| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-10页 |
| 引言 | 第10-42页 |
| 一、细胞周期检验点与肿瘤 | 第10-16页 |
| （一） 细胞周期检验点通路的组成成分 | 第10-12页 |
| （二） 细胞周期检验点通路 | 第12-15页 |
| （三） 细胞周期检验点与癌症的发生与治疗 | 第15-16页 |
| 二、细胞周期检验点蛋白N651的功能及研究进展 | 第16-21页 |
| （一） N651与DNA损伤修复 | 第17-18页 |
| （二） N651在DSB应答中的作用 | 第18-19页 |
| （三） N651与DNA复制 | 第19页 |
| （四） N651与细胞周期 | 第19-21页 |
| 三、c-Myc 的功能及研究进展 | 第21-28页 |
| （一） 关于Myc的结合与E-box | 第22-23页 |
| （二） Myc调控的基因 | 第23-26页 |
| （三） Myc与干细胞和肿瘤发生 | 第26-27页 |
| （四） Myc 的降解与Myc 靶基因的调控 | 第27-28页 |
| （五） Mxd 蛋白可以限制Myc 结合并抵消Myc 的功能 | 第28页 |
| 四、组蛋白乙酰化修饰、DNA 甲基化与真核生物基因的转录调控 | 第28-35页 |
| （一） 真核生物的染色质结构与转录调控的关系 | 第29-32页 |
| （二） 组蛋白乙酰化修饰与转录调控 | 第32-34页 |
| （三） 组蛋白乙酰化修饰酶 | 第34-35页 |
| 五、组蛋白乙酰基转移酶p300/CBP 复合物的研究进展 | 第35-40页 |
| （一） p300/CBP 的结构 | 第35-37页 |
| （二） p300/CBP 的功能 | 第37-40页 |
| 六、本论文研究的内容和意义 | 第40-42页 |
| （一） 立题依据 | 第40-41页 |
| （二） 本论文的研究内容和意义 | 第41-42页 |
| 实验材料和方法 | 第42-58页 |
| 一、实验材料 | 第42-43页 |
| （一） 质粒 | 第42-43页 |
| （二） 蛋白质和抗体 | 第43页 |
| （三） 哺乳动物细胞系 | 第43页 |
| （四） 试剂 | 第43页 |
| 二、实验方法 | 第43-58页 |
| I. 分子生物学试验方法 | 第43-52页 |
| （一） 分子克隆 | 第43页 |
| （二） DNA 的琼脂糖电泳 | 第43页 |
| （三） 基因组DNA 提取 | 第43-45页 |
| （四） 质粒的大量制备 | 第45-46页 |
| （五） 哺乳动物细胞总RNA 的提取和反转录 | 第46-47页 |
| （六） 逆转录（Reverse Transcription, RT） | 第47-48页 |
| （七） PCR 和荧光实时定量PCR | 第48-49页 |
| （八） 染色质免疫沉淀（Chromatin Immunoprecipitation, ChIP） | 第49-52页 |
| （九） RNA 干涉（RNAi） | 第52页 |
| II. 细胞生物学实验方法 | 第52-57页 |
| （一） 哺乳动物细胞系的培养 | 第52页 |
| （二） 真核生物细胞的瞬时转染和荧光素酶报告基因检测 | 第52-54页 |
| （三） 脂质体转染 | 第54页 |
| （四） 蛋白质的Western Blotting 分析 | 第54-56页 |
| （五） 集落形成实验 | 第56-57页 |
| III 统计分析 | 第57-58页 |
| 实验结果与分析 | 第58-72页 |
| 一、c-Myc 通过上调 N651 增加了阿霉素作用后骨肉瘤细胞的集落形成存活率 | 第58-62页 |
| （一） 过表达c-Myc 和N651 都增强了骨肉瘤细胞对阿霉素的耐受力 | 第58-59页 |
| （二） RNA 干涉显示下调c-Myc 和N651 骨肉瘤细胞对阿霉素的敏感性增加 | 第59-60页 |
| （三） c-Myc 对骨肉瘤细胞的阿霉素的耐受力的影响与N651 有关，可能涉及了DNA 修复 | 第60-62页 |
| 二、c-Myc 促进了N651 的表达 | 第62-64页 |
| （一） 过表达c-Myc 促进N651 表达 | 第62-63页 |
| （二） 小RNA干涉实验显示内源的c-Myc调控N651表达 | 第63-64页 |
| 三、p300 促进了N651 表达 | 第64-66页 |
| （一） 过表达p300 促进N651 表达 | 第64-65页 |
| （二） 小RNA干涉实验显示内源的p300调控N651表达 | 第65-66页 |
| 四、N651 启动子区域c-Myc 结合位点的确定 | 第66-68页 |
| 五、c-Myc 招募了p300 | 第68-70页 |
| （一） c-Myc 和p300 对N651 的表达调控有协同作用 | 第68-69页 |
| （二c）-Myc 招募了p300 到N651 启动子区 | 第69-70页 |
| 六、c-Myc 过表达促进了组蛋白H4 乙酰化 | 第70-72页 |
| 讨论 | 第72-77页 |
| 一、c-Myc、N651 表达对阿霉素处理后骨肉瘤细胞集落形成存活率的影响的意义 | 第72-73页 |
| 二 c、-Myc 通过促进N651 表达影响DNA 损伤修复 | 第73-74页 |
| 三、p300 和组蛋白乙酰化促进了N651 表达 | 第74页 |
| 四、c-Myc 招募p300 到N651 启动子区（c-Myc 与p300 的关系探讨） | 第74-75页 |
| 五、N651启动子区c-Myc结合位点的确定及E-box的功能探讨 | 第75-77页 |
| 主要结论和创新点 | 第77-78页 |
| 一、主要结论 | 第77页 |
| 二、主要创新点 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-101页 |
| 附录 | 第101-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
| 在学期间公开发表论文及著作情况 | 第103页 |
