| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-30页 |
| ·布鲁氏菌病研究进展 | 第13-24页 |
| ·病原学 | 第13页 |
| ·传染病学 | 第13-15页 |
| ·临床症状 | 第15页 |
| ·布鲁氏菌病的诊断 | 第15-18页 |
| ·布鲁氏菌疫苗研究进展 | 第18-23页 |
| ·免疫株S19 作为疫苗载体的理论依据 | 第23-24页 |
| ·结核菌病研究进展 | 第24-28页 |
| ·概述 | 第24页 |
| ·传染病学 | 第24-25页 |
| ·潜伏期 | 第25页 |
| ·临床症状 | 第25页 |
| ·结核疫苗研究进展 | 第25-28页 |
| ·Ag85B 蛋白的特性 | 第28页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第28-30页 |
| 第二章 材料与方法 | 第30-39页 |
| ·材料 | 第30-31页 |
| ·方法 | 第31-39页 |
| ·引物的设计与合成 | 第31页 |
| ·布鲁氏菌S19 基因组的提取 | 第31页 |
| ·同源重组质粒左右同源臂、ag85b基因、卡那霉素抗性基因的扩增 | 第31-33页 |
| ·PCR产物的回收及纯化 | 第33页 |
| ·回收产物的连接 | 第33页 |
| ·连接产物的转化 | 第33页 |
| ·目的质粒的提取 | 第33-34页 |
| ·重组质粒pSP-bp26-ag85b-k的构建 | 第34-35页 |
| ·S19-ag85b 重组株的构建 | 第35页 |
| ·重组疫苗株S19-ag85b的筛选 | 第35-36页 |
| ·重组疫苗株S19-ag85b的PCR鉴定 | 第36页 |
| ·重组疫苗株S19-ag85b稳定性的鉴定 | 第36页 |
| ·重组疫苗株S19-ag85b的Western Blot 鉴定 | 第36-37页 |
| ·重组疫苗株 S19-ag85b 和亲本株 S19 冻干保存 | 第37-38页 |
| ·重组疫苗株S19-ag85b在小鼠体内安全性试验 | 第38页 |
| ·重组疫苗株S19-ag85b在小鼠体内的短期保护试验 | 第38-39页 |
| 第三章 实验结果 | 第39-49页 |
| ·左右同源臂、卡那霉素抗性基因及ag85b基因的扩增及鉴定 | 第39-40页 |
| ·同源臂的PCR扩增及鉴定 | 第39页 |
| ·卡那霉素抗性基因和 ag85b 基因的 PCR 扩增及鉴定 | 第39-40页 |
| ·同源重组质粒 pSP-bp26-ag85b-k 的酶切鉴定 | 第40-41页 |
| ·重组疫苗株S19-ag85b的PCR鉴定 | 第41-43页 |
| ·卡那霉素抗性基因的PCR鉴定 | 第41-42页 |
| ·氨苄霉素抗性基因的PCR鉴定 | 第42页 |
| ·bp26 基因的PCR鉴定 | 第42-43页 |
| ·ag85b基因的PCR鉴定 | 第43页 |
| ·重组疫苗株S19-ag85b Western Blot鉴定 | 第43-45页 |
| ·Ag85B 蛋白诱导条件的确定 | 第43-44页 |
| ·Ag85B 蛋白的纯化 | 第44-45页 |
| ·重组疫苗株S19-ag85b Western Blot鉴定 | 第45页 |
| ·重组疫苗株S19-ag85b在小鼠体内安全性试验测定结果 | 第45-46页 |
| ·重组疫苗株S19-ag85b的小鼠短期免疫保护试验的测定结果 | 第46-49页 |
| 第四章 讨论 | 第49-51页 |
| ·重组疫苗株S19-ag85b的构建策略 | 第49页 |
| ·重组疫苗株S19-ag85b的PCR鉴定 | 第49页 |
| ·重组疫苗株S19-ag85b的小鼠短期免疫保护试验 | 第49页 |
| ·重组疫苗株S19-ag85b在小鼠体内安全性试验 | 第49-50页 |
| ·展望 | 第50-51页 |
| 第五章 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 作者简历 | 第64页 |