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拟南芥AtGLRⅠ和AtGLRⅢ亚族的基因表达研究

摘要第1-5页
Abstract第5-8页
引言第8-9页
1 第一章 文献综述第9-15页
   ·植物内谷氨酸受体基因的发现第9页
   ·谷氨酸受体的结构第9-12页
   ·植物体内谷氨酸受体的功能第12-15页
2 第二章 组织与亚细胞定位第15-36页
   ·实验材料第16页
     ·植物材料第16页
     ·菌株与载体第16页
     ·生化试剂第16页
   ·试验方法第16-24页
     ·拟南芥的培养第16-18页
     ·拟南芥因组DNA 粗提方法第18页
     ·基因组PCR 反应体系第18页
     ·DNA 凝胶回收操作方法与酶切连接反应第18-19页
     ·大肠杆菌感受态的制备与转化第19页
     ·农杆菌EHA105 电转感受态的制备与电击转化第19-20页
     ·根瘤农杆菌介导转化野生型拟南芥(花序浸润法)第20-21页
     ·启动子引物设计以及PCR 扩增第21页
     ·GFP 融合表达载体引物的设计第21-23页
     ·Promoter::GUS 双元表达载体的构建第23-24页
     ·基因枪轰击水稻愈伤组织第24页
     ·GUS 组织化学染色第24页
     ·GFP 融合基因表达的观察第24页
   ·结果与分析第24-30页
     ·Promoter::GUS 融合表达载体的构建第24-26页
     ·Promoter::cDNA::GFP 融合表达载体的构建第26页
     ·转基因拟南芥植株的获得第26-27页
     ·AtGLRs 的启动子接GUS 基因在拟南芥中的表达分析第27-29页
     ·在针尖刺激(touch)下部分基因的表达变化第29-30页
     ·GFP 融合表达的亚细胞定位第30页
   ·讨论第30-36页
3 第三章 突变体植株的获得第36-44页
   ·材料与方法第37-39页
     ·材料第37页
     ·主要试剂第37页
     ·拟南芥总RNA 提取方法第37页
     ·RT-PCR 反应体系第37-38页
     ·重叠PCR 反应体系第38-39页
     ·DNA 提取,载体构建,转染的方法第39页
   ·结果与分析第39-42页
     ·amiRNAs 方法的引物设计与重叠PCR(overlapping PCR)反应第39-40页
     ·Gateway 的方式构建干涉表达载体第40页
     ·电击转化农杆菌与浸染野生型拟南芥植株第40页
     ·基因组PCR 验证重组效果第40-41页
     ·RT-PCR 引物设计第41页
     ·RT-PCR 验证干涉的效果第41-42页
   ·讨论第42-44页
参考文献第44-48页
附录A 染色图片第48-50页
附录B 引物序列第50-52页
在学研究成果第52-53页
致谢第53页

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