摘要 | 第8-12页 |
ABSTRACT | 第12-17页 |
第一章 文献综述 | 第18-48页 |
1 ABC转运蛋白及多抗药性 | 第18-26页 |
1.1 ABC转运蛋白的分子结构 | 第19-20页 |
1.2 ABC转运蛋白的作用机制 | 第20-21页 |
1.3 ABC转运蛋白分类及生理功能 | 第21-26页 |
2 ABC转运蛋白与抗药性关系的研究 | 第26-36页 |
2.1 人类多抗蛋白的研究现状 | 第27-28页 |
2.2 昆虫多抗蛋白的研究现状 | 第28-34页 |
2.3 ABC转运蛋白的研究技术 | 第34-36页 |
3 灰飞虱的抗药性研究现状 | 第36-47页 |
3.1 灰飞虱的发生及危害 | 第36-37页 |
3.2 灰飞虱的防治及抗药性的发生 | 第37-40页 |
3.3 灰飞虱的交互抗性 | 第40-41页 |
3.4 灰飞虱抗性机理及分子机制研究 | 第41-47页 |
4 本研究的目的和意义 | 第47-48页 |
第二章 灰飞虱ABC转运蛋白的克隆和分析 | 第48-66页 |
1 材料和方法 | 第50-56页 |
1.1 供试昆虫 | 第50页 |
1.2 试虫饲养 | 第50页 |
1.3 主要试剂和仪器 | 第50-51页 |
1.4 ABC转运蛋白基因的克隆与鉴定 | 第51-56页 |
2 结果 | 第56-64页 |
2.1 灰飞虱ABC转运蛋白基因的克隆和命名 | 第56-59页 |
2.2 灰飞虱ABC转运蛋白基因的亚家族分类 | 第59-63页 |
2.3 灰飞虱ABC转运蛋白的结构分析 | 第63-64页 |
3 讨论 | 第64-66页 |
第三章 毒死蜱抗性相关的灰飞虱ABC转运蛋白基因分析 | 第66-82页 |
1 材料和方法 | 第68-74页 |
1.1 供试昆虫 | 第68页 |
1.2 试虫饲养 | 第68页 |
1.3 供试药剂 | 第68页 |
1.4 主要试剂和仪器 | 第68-69页 |
1.5 抗性再筛选方法 | 第69页 |
1.6 维拉帕米增效和室内毒力测定方法 | 第69-70页 |
1.7 生测统计分析方法 | 第70页 |
1.8 毒死蜱抗性品系ABC转运蛋白组成型表达分析 | 第70页 |
1.9 毒死蜱抗性品系ABC转运蛋白诱导型表达分析 | 第70-71页 |
1.10 荧光实时定量PCR | 第71-74页 |
2 结果 | 第74-80页 |
2.1 增效剂试验 | 第74-75页 |
2.2 ABC转运蛋白在JH-chl品系成虫中的组成型过表达 | 第75-77页 |
2.3 ABC转运蛋白在JH-chl品系若虫中的组成型过表达 | 第77-78页 |
2.4 ABC转运蛋白在JH-chl品系中的诱导型过表达 | 第78-79页 |
2.5 与毒死蜱抗性相关的ABC转运蛋白 | 第79-80页 |
3 讨论 | 第80-82页 |
第四章 溴氰菊酯抗性相关的灰飞虱ABC转运蛋白基因分析 | 第82-94页 |
1 材料和方法 | 第84-85页 |
1.1 供试昆虫 | 第84页 |
1.2 试虫饲养 | 第84页 |
1.3 供试药剂 | 第84页 |
1.4 主要试剂和仪器 | 第84页 |
1.5 抗性再筛选方法 | 第84页 |
1.6 维拉帕米增效和室内毒力测定方法 | 第84-85页 |
1.7 生测统计分析方法 | 第85页 |
1.8 溴氰菊酯抗性品系ABC转运蛋白组成型表达分析 | 第85页 |
1.9 溴氰菊酯抗性品系ABC转运蛋白诱导型表达分析 | 第85页 |
1.10 荧光实时定量PCR | 第85页 |
2 结果 | 第85-91页 |
2.1 增效剂试验 | 第85-87页 |
