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表达结核分支杆菌Ag85B抗原重组牛布鲁氏菌S19疫苗株的构建

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
第一章 绪论第13-30页
   ·布鲁氏菌病研究进展第13-24页
     ·病原学第13页
     ·传染病学第13-15页
     ·临床症状第15页
     ·布鲁氏菌病的诊断第15-18页
     ·布鲁氏菌疫苗研究进展第18-23页
     ·免疫株S19 作为疫苗载体的理论依据第23-24页
   ·结核菌病研究进展第24-28页
     ·概述第24页
     ·传染病学第24-25页
     ·潜伏期第25页
     ·临床症状第25页
     ·结核疫苗研究进展第25-28页
     ·Ag85B 蛋白的特性第28页
   ·本研究的目的与意义第28-30页
第二章 材料与方法第30-39页
   ·材料第30-31页
   ·方法第31-39页
     ·引物的设计与合成第31页
     ·布鲁氏菌S19 基因组的提取第31页
     ·同源重组质粒左右同源臂、ag85b基因、卡那霉素抗性基因的扩增第31-33页
     ·PCR产物的回收及纯化第33页
     ·回收产物的连接第33页
     ·连接产物的转化第33页
     ·目的质粒的提取第33-34页
     ·重组质粒pSP-bp26-ag85b-k的构建第34-35页
     ·S19-ag85b 重组株的构建第35页
     ·重组疫苗株S19-ag85b的筛选第35-36页
     ·重组疫苗株S19-ag85b的PCR鉴定第36页
     ·重组疫苗株S19-ag85b稳定性的鉴定第36页
     ·重组疫苗株S19-ag85b的Western Blot 鉴定第36-37页
     ·重组疫苗株 S19-ag85b 和亲本株 S19 冻干保存第37-38页
     ·重组疫苗株S19-ag85b在小鼠体内安全性试验第38页
     ·重组疫苗株S19-ag85b在小鼠体内的短期保护试验第38-39页
第三章 实验结果第39-49页
   ·左右同源臂、卡那霉素抗性基因及ag85b基因的扩增及鉴定第39-40页
     ·同源臂的PCR扩增及鉴定第39页
     ·卡那霉素抗性基因和 ag85b 基因的 PCR 扩增及鉴定第39-40页
   ·同源重组质粒 pSP-bp26-ag85b-k 的酶切鉴定第40-41页
   ·重组疫苗株S19-ag85b的PCR鉴定第41-43页
     ·卡那霉素抗性基因的PCR鉴定第41-42页
     ·氨苄霉素抗性基因的PCR鉴定第42页
     ·bp26 基因的PCR鉴定第42-43页
     ·ag85b基因的PCR鉴定第43页
   ·重组疫苗株S19-ag85b Western Blot鉴定第43-45页
     ·Ag85B 蛋白诱导条件的确定第43-44页
     ·Ag85B 蛋白的纯化第44-45页
     ·重组疫苗株S19-ag85b Western Blot鉴定第45页
   ·重组疫苗株S19-ag85b在小鼠体内安全性试验测定结果第45-46页
   ·重组疫苗株S19-ag85b的小鼠短期免疫保护试验的测定结果第46-49页
第四章 讨论第49-51页
   ·重组疫苗株S19-ag85b的构建策略第49页
   ·重组疫苗株S19-ag85b的PCR鉴定第49页
   ·重组疫苗株S19-ag85b的小鼠短期免疫保护试验第49页
   ·重组疫苗株S19-ag85b在小鼠体内安全性试验第49-50页
   ·展望第50-51页
第五章 结论第51-52页
参考文献第52-63页
致谢第63-64页
作者简历第64页

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