| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 主要符号表 | 第21-23页 |
| 1 绪论 | 第23-47页 |
| 1.1 植物组织培养玻璃化研究进展 | 第23-31页 |
| 1.1.1 玻璃化现象概述 | 第23页 |
| 1.1.2 玻璃化试管苗的解剖结构及其生理生化变化 | 第23-27页 |
| 1.1.3 影响玻璃化发生的因素 | 第27-29页 |
| 1.1.4 玻璃化发生机制 | 第29-30页 |
| 1.1.5 玻璃化的预防与恢复 | 第30-31页 |
| 1.2 植物DNA甲基化研究进展 | 第31-39页 |
| 1.2.1 DNA甲基化的作用机制与基因表达调控 | 第33-34页 |
| 1.2.2 DNA甲基化的检测方法 | 第34-36页 |
| 1.2.3 DNA甲基化在植物应对逆境胁迫中的作用 | 第36-39页 |
| 1.3 乙烯信号转导及其在植物逆境响应中的作用 | 第39-44页 |
| 1.3.1 乙烯的生理作用 | 第39-40页 |
| 1.3.2 乙烯的生物合成及其信号转导 | 第40-42页 |
| 1.3.3 乙烯在植物逆境响应中的作用 | 第42-44页 |
| 1.4 研究工作主要思路 | 第44-47页 |
| 1.4.1 立题依据 | 第44-45页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第45-47页 |
| 2 石竹玻璃化试管苗的显微结构特征及生理生化变化 | 第47-74页 |
| 2.1 引言 | 第47-48页 |
| 2.2 实验材料、试剂与仪器 | 第48页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第48页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第48页 |
| 2.2.3 实验仪器 | 第48页 |
| 2.3 实验方法 | 第48-61页 |
| 2.3.1 中国石竹的培养 | 第48-49页 |
| 2.3.2 光学显微镜及透射电镜切片样品的制作和观察 | 第49页 |
| 2.3.3 扫描电镜样品制作和观察 | 第49页 |
| 2.3.4 叶片水分代谢相关指标测定 | 第49-50页 |
| 2.3.5 叶绿素、可溶性蛋白和可溶性糖含量测定 | 第50-52页 |
| 2.3.6 抗氧化酶活性检测 | 第52-56页 |
| 2.3.7 活性氧含量测定 | 第56-57页 |
| 2.3.8 相对电导率测定 | 第57-58页 |
| 2.3.9 丙二醛含量测定 | 第58页 |
| 2.3.10 抗坏血酸和脱氢抗坏血酸含量测定 | 第58-59页 |
| 2.3.11 氧化型谷胱甘肽和还原型谷胱甘肽含量测定 | 第59-61页 |
| 2.3.12 数据分析 | 第61页 |
| 2.4 实验结果 | 第61-70页 |
| 2.4.1 玻璃化试管苗的形态特征 | 第61-62页 |
| 2.4.2 玻璃化苗茎、叶扫描结构特征 | 第62-63页 |
| 2.4.3 玻璃化试管苗细胞显微结构特征 | 第63-64页 |
| 2.4.4 玻璃化试管苗叶肉细胞亚显微结构特征 | 第64-65页 |
| 2.4.5 玻璃化试管苗气孔运动特征 | 第65-66页 |
| 2.4.6 玻璃化试管苗的水分及质外体气体含量变化 | 第66-67页 |
| 2.4.7 玻璃化试管苗可溶性糖、可溶性蛋白及叶绿素含量的变化 | 第67-68页 |
| 2.4.8 玻璃化试管苗活性氧代谢变化 | 第68-70页 |
| 2.5 讨论 | 第70-73页 |
| 2.6 本章小结 | 第73-74页 |
| 3 拟南芥玻璃化试管苗的DNA甲基化及转录组变化 | 第74-98页 |
| 3.1 引言 | 第74-75页 |
| 3.2 实验材料、试剂与仪器 | 第75页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第75页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第75页 |
| 3.2.3 实验仪器 | 第75页 |
| 3.3 实验方法 | 第75-79页 |
| 3.3.1 拟南芥玻璃化苗的诱导及培养 | 第75-76页 |
| 3.3.2 DNA样品检测与文库构建 | 第76页 |
| 3.3.3 参考序列比对分析 | 第76-78页 |
| 3.3.4 差异甲基化分析 | 第78页 |
| 3.3.5 RNA提取及转录组测序 | 第78-79页 |
| 3.3.6 甲基化测序与转录组测序关联分析 | 第79页 |
