禽病原性大肠杆菌O2菌株跨膜输出蛋白基因文库的构建与分析
| 致谢 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 目次 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-32页 |
| 1 禽病原性大肠杆菌概述 | 第13-18页 |
| ·禽病原性大肠杆菌生理生化特性 | 第13-14页 |
| ·禽病原性大肠杆菌的抗原及血清型 | 第14页 |
| ·禽病原性大肠杆菌诊断方法 | 第14-18页 |
| ·大肠杆菌基因组研究进展 | 第18页 |
| 2 禽病原性大肠杆菌的重要免疫原 | 第18-23页 |
| ·菌毛 | 第19-20页 |
| ·毒素 | 第20-21页 |
| ·铁转运系统 | 第21页 |
| ·外膜蛋白 | 第21-23页 |
| 3 细菌跨膜分泌蛋白捕获系统的研究动态 | 第23-28页 |
| ·细菌跨膜蛋白的结构和功能 | 第23-24页 |
| ·跨膜分泌蛋白的信号肽序列特点 | 第24页 |
| ·跨膜蛋白拓扑结构的研究 | 第24-27页 |
| ·捕获跨膜蛋白基因的载体 | 第27-28页 |
| 4 rPCR方法构建基因组文库介绍 | 第28-29页 |
| ·构建基因文库方法 | 第28-29页 |
| ·Random PCR介绍 | 第29页 |
| 5 本研究的工作基础、意义和主要内容 | 第29-32页 |
| ·本研究的工作基础 | 第29-31页 |
| ·本研究的意义和主要内容 | 第31-32页 |
| 第二章 禽病原性大肠杆菌基因组文库的构建 | 第32-50页 |
| 摘要 | 第32-33页 |
| 1 材料 | 第33-34页 |
| ·质粒与菌株 | 第33页 |
| ·生化试剂和分子生物学试剂 | 第33-34页 |
| 2 方法 | 第34-40页 |
| ·质粒pMB-Ara-T的大量制备 | 第34页 |
| ·T载体的制备 | 第34-35页 |
| ·电转化感受态细胞的制备和转化 | 第35-37页 |
| ·禽病原性大肠杆菌O2菌株基因组DNA的抽提 | 第37页 |
| ·rPCR模板制备条件的优化 | 第37-38页 |
| ·基因组随即片段的rPCR扩增 | 第38页 |
| ·rPCR产物的纯化 | 第38页 |
| ·基因文库的制备 | 第38-39页 |
| ·文库容量与质量的检测 | 第39页 |
| ·文库的筛选 | 第39页 |
| ·序列测定与生物信息学分析 | 第39-40页 |
| 3 结果 | 第40-47页 |
| ·质粒pMB-Ara-T的制备 | 第40页 |
| ·禽病原性大肠杆菌O2菌株基因组DNA的抽提 | 第40-41页 |
| ·rPCR模板制备条件的优化 | 第41页 |
| ·基因组随机片段的rPCR扩增与回收 | 第41页 |
| ·基因文库的制备 | 第41页 |
| ·文库容量与质量的检测 | 第41-42页 |
| ·文库筛选 | 第42页 |
| ·序列测定与生物信息学分析 | 第42-47页 |
| 4 讨论 | 第47-50页 |
| 参考文献 | 第50-59页 |
| 附录一 | 第59-71页 |
| 附录二 | 第71-78页 |
| 作者简历及在学期间所取得的科研成果 | 第78页 |
