| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-16页 |
| 第一章 引言 | 第16-26页 |
| ·水貂阿留申病概述 | 第16-22页 |
| ·水貂阿留申病简介 | 第16页 |
| ·重要易感动物雪貂 | 第16-17页 |
| ·ADV 分子生物学特性 | 第17页 |
| ·ADV 致病机理的研究进展 | 第17-19页 |
| ·ADV 的传播途径 | 第19页 |
| ·ADV 感染的临床症状 | 第19-21页 |
| ·ADV 感染的实验室诊断 | 第21页 |
| ·ADV 的治疗 | 第21-22页 |
| ·胶体金免疫层析技术概述 | 第22-26页 |
| ·胶体金免疫层析技术的原理 | 第22页 |
| ·胶体金免疫层析技术的优势 | 第22-23页 |
| ·胶体金颗粒的制备 | 第23页 |
| ·胶体金在快速检测中当前及未来的应用 | 第23-24页 |
| ·我国动物疫病GICA 快速诊断领域现状 | 第24-26页 |
| 第二章 水貂阿留申病毒VP2 基因主要抗原区的原核表达 | 第26-39页 |
| ·实验材料与设备 | 第26-27页 |
| ·毒株、质粒和菌种 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26页 |
| ·主要仪器 | 第26页 |
| ·引物设计 | 第26-27页 |
| ·方法 | 第27-33页 |
| ·病毒DNA 提取 | 第27页 |
| ·目的片段扩增 | 第27-28页 |
| ·PCR 产物凝胶电泳检测 | 第28页 |
| ·回收目的片段 | 第28页 |
| ·目的片段与T 载体连接 | 第28-29页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第29页 |
| ·重组质粒的转化 | 第29页 |
| ·转化菌质粒的提取 | 第29-30页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第30页 |
| ·重组质粒的序列测定 | 第30页 |
| ·表达载体的构建 | 第30页 |
| ·VP2 蛋白的诱导表达 | 第30-31页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第31页 |
| ·Western-blot 检测 | 第31-32页 |
| ·最佳诱导条件的确定 | 第32-33页 |
| ·结果 | 第33-38页 |
| ·目的片段扩增 | 第33页 |
| ·重组T 载体的构建 | 第33-34页 |
| ·表达载体的构建 | 第34页 |
| ·阳性工程菌的诱导表达 | 第34-36页 |
| ·表达产物的Western-blot 检测 | 第36页 |
| ·最佳诱导剂量的确定 | 第36-37页 |
| ·最佳诱导时间的确定 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-39页 |
| 第三章 水貂阿留申免疫层析抗体检测试纸的初步研制 | 第39-55页 |
| ·实验材料与设备 | 第39页 |
| ·主要材料与试剂 | 第39页 |
| ·主要实验仪器 | 第39页 |
| ·实验方法 | 第39-43页 |
| ·玻璃器皿的硅化 | 第39-40页 |
| ·柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒 | 第40页 |
| ·胶体金的鉴定 | 第40页 |
| ·待标记二抗的预处理 | 第40页 |
| ·抗体与胶体金结合的最佳pH 的确定 | 第40页 |
| ·抗体与胶体金结合的最佳剂量的确定 | 第40-41页 |
| ·金标抗体的制备与纯化 | 第41页 |
| ·标记用抗原的制备 | 第41页 |
| ·金标垫的制备 | 第41页 |
| ·NC 膜的选择 | 第41-42页 |
| ·试纸的组装 | 第42页 |
| ·包被液和包被浓度的选择 | 第42页 |
| ·特异性试验 | 第42页 |
| ·敏感性试验 | 第42页 |
| ·稳定性试验 | 第42页 |
| ·快速检测试纸的初步应用 | 第42-43页 |
| ·实验结果 | 第43-52页 |
| ·不同还原剂量的胶体金颜色 | 第43页 |
| ·电镜鉴定结果 | 第43-45页 |
| ·胶体金与抗体结合的最佳pH 确定 | 第45页 |
| ·胶体金与抗体结合的最佳浓度确定 | 第45页 |
| ·胶体金与单抗复合物的鉴定 | 第45-46页 |
| ·标记用抗原的纯化 | 第46-47页 |
| ·NC 膜的选择 | 第47页 |
| ·包被液的选择 | 第47-48页 |
| ·包被浓度的选择 | 第48页 |
| ·特异性实验结果 | 第48-49页 |
| ·敏感性实验结果 | 第49-50页 |
| ·稳定性试验 | 第50页 |
| ·快速检测试纸的初步应用 | 第50-52页 |
| ·讨论 | 第52-55页 |
| ·胶体金的品质 | 第52页 |
| ·反应物的浓度 | 第52页 |
| ·反应物的搅拌 | 第52页 |
| ·反应温度 | 第52-53页 |
| ·影响蛋白质吸附于NC 膜的因素 | 第53页 |
| ·引起假阳性原因的分析 | 第53-54页 |
| ·引起假阴性原因的分析 | 第54-55页 |
| 第四章 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 附录 | 第62-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 作者简介 | 第65页 |