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番茄芯片杂交差异表达耐旱相关基因的克隆与分析

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
缩略词表第10-11页
1 文献综述第11-24页
   ·课题的提出第11页
   ·植物抗旱的分子生物学进展第11-20页
     ·植物对非生物逆境胁迫的应答反应第11-15页
     ·植物细胞在干旱胁迫诱导表达的基因及编码产物第15-20页
   ·研究基因功能的常用方法第20-22页
     ·基因芯片技术第20-21页
     ·超量表达第21页
     ·RNA干涉和反义RNA第21-22页
   ·LEA蛋白的研究进展第22-23页
     ·LEA蛋白的概述第22页
     ·LEA蛋白的分类及其结构特征第22-23页
   ·本研究的目的和意义第23-24页
2 材料与方法第24-31页
   ·实验材料第24页
     ·植物材料第24页
     ·菌株、质粒及试剂第24页
     ·引物第24页
   ·常用培养基第24-25页
     ·LB液体培养基第24页
     ·LB固体培养基第24-25页
   ·实验方法第25-31页
     ·RNA的反转录第25页
     ·基因cDNA的克隆第25-27页
     ·基因的生物信息学分析第27-28页
     ·番茄的遗传转化及PCR检测第28-29页
     ·组织表达分析第29页
     ·原核表达载体的构建第29-30页
     ·基因在大肠杆菌中的功能验证第30-31页
3 结果与分析第31-43页
   ·番茄叶片总RNA的提取及反转录第31页
   ·SlLEA3基因的克隆与分析第31-43页
     ·SlLEA3基因cDNA的克隆第31-32页
     ·SlLEA3基因的生物信息学分析第32-37页
     ·SpHox和SpTR8转基因植株的获得和PCR检测第37-38页
     ·候选基因相关组织表达分析第38-40页
     ·原核表达载体pET-SlLEA3的构建及功能验证第40-43页
4 讨论第43-46页
   ·候选基因在芯片中的数字化结果第43页
   ·生物信息学在基因功能研究中的应用第43-44页
   ·候选基因的组织表达差异第44页
   ·LEA蛋白可提高原核细胞的抗渗透性第44-45页
   ·关于后续工作的设想第45-46页
     ·转基因后代的分离纯化和田间抗旱性鉴定第45页
     ·转基因植株的分子生物学分析第45页
     ·SlLEA3启动子的克隆与分析第45-46页
参考文献第46-54页
致谢第54-55页
附录一:植物DNA的小量法提取程序第55-56页
附录二:质粒的小量提取方法第56-57页
附录三:TriZOL一步法提取植物总RNA方法第57-58页
附录四:大肠杆菌(DH5α和BL21)的热击感受态的制备第58-59页
附录五:相关的载体图:第59页

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