| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略词 | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| 1 稻纵卷叶螟 | 第12-13页 |
| 2 昆虫几丁质合成酶和几丁质合成酶基因 | 第13-15页 |
| 3 RNAi的研究进展及应用 | 第15-17页 |
| 3.1 RNAi的研究进展 | 第15-16页 |
| 3.2 RNAi在害虫生物防治中的应用 | 第16-17页 |
| 4 植物转基因技术及应用 | 第17-19页 |
| 4.1 植物转基因技术 | 第17-18页 |
| 4.2 植物转基因技术的应用 | 第18-19页 |
| 5 研究目的及意义 | 第19-21页 |
| 5.1 研究目的 | 第19-20页 |
| 5.2 研究意义 | 第20-21页 |
| 6 本研究采取的技术路线 | 第21-22页 |
| 第二章 稻纵卷叶螟几丁质合成酶B基因的克隆、序列分析及mRNA表达分析 | 第22-58页 |
| 1 实验材料 | 第23-26页 |
| 1.1 供试昆虫及取样 | 第23页 |
| 1.2 主要试剂与材料 | 第23-25页 |
| 1.3 主要仪器 | 第25页 |
| 1.4 大肠杆菌培养基(LB) | 第25-26页 |
| 2 实验方法 | 第26-43页 |
| 2.1 稻纵卷叶螟总RNA的提取 | 第26-28页 |
| 2.2 第一链cDNA合成 | 第28-30页 |
| 2.3 CmCHSB基因片段的克隆 | 第30-36页 |
| 2.4 CmCHSB全长基因的克隆 | 第36-40页 |
| 2.5 CmCHSB基因的生物信息学分析 | 第40-41页 |
| 2.6 CmCHSB基因时空表达的相对RT-qPCR分析 | 第41-43页 |
| 2.7 数据统计与分析 | 第43页 |
| 3 结果与分析 | 第43-55页 |
| 3.1 稻纵卷叶螟总RNA的提取 | 第43页 |
| 3.2 CmCHSB基因的克隆和序列分析 | 第43-48页 |
| 3.3 CmCHSB蛋白序列比对和系统进化树构建 | 第48-52页 |
| 3.4 CmCHSB蛋白结构分析 | 第52-53页 |
| 3.5 CmCHSB基因的时空表达分析 | 第53-55页 |
| 4 讨论 | 第55-58页 |
| 第三章 注射双链RNA干扰稻纵卷叶螟几丁质合成酶B基因的表达 | 第58-77页 |
| 1 实验材料 | 第59-60页 |
| 1.1 供试昆虫 | 第59页 |
| 1.2 主要试剂与耗材 | 第59-60页 |
| 1.3 主要仪器 | 第60页 |
| 2 方法 | 第60-69页 |
| 2.1 靶位点设计与合成 | 第60-61页 |
| 2.2 合成dsRNA的引物设计 | 第61页 |
| 2.3 dsRNA的合成 | 第61-67页 |
| 2.4 显微注射 | 第67页 |
| 2.5 RNAi沉默效应检测 | 第67-69页 |
| 3 结果与分析 | 第69-75页 |
| 3.1 dsRNA的合成 | 第69-71页 |
| 3.2 RNAi效应检测 | 第71-75页 |
| 4 讨论 | 第75-77页 |
| 第四章 重组RNA干扰表达载体的构建与转基因植株的室内鉴定 | 第77-95页 |
| 1 实验材料 | 第78-79页 |
| 1.1 质粒、菌株及实验耗材 | 第78页 |
| 1.2 主要仪器 | 第78页 |
| 1.3 培养基 | 第78-79页 |
| 2 方法 | 第79-88页 |
| 2.1 靶位点合成 | 第79-80页 |
| 2.2 质粒的提取 | 第80页 |
| 2.3 质粒的酶切回收 | 第80-81页 |
| 2.4 重组表达载体的构建 | 第81页 |
| 2.5 重组表达载体的筛选 | 第81-82页 |
| 2.6 重组表达载体的鉴定 | 第82-84页 |
| 2.7 农杆菌转化及鉴定 | 第84-86页 |
| 2.8 水稻的遗传转化及室内鉴定 | 第86-88页 |
| 3 结果与分析 | 第88-93页 |
| 3.1 重组表达载体的构建 | 第88-89页 |
| 3.2 重组表达载体的鉴定 | 第89-91页 |
| 3.3 重组表达载体转化农杆菌及鉴定 | 第91-92页 |
| 3.4 转基因植株的获得 | 第92页 |
| 3.5 转基因植株的室内RT-PCR检测 | 第92-93页 |
| 4 讨论 | 第93-95页 |
| 第五章 结论与展望 | 第95-97页 |
| 1 结论 | 第95-96页 |
| 2 创新点 | 第96页 |
| 3 不足之处 | 第96页 |
| 4 展望 | 第96-97页 |
| 致谢 | 第97-99页 |
| 参考文献 | 第99-108页 |
| 附录一 | 第108-110页 |
| 附录二 | 第110-111页 |
| 附图 | 第111-112页 |
