| 中文摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-34页 |
| 引言 | 第14页 |
| 1 SOD 的研究进展 | 第14-29页 |
| ·SOD 的发现与命名 | 第14-15页 |
| ·SOD 的分布与类型 | 第15-16页 |
| ·SOD 的结构和性质 | 第16-21页 |
| ·SOD 的分子生物学 | 第21-28页 |
| ·SOD 的应用 | 第28-29页 |
| 2 热稳定性超氧化物歧化酶的研究进展及意义 | 第29-32页 |
| ·热稳定性超氧化物歧化酶的研究进展 | 第29-31页 |
| ·热稳定性超氧化物歧化酶的研究意义 | 第31-32页 |
| 3. 本研究的立题依据、研究内容和技术路线 | 第32-34页 |
| ·立题依据 | 第32页 |
| ·研究内容 | 第32-33页 |
| ·技术路线 | 第33-34页 |
| 第二章 嗜热子囊菌光孢变种 Mn-SOD 基因的cDNA 克隆及序列分析 | 第34-55页 |
| 1 材料与方法 | 第34-43页 |
| ·材料 | 第34-36页 |
| ·供试菌株 | 第34页 |
| ·菌株与质粒 | 第34页 |
| ·酶和生化试剂 | 第34-35页 |
| ·仪器 | 第35页 |
| ·培养基 | 第35页 |
| ·溶液配制 | 第35-36页 |
| ·实验方法 | 第36-43页 |
| ·引物设计 | 第36页 |
| ·总RNA 的提取（Trizol 法） | 第36页 |
| ·紫外检测RNA 产率和纯度 | 第36-37页 |
| ·反转录cDNA 第一链的合成 | 第37页 |
| ·目的基因全长cDNA 的克隆 | 第37-42页 |
| ·全长序列的生物信息学分析 | 第42-43页 |
| 2. 结果与分析 | 第43-52页 |
| ·嗜热子囊菌光孢变种 Mn-SOD 基因编码区cDNA 的分离 | 第43-44页 |
| ·Mn-SOD 基因的核苷酸序列和氨基酸序列分析 | 第44-52页 |
| ·Mn-SOD 基因的核苷酸序列分析 | 第45-47页 |
| ·Mn-SOD 基因的氨基酸序列分析 | 第47-49页 |
| ·Mn-SOD 氨基酸同源序列比对 | 第49页 |
| ·Mn-SOD 的立体结构预测 | 第49-52页 |
| 3. 讨论 | 第52-55页 |
| 第三章 嗜热子囊菌Mn-SOD 基因在毕赤酵母中的表达 | 第55-80页 |
| 1. 材料和方法 | 第55-67页 |
| ·材料 | 第55-57页 |
| ·菌株和质粒 | 第55页 |
| ·酶和生化试剂 | 第55-56页 |
| ·培养基及有关溶液的配制 | 第56-57页 |
| ·主要仪器设备 | 第57页 |
| ·实验方法 | 第57-67页 |
| ·Mn-SOD 成熟肽基因序列的分离 | 第57-59页 |
| ·Mn-SOD 基因在毕赤酵母中的表达 | 第59-67页 |
| 2. 结果与分析 | 第67-76页 |
| ·Mn-SOD 成熟肽基因序列的分离 | 第67-69页 |
| ·Mn-SOD 成熟肽基因序列的限制性酶切位点分析结果 | 第67-68页 |
| ·Mn-SOD 成熟肽基因序列的分离 | 第68-69页 |
| ·超氧化物歧化酶基因mnsod 在毕赤酵母中的表达 | 第69-76页 |
| ·酵母表达载体的构建和鉴定 | 第69-71页 |
| ·重组酵母表达质粒 pPIC9K/mnsod 转化 Pichia pastoris GS115及酵母转化子的筛选 | 第71-74页 |
| ·嗜热子囊菌热稳定超氧化物歧化酶mnsod基因在Pichia pastoris 中的高效表达及表达产物的检测 | 第74-76页 |
| 3 讨论 | 第76-80页 |
| 第四章 重组超氧化物歧化酶的的分离纯化及特性研究 | 第80-94页 |
| 1. 材料和方法 | 第80-86页 |
| ·实验材料 | 第80-81页 |
| ·供试菌株 | 第80页 |
| ·BMGY/BMMY 培养基 | 第80页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第80-81页 |
| ·实验方法 | 第81-86页 |
| ·酶活性测定 | 第81页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第81-82页 |
| ·重组超氧化物歧化酶的分离纯化 | 第82页 |
| ·纯度鉴定 | 第82页 |
| ·SOD 的非变性电泳（PAGE）及电泳的活性染色 | 第82-84页 |
| ·重组超氧化物歧化酶性质的研究 | 第84-85页 |
| ·表达超氧化物歧化酶种类的测定 | 第85-86页 |
| 2. 结果与分析 | 第86-91页 |
| ·重组超氧化物歧化酶的分离纯化及鉴定 | 第86-87页 |
| ·DEAE-Sepharose 阴离子交换柱层析 | 第86-87页 |
| ·表达超氧化物歧化酶Mn-SOD 的SDS-PAGE 检测 | 第87页 |
| ·重组超氧化物歧化酶的一般性质 | 第87-91页 |
| ·表达超氧化物歧化酶Mn-SOD 的酶学性质研究 | 第87-90页 |
| ·SOD 种类的测定 | 第90-91页 |
| 3. 讨论 | 第91-94页 |
| ·研究结果 | 第91-92页 |
| ·研究方法 | 第92-93页 |
| ·今后还应开展的工作 | 第93-94页 |
| 第五章结论和建议 | 第94-96页 |
| 1 结论 | 第94页 |
| 2 建议 | 第94-96页 |
| 参考文献 | 第96-107页 |
| 致谢 | 第107-108页 |
| 攻读硕士期间发表论文和申请专利情况 | 第108页 |
