摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7页 |
第一章 绪论 | 第13-22页 |
1.1 引言 | 第13页 |
1.2 犬细小病毒概况 | 第13-16页 |
1.2.1 病原学 | 第13-15页 |
1.2.1.1 CPV病毒学分类 | 第13页 |
1.2.1.2 CPV形态和理化特性 | 第13-14页 |
1.2.1.3 CPV基因组结构和编码蛋白 | 第14-15页 |
1.2.2 流行现状 | 第15-16页 |
1.2.2.1 CPV的起源和进化 | 第15页 |
1.2.2.2 CPV在我国的流行现状 | 第15-16页 |
1.3 犬细小病毒检测方法 | 第16-17页 |
1.3.1 病毒的分离 | 第16页 |
1.3.2 血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验 | 第16页 |
1.3.3 酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第16-17页 |
1.3.4 聚合酶链式反应(PCR) | 第17页 |
1.4 重组酶聚合酶扩增技术(RPA) | 第17-21页 |
1.4.1 技术原理 | 第17-18页 |
1.4.2 引物、探针设计 | 第18-19页 |
1.4.3 扩增产物检测方试 | 第19-20页 |
1.4.3.1 凝胶电泳法 | 第19页 |
1.4.3.2 实时荧光RPA法(real-time RPA) | 第19页 |
1.4.3.3 侧流层析试纸条RPA(LFD-RPA) | 第19-20页 |
1.4.4 RPA技术特点及优势 | 第20-21页 |
1.4.4.1 RPA技术的特点 | 第20页 |
1.4.4.2 RPA技术的优势 | 第20-21页 |
1.4.5 RPA技术的应用 | 第21页 |
1.5 研究的目的和意义 | 第21-22页 |
第二章 犬细小病毒重组酶聚合酶扩增技术基础检测方法的建立 | 第22-31页 |
2.1 材料 | 第22页 |
2.1.1 实验材料及试剂 | 第22页 |
2.1.2 仪器设备 | 第22页 |
2.1.3 毒株与临床样品 | 第22页 |
2.2 方法 | 第22-26页 |
2.2.1 质粒构建 | 第22-23页 |
2.2.2 犬细小病毒RPA引物设计筛选 | 第23-24页 |
2.2.3 犬细小病毒RPA引物反应条件的优化 | 第24页 |
2.2.4 犬细小病毒RPA检测方法的敏感性试验 | 第24-25页 |
2.2.5 犬细小病毒RPA检测方法的特异性试验 | 第25-26页 |
2.2.6 犬细小病毒RPA检测方法的样品检测 | 第26页 |
2.3 实验结果与分析 | 第26-30页 |
2.3.1 阳性标准质粒的构建 | 第26-27页 |
2.3.2 犬细小病毒RPA引物筛选结果 | 第27页 |
2.3.3 犬细小病毒RPA引物反应条件优化结果 | 第27-28页 |
2.3.4 犬细小病毒RPA检测方法敏感性试验结果 | 第28-29页 |
2.3.5 犬细小病毒RPA检测方法特异性试验结果 | 第29-30页 |
2.3.6 犬细小病毒RPA检测法的样品检测结果 | 第30页 |
2.4 小结 | 第30-31页 |
第三章 犬细小病毒重组酶聚合酶扩增技术可视化检测方法的初步建立 | 第31-36页 |
3.1 材料 | 第31页 |
3.1.1 实验材料及试剂 | 第31页 |
3.1.2 仪器设备 | 第31页 |
3.1.3 毒株与临床样品 | 第31页 |
3.2 方法 | 第31-33页 |
3.2.1 质粒构建 | 第31页 |
3.2.2 LFD-RPA引物、探针设计 | 第31-32页 |
3.2.3 犬细小病毒LFD-RPA检测方法的敏感性试验 | 第32页 |
3.2.4 犬细小病毒LFD-RPA检测方法的特异性试验 | 第32页 |
3.2.5 犬细小病毒LFD-RPA检测方法的样品检测 | 第32-33页 |
3.3 实验结果与分析 | 第33-35页 |
3.3.1 犬细小病毒LFD-RPA检测方法的敏感性试验结果 | 第33页 |
3.3.2 犬细小病毒LFD-RPA检测方法的特异性试验结果 | 第33-34页 |
3.3.3 犬细小病毒LFD-RPA检测方法的样品检测结果 | 第34-35页 |
3.4 小结 | 第35-36页 |
第四章 讨论 | 第36-37页 |
第五章 全文结论 | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-44页 |
致谢 | 第44-45页 |
作者简历 | 第45页 |