摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-8页 |
引言 | 第8-9页 |
1 第一章 文献综述 | 第9-15页 |
·植物内谷氨酸受体基因的发现 | 第9页 |
·谷氨酸受体的结构 | 第9-12页 |
·植物体内谷氨酸受体的功能 | 第12-15页 |
2 第二章 组织与亚细胞定位 | 第15-36页 |
·实验材料 | 第16页 |
·植物材料 | 第16页 |
·菌株与载体 | 第16页 |
·生化试剂 | 第16页 |
·试验方法 | 第16-24页 |
·拟南芥的培养 | 第16-18页 |
·拟南芥因组DNA 粗提方法 | 第18页 |
·基因组PCR 反应体系 | 第18页 |
·DNA 凝胶回收操作方法与酶切连接反应 | 第18-19页 |
·大肠杆菌感受态的制备与转化 | 第19页 |
·农杆菌EHA105 电转感受态的制备与电击转化 | 第19-20页 |
·根瘤农杆菌介导转化野生型拟南芥(花序浸润法) | 第20-21页 |
·启动子引物设计以及PCR 扩增 | 第21页 |
·GFP 融合表达载体引物的设计 | 第21-23页 |
·Promoter::GUS 双元表达载体的构建 | 第23-24页 |
·基因枪轰击水稻愈伤组织 | 第24页 |
·GUS 组织化学染色 | 第24页 |
·GFP 融合基因表达的观察 | 第24页 |
·结果与分析 | 第24-30页 |
·Promoter::GUS 融合表达载体的构建 | 第24-26页 |
·Promoter::cDNA::GFP 融合表达载体的构建 | 第26页 |
·转基因拟南芥植株的获得 | 第26-27页 |
·AtGLRs 的启动子接GUS 基因在拟南芥中的表达分析 | 第27-29页 |
·在针尖刺激(touch)下部分基因的表达变化 | 第29-30页 |
·GFP 融合表达的亚细胞定位 | 第30页 |
·讨论 | 第30-36页 |
3 第三章 突变体植株的获得 | 第36-44页 |
·材料与方法 | 第37-39页 |
·材料 | 第37页 |
·主要试剂 | 第37页 |
·拟南芥总RNA 提取方法 | 第37页 |
·RT-PCR 反应体系 | 第37-38页 |
·重叠PCR 反应体系 | 第38-39页 |
·DNA 提取,载体构建,转染的方法 | 第39页 |
·结果与分析 | 第39-42页 |
·amiRNAs 方法的引物设计与重叠PCR(overlapping PCR)反应 | 第39-40页 |
·Gateway 的方式构建干涉表达载体 | 第40页 |
·电击转化农杆菌与浸染野生型拟南芥植株 | 第40页 |
·基因组PCR 验证重组效果 | 第40-41页 |
·RT-PCR 引物设计 | 第41页 |
·RT-PCR 验证干涉的效果 | 第41-42页 |
·讨论 | 第42-44页 |
参考文献 | 第44-48页 |
附录A 染色图片 | 第48-50页 |
附录B 引物序列 | 第50-52页 |
在学研究成果 | 第52-53页 |
致谢 | 第53页 |