| 3.4 实验结果 | 第79-95页 |
| 3.4.1 拟南芥玻璃化苗的诱导及形态观察 | 第79-80页 |
| 3.4.2 拟南芥玻璃化苗全基因组甲基化水平及类型变化 | 第80-84页 |
| 3.4.3 拟南芥玻璃化苗与正常苗甲基化差异分析 | 第84-89页 |
| 3.4.4 拟南芥玻璃化苗转录组测序及分析 | 第89-93页 |
| 3.4.5 拟南芥玻璃化苗转录组测序与全基因组甲基化测序联合分析 | 第93-95页 |
| 3.5 讨论 | 第95-96页 |
| 3.6 本章小结 | 第96-98页 |
| 4 乙烯在拟南芥玻璃化发生中的作用机制 | 第98-117页 |
| 4.1 引言 | 第98-99页 |
| 4.2 实验材料、试剂与仪器 | 第99页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第99页 |
| 4.2.2 实验试剂 | 第99页 |
| 4.2.3 实验仪器 | 第99页 |
| 4.3 实验方法 | 第99-105页 |
| 4.3.1 拟南芥试管苗的培养 | 第99页 |
| 4.3.2 激素含量的测定 | 第99-100页 |
| 4.3.3 亚硫酸盐测序法 | 第100-102页 |
| 4.3.4 实时定量荧光PCR | 第102-103页 |
| 4.3.5 保卫细胞中活性氧含量及气孔开度测定 | 第103页 |
| 4.3.6 叶片失水速率及组织含水量测定 | 第103-104页 |
| 4.3.7 水孔蛋白磷酸化的Western blot鉴定 | 第104页 |
| 4.3.8 原生质体吸水膨胀实验 | 第104-105页 |
| 4.4 实验结果 | 第105-113页 |
| 4.4.1 结冷胶对拟南芥乙烯受体突变体的影响 | 第105-106页 |
| 4.4.2 AgNO_3对拟南芥试管苗玻璃化的影响 | 第106页 |
| 4.4.3 玻璃化苗内源激素含量的变化及AgNO_3对其影响 | 第106-107页 |
| 4.4.4 玻璃化苗ACS1和ETR1基因甲基化的变化及AgNO_3对其影响 | 第107-108页 |
| 4.4.5 玻璃化苗乙烯合成及信号转导相关基因表达的变化及AgNO_3对其影响 | 第108-110页 |
| 4.4.6 玻璃化苗气孔运动和气孔开度的变化及AgNO_3对其影响 | 第110-111页 |
| 4.4.7 玻璃化苗水孔蛋白磷酸化的变化及AgNO_3对其影响 | 第111-113页 |
| 4.5 讨论 | 第113-115页 |
| 4.6 本章小结 | 第115-117页 |
| 5 AgNO_3控制石竹玻璃化发生的作用及机制 | 第117-136页 |
| 5.1 引言 | 第117页 |
| 5.2 实验材料、试剂与仪器 | 第117-118页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第117-118页 |
| 5.2.2 实验试剂 | 第118页 |
| 5.2.3 实验仪器 | 第118页 |
| 5.3 实验方法 | 第118-119页 |
| 5.3.1 石竹玻璃化苗诱导及玻璃化恢复 | 第118页 |
| 5.3.2 乙烯含量测定 | 第118页 |
| 5.3.3 实时定量荧光PCR | 第118-119页 |
| 5.3.4 保卫细胞中活性氧含量及气孔开度测定 | 第119页 |
| 5.3.5 叶片失水速率及组织含水量测定 | 第119页 |
| 5.4 结果与分析 | 第119-134页 |
| 5.4.1 AgNO_3对中国石竹玻璃化苗的抑制及恢复作用 | 第119-121页 |
| 5.4.2 AgNO_3对中国石竹玻璃化苗乙烯积累及乙烯信号相关基因表达的影响 | 第121-123页 |
| 5.4.3 AgNO_3对中国石竹玻璃化苗抗氧化酶的影响 | 第123-126页 |
| 5.4.4 AgNO_3对中国石竹玻璃化苗活性氧积累的影响 | 第126-128页 |
| 5.4.5 AgNO_3对中国石竹玻璃化苗保卫细胞中活性氧和气孔开度的影响 | 第128-132页 |
| 5.4.6 AgNO_3对中国石竹玻璃化苗失水率和含水量的影响 | 第132-134页 |
| 5.5 讨论 | 第134-135页 |
| 5.6 本章小结 | 第135-136页 |
| 6 结论、创新点与展望 | 第136-138页 |
| 6.1 结论 | 第136-137页 |
| 6.2 创新点 | 第137页 |
| 6.3 展望 | 第137-138页 |
| 参考文献 | 第138-158页 |
| 附录A 研究工作中涉及的重要基因序列信息 | 第158-159页 |
| 作者简介 | 第159-161页 |
| 致谢 | 第161页 |