2.2 ABC转运蛋白在JH-del品系成虫中的组成型过表达 | 第87-88页 |
2.3 ABC转运蛋白在JH-del品系若虫中的组成型过表达 | 第88-89页 |
2.4 ABC转运蛋白在JH-del品系中的诱导型过表达 | 第89-90页 |
2.5 与拟除虫菊酯类(溴氰菊酯和β-氯氰菊酯)抗性相关的ABC转运蛋白 | 第90-91页 |
3 讨论 | 第91-94页 |
第五章 吡虫啉抗性相关的灰飞虱ABC转运蛋白基因分析 | 第94-104页 |
1 材料和方法 | 第96-97页 |
1.1 供试昆虫 | 第96页 |
1.2 试虫饲养 | 第96页 |
1.3 供试药剂 | 第96页 |
1.4 主要试剂和仪器 | 第96页 |
1.5 抗性再筛选方法 | 第96页 |
1.6 维拉帕米增效和室内毒力测定方法 | 第96-97页 |
1.7 生测统计分析方法 | 第97页 |
1.8 吡虫啉抗性品系ABC转运蛋白组成型表达分析 | 第97页 |
1.9 吡虫啉抗性品系ABC转运蛋白诱导型表达分析 | 第97页 |
1.10 荧光实时定量PCR | 第97页 |
2 结果 | 第97-103页 |
2.1 增效剂试验 | 第97-98页 |
2.2 ABC转运蛋白在JH-imi品系成虫中的组成型过表达 | 第98-100页 |
2.3 ABC转运蛋白在JH-imi品系若虫中的组成型过表达 | 第100-101页 |
2.4 ABC转运蛋白在JH-imi品系中的诱导型过表达 | 第101-102页 |
2.5 与吡虫啉抗性相关的ABC转运蛋白 | 第102-103页 |
3 讨论 | 第103-104页 |
第六章 灰飞虱ABC候选多抗蛋白基因的分析 | 第104-114页 |
1 材料和方法 | 第105-107页 |
1.1 供试昆虫 | 第105页 |
1.2 试虫饲养 | 第105页 |
1.3 主要试剂和仪器 | 第105页 |
1.4 灰飞虱DNA的提取、纯化及鉴定 | 第105-106页 |
1.5 总RNA提取和cDNA第一链的合成 | 第106-107页 |
1.6 荧光实时定量PCR | 第107页 |
2 结果 | 第107-112页 |
2.1 灰飞虱候选多抗蛋白基因的鉴定 | 第107-108页 |
2.2 候选多抗蛋白基因的基因组拷贝数分析 | 第108-109页 |
2.3 候选多抗蛋白基因在成虫期不同部位的表达分析 | 第109-110页 |
2.4 候选多抗蛋白基因在不同发育阶段的表达分析 | 第110-112页 |
3 讨论 | 第112-114页 |
第七章 全转运子LsABCC4的分析及外源表达初探 | 第114-136页 |
1 材料和方法 | 第115-125页 |
1.1 供试昆虫 | 第115页 |
1.2 试虫饲养 | 第115页 |
1.3 主要试剂和仪器 | 第115-116页 |
1.4 全转运子LsABCC4开放阅读框的克隆验证与分析 | 第116页 |
1.5 LsABCC4真核表达载体的构建 | 第116-119页 |
1.6 重组杆状病毒质粒的构建 | 第119-121页 |
1.7 重组杆状病毒在Sf9细胞中的表达与检测 | 第121-125页 |
2 结果 | 第125-135页 |
2.1 全转运子LsABCC4开放阅读框的克隆验证与分析 | 第125-131页 |
2.2 全转运子LsABCC4的真核表达初探 | 第131-135页 |
3 讨论 | 第135-136页 |
全文总结 | 第136-138页 |
参考文献 | 第138-154页 |
附录 | 第154-166页 |
攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第166-168页 |
致谢 | 第168-169页 |