| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 引言 | 第8-9页 |
| 1 第一章 文献综述 | 第9-15页 |
| ·植物内谷氨酸受体基因的发现 | 第9页 |
| ·谷氨酸受体的结构 | 第9-12页 |
| ·植物体内谷氨酸受体的功能 | 第12-15页 |
| 2 第二章 组织与亚细胞定位 | 第15-36页 |
| ·实验材料 | 第16页 |
| ·植物材料 | 第16页 |
| ·菌株与载体 | 第16页 |
| ·生化试剂 | 第16页 |
| ·试验方法 | 第16-24页 |
| ·拟南芥的培养 | 第16-18页 |
| ·拟南芥因组DNA 粗提方法 | 第18页 |
| ·基因组PCR 反应体系 | 第18页 |
| ·DNA 凝胶回收操作方法与酶切连接反应 | 第18-19页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备与转化 | 第19页 |
| ·农杆菌EHA105 电转感受态的制备与电击转化 | 第19-20页 |
| ·根瘤农杆菌介导转化野生型拟南芥(花序浸润法) | 第20-21页 |
| ·启动子引物设计以及PCR 扩增 | 第21页 |
| ·GFP 融合表达载体引物的设计 | 第21-23页 |
| ·Promoter::GUS 双元表达载体的构建 | 第23-24页 |
| ·基因枪轰击水稻愈伤组织 | 第24页 |
| ·GUS 组织化学染色 | 第24页 |
| ·GFP 融合基因表达的观察 | 第24页 |
| ·结果与分析 | 第24-30页 |
| ·Promoter::GUS 融合表达载体的构建 | 第24-26页 |
| ·Promoter::cDNA::GFP 融合表达载体的构建 | 第26页 |
| ·转基因拟南芥植株的获得 | 第26-27页 |
| ·AtGLRs 的启动子接GUS 基因在拟南芥中的表达分析 | 第27-29页 |
| ·在针尖刺激(touch)下部分基因的表达变化 | 第29-30页 |
| ·GFP 融合表达的亚细胞定位 | 第30页 |
| ·讨论 | 第30-36页 |
| 3 第三章 突变体植株的获得 | 第36-44页 |
| ·材料与方法 | 第37-39页 |
| ·材料 | 第37页 |
| ·主要试剂 | 第37页 |
| ·拟南芥总RNA 提取方法 | 第37页 |
| ·RT-PCR 反应体系 | 第37-38页 |
| ·重叠PCR 反应体系 | 第38-39页 |
| ·DNA 提取,载体构建,转染的方法 | 第39页 |
| ·结果与分析 | 第39-42页 |
| ·amiRNAs 方法的引物设计与重叠PCR(overlapping PCR)反应 | 第39-40页 |
| ·Gateway 的方式构建干涉表达载体 | 第40页 |
| ·电击转化农杆菌与浸染野生型拟南芥植株 | 第40页 |
| ·基因组PCR 验证重组效果 | 第40-41页 |
| ·RT-PCR 引物设计 | 第41页 |
| ·RT-PCR 验证干涉的效果 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| 参考文献 | 第44-48页 |
| 附录A 染色图片 | 第48-50页 |
| 附录B 引物序列 | 第50-52页 |
| 在学研究成果 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53页 |