银耳病虫害 | 第16页 |
| ·银耳的生物技术研究和发酵工程 | 第16-17页 |
| ·银耳的总体研究概况 | 第17-18页 |
| 2 发酵中培养基的优化方法 | 第18-21页 |
| ·单因素试验法 | 第18页 |
| ·正交设计法 | 第18-19页 |
| ·均匀设计法 | 第19页 |
| ·二次回归正交旋转组合法 | 第19页 |
| ·响应面优化设计法 | 第19-20页 |
| ·遗传算法优化法 | 第20-21页 |
| 3 覃菌的交配系统 | 第21-26页 |
| ·覃菌的交配系统 | 第21-22页 |
| ·初级同宗结合 | 第21页 |
| ·次级同宗结合 | 第21页 |
| ·二极性异宗结合 | 第21-22页 |
| ·四极性异宗结合 | 第22页 |
| ·蕈菌交配型基因的研究进展 | 第22-24页 |
| ·二极性交配系统的遗传结构 | 第22页 |
| ·四极性交配系统的遗传结构 | 第22-24页 |
| ·A 交配型位点的结构及功能 | 第22-23页 |
| ·B 交配型位点的结构和功能 | 第23-24页 |
| ·蕈菌交配基因的克隆 | 第24-26页 |
| ·染色体步移法 | 第24-25页 |
| ·通过序列保守性克隆交配型基因 | 第25页 |
| ·功能互补法和质粒粒抢救法克隆交配型基因 | 第25页 |
| ·目前已克隆完的交配型因子 | 第25-26页 |
| 4 本研究的目的意义以及技术路线 | 第26-28页 |
| ·目的意义 | 第26-27页 |
| ·技术路线 | 第27-28页 |
| 第二章 银耳模式菌株筛选及其单孢分离鉴定 | 第28-45页 |
| 1 材料与方法 | 第28-34页 |
| ·供试菌株 | 第28-29页 |
| ·培养基 | 第29-30页 |
| ·试剂与仪器 | 第30-31页 |
| ·试剂 | 第30页 |
| ·仪器：(见表2-3) | 第30-31页 |
| ·芽孢培养 | 第31页 |
| ·抗性筛选芽孢的前培养 | 第31页 |
| ·银耳芽孢潮霉素的平板培养 | 第31页 |
| ·银耳芽孢的培养和收集 | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31-33页 |
| ·银耳担孢子的收集 | 第31-32页 |
| ·DNA 提取方法 | 第32-33页 |
| ·ITS-PCR 分析 | 第33-34页 |
| ·ITS 扩增引物为真菌通用引物IT51、IT54 (由上海生物工程有限公司合成) | 第33页 |
| ·增反应体系及程序（2-4） | 第33页 |
| ·脂糖凝胶上电泳分离 | 第33页 |
| ·银耳菌株的ITS 测序 | 第33-34页 |
| 2 实验结果与分析 | 第34-43页 |
| ·试验材料的验证 | 第34-36页 |
| ·形态学验证 | 第34-35页 |
| ·分子验证 | 第35-36页 |
| ·潮霉素敏感菌株的筛选 | 第36-37页 |
| ·高产菌株的筛选 | 第37-38页 |
| ·用于双基因转化的菌株筛选 | 第38-41页 |
| ·银耳芽孢与菌丝间营养转化条件的研究 | 第41-43页 |
| ·银耳菌丝向芽孢转变的条件探索 | 第41-42页 |
| ·银耳芽孢向菌丝转变的条件探索 | 第42-43页 |
| 3 结论 | 第43-45页 |
| 第三章银耳遗传转化受体菌株的发酵条件研究 | 第45-68页 |
| 1 材料与方法 | 第45-46页 |
| ·供试菌株 | 第45页 |
| ·培养基 | 第45页 |
| ·主要试剂 | 第45-46页 |
| ·主要仪器与设备（见表3-1） | 第46页 |
| 2 实验方法 | 第46-50页 |
| ·银耳芽孢吸收波长的确定 | 第46-47页 |
| ·OD 值测定及其前处理 | 第47页 |
| ·母种制备 | 第47页 |
| ·吸光度-银耳芽孢个数标准曲线的制作 | 第47页 |
| ·温度对银耳芽孢的生长影响 | 第47页 |
| ·不同 pH 对银耳芽孢的生长影响 | 第47-48页 |
| ·不同碳源对银耳芽孢的生长影响 | 第48页 |
| ·不同氮源对银耳芽孢的生长影响 | 第48页 |
| ·主要矿质元素对银耳芽孢的生长影响 | 第48-49页 |
| ·生长素对银耳芽孢的生长影响 | 第49页 |
| ·维生素对银耳芽孢的生长影响 | 第49页 |
| ·响应面法优化银耳发酵培养基实验设计 | 第49-50页 |
| 3 结果与分析 | 第50-67页 |
| ·银耳发酵生物量的快速测定方法研究 | 第50-51页 |
| ·银耳菌株T0040 的OD 值全波长扫描 | 第50页 |
| ·吸光度-银耳芽孢个数标准曲线的制作 | 第50-51页 |
| ·银耳发酵培养生物量变化特性 | 第51页 |
| ·温度对银耳芽孢的生长影响 | 第51-52页 |
| ·pH 对银耳芽孢的生长影响 | 第52-53页 |
| ·碳源对银耳芽孢的生长影响 | 第53-55页 |
| ·氮源对银耳芽孢的生长影响 | 第55-57页 |
| ·主要矿质元素对银耳芽孢生长的影响 | 第57-59页 |
| ·生长素对银耳芽孢生长的影响 | 第59-60页 |
| ·维生素对银耳芽孢生长的影响 | 第60-62页 |
| ·响应面法优化银耳发酵培养基 | 第62-67页 |
| 4 结论 | 第67-68页 |
| 第四章 银耳交配型相关因子的克隆 | 第68-79页 |
| 1 材料与方法 | 第68-69页 |
| ·试验材料 | 第68页 |
| ·培养基 | 第68-69页 |
| ·试剂和仪器 | 第69页 |
| ·试剂 | 第69页 |
| ·仪器 | 第69页 |
| 2 实验方法 | 第69-73页 |
| ·基因组DNA 的提取 | 第69页 |
| ·寡核苷酸引物设计（引物均由宝生物公司合成） | 第69-70页 |
| ·PCR 扩增反应 | 第70页 |
| ·克隆与测序 | 第70-71页 |
| ·目的片段与载体的连接 | 第71页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第71-72页 |
| ·阳性克隆的检测 | 第72页 |
| ·序列分析 | 第72-73页 |
| 3 结果与讨论 | 第73-78页 |
| ·简并引物PCR 获取的与MIP 基因相关的特异片段 | 第73-75页 |
| ·信息素受体基因片段（B 因子）部分片段的获得 | 第75-78页 |
| 4 结论 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 附图 | 第84-87页 |