| 摘要 | 第3-7页 |
| ABSTRACT | 第7-11页 |
| 第一章 电压门控钠离子通道及其毒素研究进展 | 第16-44页 |
| 1.1 前言 | 第16-17页 |
| 1.2 钠离子通道 | 第17-30页 |
| 1.2.1 电压门控钠通道 | 第17-24页 |
| 1.2.2 电压门控钠通道的研究进展 | 第24-26页 |
| 1.2.3 钠通道相关疾病 | 第26-30页 |
| 1.3 电压门控钠通道毒素 | 第30-42页 |
| 1.3.1 毒素位点分析 | 第31-33页 |
| 1.3.2 神经毒素结合位点1 | 第33-34页 |
| 1.3.3 神经毒素结合位点2 | 第34-35页 |
| 1.3.4 神经毒素结合位点3 | 第35-37页 |
| 1.3.5 神经毒素结合位点4 | 第37-40页 |
| 1.3.6 神经毒素结合位点5 | 第40-41页 |
| 1.3.7 神经毒素结合位点6 | 第41-42页 |
| 1.4 本课题的研究背景和意义 | 第42-44页 |
| 第二章 海南捕鸟蛛毒素-Ⅲ(HNTX-Ⅲ)与钠通道相互作用的分子机制研究 | 第44-82页 |
| 2.1 前言 | 第44-46页 |
| 2.2 材料与方法 | 第46-62页 |
| 2.2.1 粗毒和动物 | 第46页 |
| 2.2.2 试剂和仪器 | 第46-47页 |
| 2.2.3 HNTX-Ⅲ的分离纯化 | 第47-49页 |
| 2.2.4 钠通道Nav1.7突变体和嵌合体的构建 | 第49-57页 |
| 2.2.5 HEK293细胞异源表达电压门控钠通道 | 第57-61页 |
| 2.2.6 膜片钳活性分析 | 第61-62页 |
| 2.3 结果 | 第62-77页 |
| 2.3.1 HNTX-Ⅱ的分离和纯化 | 第62-63页 |
| 2.3.2 HNTX-Ⅲ对大鼠DRG细胞上电压门控钠通道的影响 | 第63-64页 |
| 2.3.3 HNTX-Ⅲ对表达在HEK293细胞VGSC亚型的抑制效应 | 第64-66页 |
| 2.3.4 HNTX-Ⅲ电压依赖性的抑制在HEK293细胞中表达的Nav1.7 | 第66-70页 |
| 2.3.5 HNTX-Ⅲ结合在Nav1.7 DII的S3-S4胞外连接环 | 第70-72页 |
| 2.3.6 HNTX-Ⅲ对Nav1.7去激活动力学的影响 | 第72-74页 |
| 2.3.7 HNTX-Ⅲ与Nav1.7突变体的相互作用 | 第74-77页 |
| 2.4 讨论 | 第77-82页 |
| 2.4.1 HNTX-Ⅲ是一种神经元TTX-S VGSCs的选择性的拮抗剂 | 第77页 |
| 2.4.2 HNTX-Ⅲ通过在关闭状态下结合位点4捕获电压敏感元件来抑制Nav1.7的开放 | 第77-78页 |
| 2.4.3 HNTX-Ⅲ有别于作用于VGSCs的其他β-毒素 | 第78-79页 |
| 2.4.4 HNTX-Ⅲ的结构与功能关系 | 第79-82页 |
| 第三章 海南捕鸟蛛毒素HNTX-Ⅳ与电压门控钠通道相互作用的分子机制研究 | 第82-106页 |
| 3.1 前言 | 第82-83页 |
| 3.2 材料与方法 | 第83-88页 |
| 3.2.1 粗毒和动物 | 第83-84页 |
| 3.2.2 试剂和仪器 | 第84页 |
| 3.2.3 HNTX-Ⅳ的分离纯化 | 第84-86页 |
| 3.2.4 钠通道质粒和构建Nav1.4,Nav1.5和Nav1.7的突变体 | 第86页 |
| 3.2.5 HEK293细胞异源表达VGSCs | 第86-87页 |
| 3.2.6 膜片钳活性检测 | 第87-88页 |
| 3.3 结果 | 第88-102页 |
| 3.3.1 HNTX-Ⅳ毒素的分离纯化 | 第88-89页 |
| 3.3.2 HNTX-Ⅳ对VGSC亚型的选择性 | 第89-92页 |
| 3.3.3 亚饱和浓度下HNTX-Ⅳ对Nav1.2,1.3,1.7激活和失活的影响 | 第92-95页 |
| 3.3.4 电压门控钠通道DIIS3-S4的氨基酸残基决定着通道对HNTX-Ⅳ的敏感性 | 第95-101页 |
| 3.3.5 Three-toed claw模型用于稳定HNTX-Ⅳ-Nav1.7复合物 | 第101-102页 |
| 3.4 讨论 | 第102-106页 |
| 第四章 海南捕鸟蛛粗毒中筛选Nav1.8抑制剂 | 第106-125页 |
| 4.1 背景 | 第106-107页 |
| 4.2 材料与方法 | 第107-119页 |
| 4.2.1 粗毒和动物 | 第107页 |
| 4.2.2 试剂和仪器 | 第107-108页 |
| 4.2.3 大鼠DRG细胞 | 第108页 |
| 4.2.4 海南捕鸟蛛粗毒的分离纯化 | 第108-109页 |
| 4.2.5 MALDI-TOF质谱分子量鉴定 | 第109页 |
| 4.2.6 嵌合体的构建 | 第109-115页 |
| 4.2.7 ND7-23细胞异源表达Nav1.8通道 | 第115-119页 |
| 4.2.8 电生理活性分析 | 第119页 |
| 4.3 结果 | 第119-123页 |
| 4.3.1 海南捕鸟蛛粗毒对大鼠DRG细胞上TTX-R钠通道的影响 | 第119-120页 |
| 4.3.2 海南粗毒中筛选表达于ND7-23细胞Nav1.8通道的抑制剂 | 第120-123页 |
| 4.3.3 HN3977的VGSC亚型筛选 | 第123页 |
| 4.4 讨论 | 第123-125页 |
| 第五章 主要研究结论与进一步研究设想 | 第125-128页 |
| 参考文献 | 第128-140页 |
| 附录 缩写表（中英文对照） | 第140-142页 |
| 论文发表情况 | 第142-143页 |
| 致谢 | 第143-145页 |
