| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 引言 | 第8-9页 |
| 1 综述 | 第9-15页 |
| ·AtGLR 基因家族 | 第9-11页 |
| ·AtGLR 家族的构成 | 第9页 |
| ·GLRs 的结构 | 第9-11页 |
| ·拟南芥AtGLR 基因家族的研究进展 | 第11-14页 |
| ·外源信号处理的生理学和电生理研究 | 第11-12页 |
| ·药理学试验 | 第12-13页 |
| ·分子遗传学试验 | 第13-14页 |
| ·展望 | 第14-15页 |
| 2 拟南芥温室培养 | 第15-18页 |
| ·材料和方法 | 第15-17页 |
| ·实验材料 | 第15页 |
| ·主要试剂 | 第15页 |
| ·温室条件下培养拟南芥的方法 | 第15-17页 |
| ·结果 | 第17-18页 |
| 3 AtGLR 基因启动子克隆及表达研究 | 第18-31页 |
| ·材料 | 第18页 |
| ·实验材料 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18页 |
| ·实验方法 | 第18-23页 |
| ·AtGLR 基因启动子引物设计 | 第18-19页 |
| ·AtGLR 基因启动子序列PCR 扩增 | 第19页 |
| ·Promoter∷GUS 载体构建 | 第19页 |
| ·农杆菌感受态的制备 | 第19-21页 |
| ·农杆菌感受态电转化 | 第21页 |
| ·拟南芥浸润法转基因 | 第21-22页 |
| ·卡那霉素霉素平板筛选转基因植株 | 第22页 |
| ·GUS 基因检测 | 第22页 |
| ·GUS 染色 | 第22-23页 |
| ·结果和分析 | 第23-27页 |
| ·启动子序列PCR 扩增结果 | 第23页 |
| ·启动子序列克隆到大肠杆菌结果 | 第23页 |
| ·双酶切结果 | 第23-24页 |
| ·pBI 101.3 双元载体构建结果 | 第24页 |
| ·农杆菌感受态电转后的PCR 验证 | 第24页 |
| ·GUS 基因的PCR 验证 | 第24-25页 |
| ·GUS 染色结果 | 第25页 |
| ·植株GUS 染色分析 | 第25-27页 |
| ·讨论 | 第27-31页 |
| 4 应用Gateway 技术构建amiRNA 干涉载体 | 第31-40页 |
| ·材料 | 第31页 |
| ·实验材料 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31-36页 |
| ·amiRNA 引物设计 | 第31-32页 |
| ·重叠PCR 扩增目的片段 | 第32-33页 |
| ·Gateway 方法构建RNAi 表达载体 | 第33-34页 |
| ·电击转化农杆菌与浸染野生型拟南芥植株 | 第34页 |
| ·基因组PCR 验证重组效果 | 第34页 |
| ·RT-PCR 引物设计 | 第34页 |
| ·Trizol 试剂抽提RNA | 第34-35页 |
| ·RT-PCR 方法 | 第35-36页 |
| ·结果和分析 | 第36-39页 |
| ·重叠PCR 结果 | 第36-37页 |
| ·Gateway 构建载体结果 | 第37页 |
| ·基因组PCR 验证载体转化结果 | 第37页 |
| ·RT-PCR 验证结果 | 第37-38页 |
| ·结果分析 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39-40页 |
| 5 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-44页 |
| 附录A 启动子融合GUS 基因在拟南芥不同组织内的表达 | 第44-46页 |
| 附录B 引物序列 | 第46-49页 |
| 附录C Promter∷GUS 载体测序结果 | 第49-51页 |
| 在学研究成果 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52页 |