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番茄抗坏血酸生物合成酶GME和MIOX的功能分析

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
缩略词表第10-12页
1 前言第12-21页
   ·课题的提出第12-13页
   ·抗坏血酸在植物中的生理功能第13-15页
     ·在抗氧化系统中的作用第13-14页
     ·作为酶的辅助因子第14页
     ·在植物生长中的作用第14-15页
   ·高等植物中抗坏血酸的生物合成途径第15-16页
   ·抗坏血酸合成相关酶的研究进展第16-20页
     ·GDP-D-甘露糖焦磷酸化酶(GMP)研究进展第16-17页
     ·GDP-甘露糖-3',5'-差向异构酶(GME)的研究进展第17-18页
     ·肌醇氧酶(MIOX)的研究进展第18-19页
     ·L-半乳糖酸-1,4-内酯脱氢酶(GLDH)研究进展第19-20页
   ·本研究的目的与内容第20-21页
2 材料与方法第21-28页
   ·实验材料第21-22页
     ·植物材料第21页
     ·菌株、基因及质粒载体第21页
     ·试剂与引物第21-22页
     ·所用溶液配方第22页
   ·实验方法第22-28页
     ·小量法提取番茄DNA第22-23页
     ·Trizol法提取植物总RNA第23-24页
     ·反转录RNA获得cDNA第一条链第24页
     ·农杆菌介导番茄遗传转化第24-25页
     ·转基因番茄植株的分子检测第25-26页
     ·转基因番茄植株AsA含量的测定第26页
     ·添加AsA、MI对GME、MIOX酶活性的影响第26页
     ·转基因材料抗逆性的初步分析第26-28页
3 结果与分析第28-47页
   ·转基因植株的获得第28-29页
   ·转基因植株的分子检测第29-34页
     ·T_0代转基因番茄的PCR检测第29-30页
     ·T_0代转基因番茄植株靶基因表达量分析第30-32页
     ·T_1代转基因番茄的遗传分析第32-34页
   ·基因组织表达特异性分析第34-36页
     ·GME1基因在番茄不同组织中的表达分析第34-35页
     ·GME2基因在番茄不同组织中的表达分析第35页
     ·MIOX基因在番茄不同组织中的表达分析第35-36页
   ·转基因番茄T_0代AsA含量测定第36-40页
     ·GME1转基因番茄T_0代AsA含量测定第36-37页
     ·GME2转基因番茄T_0代AsA含量测定第37-39页
     ·MIOX转基因番茄T_0代AsA含量测定第39-40页
   ·添加AsA、MI分别对GME酶活性、MIOX酶活性的影响第40-41页
     ·AsA对GME酶活性的影响第40-41页
     ·MI对MIOX酶活性的影响第41页
   ·转基因材料抗逆性的初步分析第41-44页
     ·逆境下基因表达分析第41-42页
     ·种子发芽耐盐性实验第42-44页
   ·转基因植株离体叶片失水率第44-45页
   ·转基因植株抗氧化能力检测第45-47页
4 讨论第47-51页
   ·有关GDP-甘露糖-3',5'-差向异构酶第47页
   ·有关肌醇氧酶第47-48页
   ·KM喷施方法研究转基因植株后代遗传分离的初步探讨第48-49页
   ·抗坏血酸含量测量方法第49页
   ·转基因调控抗坏血酸生物合成的效果第49-50页
   ·通过调控VC合成基因达到提高植物抗逆性的可行性分析第50-51页
参考文献第51-59页
致谢第59页

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