摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第14-19页 |
1.1 间质干细胞 | 第14-17页 |
1.1.1 干细胞 | 第14页 |
1.1.2 间质干细胞 | 第14页 |
1.1.3 骨髓间质干细胞 | 第14-15页 |
1.1.4 骨髓间质干细胞的分离和鉴定 | 第15-16页 |
1.1.5 间质干细胞的临床应用 | 第16-17页 |
1.2 血小板血浆 | 第17-19页 |
1.2.1 血小板 | 第17-18页 |
1.2.2 贫、富血小板血浆 | 第18-19页 |
第二章 研究目的、方法、实验设计和意义 | 第19-22页 |
2.1 研究目的 | 第19页 |
2.2 研究方法 | 第19-20页 |
2.3 实验设计方案 | 第20-21页 |
2.3.1 间质干细胞的分离、纯化和鉴定 | 第20页 |
2.3.2 贫、富血小板血浆对间质干细胞生物学特性的影响 | 第20-21页 |
2.4 研究意义 | 第21-22页 |
第三章 间质干细胞的分离培养和鉴定 | 第22-30页 |
3.1 材料与仪器 | 第22-24页 |
3.1.1 标本来源 | 第22页 |
3.1.2 实验试剂及耗材 | 第22-23页 |
3.1.3 实验仪器 | 第23页 |
3.1.4 溶液的配制 | 第23-24页 |
3.1.4.1 低糖培养液的配制 | 第23页 |
3.1.4.2 PBS的配制 | 第23-24页 |
3.1.4.3 0.25%胰酶的配制 | 第24页 |
3.1.4.4 成骨诱导液的配制 | 第24页 |
3.2 实验方法 | 第24-27页 |
3.2.1 骨髓间质干细胞的培养 | 第24-25页 |
3.2.2 骨髓间质干细胞的表面标记鉴定 | 第25页 |
3.2.3 骨髓间质干细胞的多向分化潜能鉴定 | 第25-26页 |
3.2.4 骨髓间质干细胞的冻存与复苏 | 第26-27页 |
3.3 实验结果 | 第27-29页 |
3.3.1 骨髓间质干细胞的分离培养及血小板血浆标本 | 第27页 |
3.3.2 骨髓间质干细胞的表面标记鉴定 | 第27-28页 |
3.3.3 骨髓间质干细胞的多向分化潜能鉴定 | 第28-29页 |
3.4 讨论 | 第29-30页 |
第四章 贫、富血小板血浆对骨髓间质干细胞生物学特性的影响 | 第30-48页 |
4.1 材料与仪器 | 第30-32页 |
4.1.1 标本来源 | 第30页 |
4.1.2 实验试剂及耗材 | 第30-31页 |
4.1.3 实验仪器 | 第31页 |
4.1.4 溶液的配制 | 第31-32页 |
4.1.4.1 MTT的配制 | 第31页 |
4.1.4.2 4 %多聚甲醛固定液的配制 | 第31页 |
4.1.4.3 冻存液的配制 | 第31-32页 |
4.1.4.4 Western-blot相关试剂的配制 | 第32页 |
4.2 实验方法 | 第32-37页 |
4.2.1 MTT实验 | 第32-33页 |
4.2.2 不同浓度的血小板血浆对BM-MSCs形态学的影响 | 第33页 |
4.2.3 平板克隆实验 | 第33页 |
4.2.4 Transwell迁移实验 | 第33-34页 |
4.2.5 细胞划痕实验 | 第34页 |
4.2.6 β-半乳糖苷酶染色 | 第34页 |
4.2.7 DAPI细胞核染色 | 第34-35页 |
4.2.8 细胞周期和凋亡实验 | 第35页 |
4.2.9 成骨和成脂诱导实验 | 第35-36页 |
4.2.10 免疫荧光 | 第36页 |
4.2.11 Western-blot | 第36-37页 |
4.2.12 统计学分析 | 第37页 |
4.3 实验结果 | 第37-46页 |
4.3.1 贫、富血小板血浆对骨髓间质干细胞增殖和形态学的影响 | 第37-38页 |
4.3.2 贫、富血小板血浆对骨髓间质干细胞克隆形成能力的影响 | 第38-39页 |
4.3.3 贫、富血小板血浆对骨髓间质干细胞迁移能力的影响 | 第39-40页 |
4.3.4 贫、富血小板血浆对骨髓间质干细胞衰老情况及核染色质的影响 | 第40-41页 |
4.3.5 贫、富血小板血浆对骨髓间质干细胞周期和凋亡的影响 | 第41-42页 |
4.3.6 贫、富血小板血浆对骨髓间质干细胞多向分化能力的影响 | 第42-43页 |
4.3.7 贫、富血小板血浆对骨髓间质干细胞相关蛋白表达的影响 | 第43-46页 |
4.4 讨论 | 第46-48页 |
第五章 实验结论及展望 | 第48-49页 |
5.1 实验结论 | 第48页 |
5.2 展望 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
攻读硕士学位期间发表的论文及获奖 | 第54页 |
一、发表论文情况 | 第54页 |
二、获奖情况 | 第54页 |