中文摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
缩略词和英汉对照 | 第10-12页 |
1. 前言 | 第12-30页 |
·课题的提出 | 第12页 |
·正链 RNA病毒与寄主植物的相互作用 | 第12-17页 |
·植物正链 RNA病毒的复制 | 第13页 |
·病毒在植物体内的运输 | 第13-14页 |
·病毒在植物细胞间的转运 | 第13-14页 |
·病毒的长距离运输 | 第14页 |
·寄主植物的症状表现和抗病毒特性 | 第14-17页 |
·寄主植物的症状表现 | 第14-15页 |
·寄主植物的抗病毒特性 | 第15-17页 |
·抗病毒基因 | 第16页 |
·基于基因沉默的抗病机制 | 第16-17页 |
·番茄抗病毒基因工程研究进展 | 第17-19页 |
·病毒来源的抗性基因策略 | 第17-18页 |
·外壳蛋白基因介导的抗性 | 第17-18页 |
·RNA介导的抗性 | 第18页 |
·非病毒基因介导的抗性策略 | 第18-19页 |
·核糖体失活蛋白基因 | 第18页 |
·抗TMV的N基因 | 第18页 |
·寄主因子 | 第18-19页 |
·马铃薯 Y病毒属病毒基因组 | 第19-21页 |
·马铃薯 Y病毒属病毒基因结构 | 第19-21页 |
·真核翻译起始因子4E介导的抗病毒机理 | 第21-26页 |
·真核翻译起始因子4E的结构、功能及调节 | 第21-23页 |
·eIF4E的结构 | 第21-22页 |
·eIF4E的功能 | 第22-23页 |
·eIF4E的调节机制 | 第23页 |
·eIF4E结合蛋白4E-BPs的调节作用 | 第23页 |
·蛋白激酶的调节作用 | 第23页 |
·eIF4E家族 | 第23-24页 |
·eIF4E的抗病毒机制 | 第24-26页 |
·真核翻译起始因子4E与植物病毒感染的联系 | 第26-28页 |
·马铃薯Y病毒属病毒选择利用eIF4E家族成员 | 第28-29页 |
·本研究的目的与内容 | 第29-30页 |
2. 材料与方法 | 第30-38页 |
·材料 | 第30页 |
·植物材料 | 第30页 |
·菌株、质粒及试剂 | 第30页 |
·引物设计 | 第30页 |
·方法 | 第30-38页 |
·番茄的遗传转化 | 第31-32页 |
·转基因植株的分子鉴定 | 第32-35页 |
·番茄基因组 DNA的提取 | 第32-33页 |
·转基因植株的PCR检测 | 第33页 |
·反转录 PCR | 第33-35页 |
·总 RNA的提取 | 第33-34页 |
·RT-PCR | 第34页 |
·基因组织/器官特异性表达分析 | 第34-35页 |
·转基因植株的病毒接种和抗病性鉴定 | 第35-36页 |
·病毒来源 | 第35页 |
·接种方法 | 第35-36页 |
·病毒病发病情况调查 | 第36页 |
·病毒 RNA RT-PCR检测 | 第36页 |
·与抗病性相关的生理生化指标的测定 | 第36-38页 |
·接种、取样 | 第36-37页 |
·植株形态学的观察 | 第37页 |
·生理生化指标的测定 | 第37-38页 |
3. 结果与分析 | 第38-51页 |
·T0代转基因植株的获得 | 第38页 |
·T0代转基因植株的分子鉴定 | 第38-44页 |
·T0代转基因植株的PCR检测 | 第38-39页 |
·转基因植株的RT-PCR检测 | 第39-41页 |
·番茄eIF4E和eIF(iso)4E基因在不同组织中的表达分析 | 第39-40页 |
·番茄eIF4E基因正义表达对内源基因表达的影响 | 第40-41页 |
·番茄eIF(iso)4E基因正义表达对内源基因表达的影响 | 第41页 |
·部分 T0代转基因植株的抗病性鉴定 | 第41-44页 |
·部分 T0代转基因植株接种 PVY病毒后的症状表现 | 第41-42页 |
·病毒 RNA的RT-PCR分析 | 第42-44页 |
·转基因T1代植株的鉴定 | 第44-49页 |
·转基因T1代植株的卡那抗性鉴定和 PCR检测 | 第44页 |
·转基因T1代植株的抗病性鉴定 | 第44-46页 |
·转基因T1代植株接种病毒后的症状表现 | 第44-46页 |
·病毒 RNA的RT-PCR分析 | 第46页 |
·与抗病性相关的生理生化指标的测定 | 第46-48页 |
·叶片 SOD活性与番茄 PVY抗性的关系 | 第46页 |
·番茄植株接种 PVY后 SOD的变化 | 第46-48页 |
·PVY对转基因植株干物重的影响 | 第48-49页 |
·目标基因的性状分离调查 | 第49-51页 |
4. 讨论 | 第51-56页 |
·番茄遗传转化存在的几个问题 | 第51-52页 |
·番茄的遗传转化效率问题 | 第51页 |
·反义表达的转基因植株无法获得问题 | 第51-52页 |
·病毒检测技术 | 第52页 |
·生理生化指标的变化与抗病性的关系 | 第52-54页 |
·真核翻译起始因子在病毒侵染中的作用 | 第54页 |
·植物抗病毒基因工程的可行性 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
附录 | 第64-68页 |
附录1. 基因信息 | 第64-66页 |
附录2. 番茄基因组DNA小量提取法提取液配方 | 第66-67页 |
附录3. 质粒的小量提取法 | 第67-68页 |
附录4. 硕士在读期间发表的论文 | 第68页 |