| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-7页 |
| 1 前言 | 第10-20页 |
| 1.1 植物葡萄糖-6-核酸脱氢酶(G6PDH)的研究概况 | 第10-13页 |
| 1.1.1 G6PDH的生物学特性研究 | 第10-11页 |
| 1.1.2 G6PDH与植物生长发育和胁迫应答 | 第11-12页 |
| 1.1.3 植物G6PDH基因的克隆及表达 | 第12-13页 |
| 1.2 植物抗寒的研究概况 | 第13-19页 |
| 1.2.1 植物抗寒生理生化研究 | 第13-17页 |
| 1.2.2 植物抗寒的分子机制 | 第17-19页 |
| 1.3 本研究的内容和意义 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-22页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第20页 |
| 2.1.2 菌株和质粒 | 第20-22页 |
| 2.1.3 试剂和仪器 | 第22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-34页 |
| 2.2.1 基因的克隆与亚细胞定位分析 | 第22-28页 |
| 2.2.1.1 EcG6PDHs基因的克隆 | 第22-24页 |
| 2.2.1.2 EcG6PDHs基因的生物信息学分析 | 第24-25页 |
| 2.2.1.3 植物表达载体的构建 | 第25-26页 |
| 2.2.1.4 烟草亚细胞荧光定位 | 第26-28页 |
| 2.2.2 表达特性分析 | 第28-29页 |
| 2.2.2.1 实时荧光定量PCR | 第28页 |
| 2.2.2.2 组织特异性表达分析 | 第28-29页 |
| 2.2.2.3 低温处理 | 第29页 |
| 2.2.2.4 盐胁迫、ABA和干旱处理 | 第29页 |
| 2.2.3 赤桉G6PDH基因家族在拟南芥中的异源转化 | 第29-33页 |
| 2.2.3.1 农杆菌介导的拟南芥的遗传转化 | 第29-30页 |
| 2.2.3.2 阳性植株的筛选与鉴定 | 第30页 |
| 2.2.3.3 转基因拟南芥植株的表型观察 | 第30-31页 |
| 2.2.3.4 G6PDH活性的测定 | 第31页 |
| 2.2.3.5 POD、SOD酶活性的测定 | 第31-32页 |
| 2.2.3.6 叶绿素相对含量和叶绿素荧光参数的测定 | 第32页 |
| 2.2.3.7 细胞质膜透性及低温半致死温度的测定 | 第32-33页 |
| 2.2.4 统计分析 | 第33-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-51页 |
| 3.0 目的基因的克隆 | 第34页 |
| 3.1 ECG6PDHS基因的生物信息学分析 | 第34-36页 |
| 3.2 亚细胞定位分析 | 第36-38页 |
| 3.2.2 植物表达载体的构建 | 第36-37页 |
| 3.2.3 EcG6PDs蛋白的亚细胞定位结果 | 第37-38页 |
| 3.3 表达特性分析 | 第38-42页 |
| 3.3.1 组织特异性表达分析 | 第38页 |
| 3.3.2 4℃低温及不同温度对EcG6PDHs表达的影响 | 第38-40页 |
| 3.3.3 干旱、NaCl及ABA处理对EcG6PDHs表达的影响 | 第40-42页 |
| 3.4 赤桉G6PDH基因家族转化拟南芥及功能研究 | 第42-51页 |
| 3.4.1 转基因植株的筛选与鉴定 | 第42-43页 |
| 3.4.2 转基因拟南芥植株的表型变化 | 第43-45页 |
| 3.4.3 过量表达赤桉G6PDH基因对拟南芥抗寒性的影响 | 第45-51页 |
| 3.4.3.1 G6PDH活性变化 | 第45页 |
| 3.4.3.2 抗氧化酶的酶活性变化 | 第45-47页 |
| 3.4.3.3 叶绿素含量和叶绿素荧光参数变化 | 第47-49页 |
| 3.4.3.4 相对电导率、低温半致死温度变化 | 第49-50页 |
| 3.4.3.5 各生理生化指标间的相关性分析 | 第50-51页 |
| 4 结论与讨论 | 第51-56页 |
| 4.1 结论 | 第51-52页 |
| 4.2 讨论 | 第52-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-65页 |
| 附录 | 第65-68页 |
