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灰飞虱ABC转运蛋白基因的鉴定及其抗药性功能研究

摘要第8-12页
ABSTRACT第12-17页
第一章 文献综述第18-48页
    1 ABC转运蛋白及多抗药性第18-26页
        1.1 ABC转运蛋白的分子结构第19-20页
        1.2 ABC转运蛋白的作用机制第20-21页
        1.3 ABC转运蛋白分类及生理功能第21-26页
    2 ABC转运蛋白与抗药性关系的研究第26-36页
        2.1 人类多抗蛋白的研究现状第27-28页
        2.2 昆虫多抗蛋白的研究现状第28-34页
        2.3 ABC转运蛋白的研究技术第34-36页
    3 灰飞虱的抗药性研究现状第36-47页
        3.1 灰飞虱的发生及危害第36-37页
        3.2 灰飞虱的防治及抗药性的发生第37-40页
        3.3 灰飞虱的交互抗性第40-41页
        3.4 灰飞虱抗性机理及分子机制研究第41-47页
    4 本研究的目的和意义第47-48页
第二章 灰飞虱ABC转运蛋白的克隆和分析第48-66页
    1 材料和方法第50-56页
        1.1 供试昆虫第50页
        1.2 试虫饲养第50页
        1.3 主要试剂和仪器第50-51页
        1.4 ABC转运蛋白基因的克隆与鉴定第51-56页
    2 结果第56-64页
        2.1 灰飞虱ABC转运蛋白基因的克隆和命名第56-59页
        2.2 灰飞虱ABC转运蛋白基因的亚家族分类第59-63页
        2.3 灰飞虱ABC转运蛋白的结构分析第63-64页
    3 讨论第64-66页
第三章 毒死蜱抗性相关的灰飞虱ABC转运蛋白基因分析第66-82页
    1 材料和方法第68-74页
        1.1 供试昆虫第68页
        1.2 试虫饲养第68页
        1.3 供试药剂第68页
        1.4 主要试剂和仪器第68-69页
        1.5 抗性再筛选方法第69页
        1.6 维拉帕米增效和室内毒力测定方法第69-70页
        1.7 生测统计分析方法第70页
        1.8 毒死蜱抗性品系ABC转运蛋白组成型表达分析第70页
        1.9 毒死蜱抗性品系ABC转运蛋白诱导型表达分析第70-71页
        1.10 荧光实时定量PCR第71-74页
    2 结果第74-80页
        2.1 增效剂试验第74-75页
        2.2 ABC转运蛋白在JH-chl品系成虫中的组成型过表达第75-77页
        2.3 ABC转运蛋白在JH-chl品系若虫中的组成型过表达第77-78页
        2.4 ABC转运蛋白在JH-chl品系中的诱导型过表达第78-79页
        2.5 与毒死蜱抗性相关的ABC转运蛋白第79-80页
    3 讨论第80-82页
第四章 溴氰菊酯抗性相关的灰飞虱ABC转运蛋白基因分析第82-94页
    1 材料和方法第84-85页
        1.1 供试昆虫第84页
        1.2 试虫饲养第84页
        1.3 供试药剂第84页
        1.4 主要试剂和仪器第84页
        1.5 抗性再筛选方法第84页
        1.6 维拉帕米增效和室内毒力测定方法第84-85页
        1.7 生测统计分析方法第85页
        1.8 溴氰菊酯抗性品系ABC转运蛋白组成型表达分析第85页
        1.9 溴氰菊酯抗性品系ABC转运蛋白诱导型表达分析第85页
        1.10 荧光实时定量PCR第85页
    2 结果第85-91页
        2.1 增效剂试验第85-87页
        2.2 ABC转运蛋白在JH-del品系成虫中的组成型过表达第87-88页
        2.3 ABC转运蛋白在JH-del品系若虫中的组成型过表达第88-89页
        2.4 ABC转运蛋白在JH-del品系中的诱导型过表达第89-90页
        2.5 与拟除虫菊酯类(溴氰菊酯和β-氯氰菊酯)抗性相关的ABC转运蛋白第90-91页
    3 讨论第91-94页
第五章 吡虫啉抗性相关的灰飞虱ABC转运蛋白基因分析第94-104页
    1 材料和方法第96-97页
        1.1 供试昆虫第96页
        1.2 试虫饲养第96页
        1.3 供试药剂第96页
        1.4 主要试剂和仪器第96页
        1.5 抗性再筛选方法第96页
        1.6 维拉帕米增效和室内毒力测定方法第96-97页
        1.7 生测统计分析方法第97页
        1.8 吡虫啉抗性品系ABC转运蛋白组成型表达分析第97页
        1.9 吡虫啉抗性品系ABC转运蛋白诱导型表达分析第97页
        1.10 荧光实时定量PCR第97页
    2 结果第97-103页
        2.1 增效剂试验第97-98页
        2.2 ABC转运蛋白在JH-imi品系成虫中的组成型过表达第98-100页
        2.3 ABC转运蛋白在JH-imi品系若虫中的组成型过表达第100-101页
        2.4 ABC转运蛋白在JH-imi品系中的诱导型过表达第101-102页
        2.5 与吡虫啉抗性相关的ABC转运蛋白第102-103页
    3 讨论第103-104页
第六章 灰飞虱ABC候选多抗蛋白基因的分析第104-114页
    1 材料和方法第105-107页
        1.1 供试昆虫第105页
        1.2 试虫饲养第105页
        1.3 主要试剂和仪器第105页
        1.4 灰飞虱DNA的提取、纯化及鉴定第105-106页
        1.5 总RNA提取和cDNA第一链的合成第106-107页
        1.6 荧光实时定量PCR第107页
    2 结果第107-112页
        2.1 灰飞虱候选多抗蛋白基因的鉴定第107-108页
        2.2 候选多抗蛋白基因的基因组拷贝数分析第108-109页
        2.3 候选多抗蛋白基因在成虫期不同部位的表达分析第109-110页
        2.4 候选多抗蛋白基因在不同发育阶段的表达分析第110-112页
    3 讨论第112-114页
第七章 全转运子LsABCC4的分析及外源表达初探第114-136页
    1 材料和方法第115-125页
        1.1 供试昆虫第115页
        1.2 试虫饲养第115页
        1.3 主要试剂和仪器第115-116页
        1.4 全转运子LsABCC4开放阅读框的克隆验证与分析第116页
        1.5 LsABCC4真核表达载体的构建第116-119页
        1.6 重组杆状病毒质粒的构建第119-121页
        1.7 重组杆状病毒在Sf9细胞中的表达与检测第121-125页
    2 结果第125-135页
        2.1 全转运子LsABCC4开放阅读框的克隆验证与分析第125-131页
        2.2 全转运子LsABCC4的真核表达初探第131-135页
    3 讨论第135-136页
全文总结第136-138页
参考文献第138-154页
附录第154-166页
攻读博士学位期间发表的学术论文第166-168页
致谢第168-169页

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