| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略语(Abbreviations) | 第10-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-21页 |
| 1 红霉素的现状和市场前景 | 第12-14页 |
| 1.1 红霉素的发展现状 | 第12-13页 |
| 1.2 我国红霉素产业的发展现状 | 第13-14页 |
| 2 提高红霉素产量的研究进展 | 第14-18页 |
| 2.1 发酵培养基的优化 | 第14-15页 |
| 2.2 传统育种 | 第15页 |
| 2.3 基因工程育种 | 第15-18页 |
| 2.3.1 异源表达 | 第16页 |
| 2.3.2 改造生物合成基因簇中的关键基因 | 第16-17页 |
| 2.3.3 增加整个生物合成基因簇的拷贝数 | 第17-18页 |
| 3 天然产物筛选方法研究进展 | 第18-19页 |
| 3.1 随机筛选 | 第18页 |
| 3.2 模型筛选 | 第18-19页 |
| 3.3 基因筛选 | 第19页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第19-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-33页 |
| 1 实验材料 | 第21-27页 |
| 1.1 实验所用的菌株和质粒 | 第21-22页 |
| 1.2 引物 | 第22页 |
| 1.3 主要试剂及用途 | 第22-25页 |
| 1.4 培养基及培养用途 | 第25-27页 |
| 2 实验方法 | 第27-33页 |
| 2.1 分子生物学基本操作 | 第27-28页 |
| 2.2 链霉菌培养及菌种保藏 | 第28页 |
| 2.3 红霉素高产菌株的构建 | 第28-29页 |
| 2.4 醋酸钠纯化DNA | 第29页 |
| 2.5 PCR反应递缩文库 | 第29-30页 |
| 2.6 大肠杆菌-链霉菌属间接合转移 | 第30页 |
| 2.7 链霉菌基因组总DNA的提取 | 第30页 |
| 2.8 链霉菌质粒DNA的小量提取 | 第30-31页 |
| 2.9 链霉菌生物活性测定 | 第31页 |
| 2.10 链霉菌发酵萃取 | 第31页 |
| 2.11 红霉素A的HPLC检测 | 第31-32页 |
| 2.12 有效霉素类似物的HPLC检测 | 第32页 |
| 2.13 LC-MS分析 | 第32-33页 |
| 第三章 红霉素高产菌株的构建 | 第33-46页 |
| 1 前言 | 第33-34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-43页 |
| 2.1 重组质粒pYPQ01的构建 | 第34-36页 |
| 2.2 增加一个红霉素生物合成基因簇的重组菌株的获得 | 第36-37页 |
| 2.3 重组菌株S.ery::pYPQ01的发酵检测 | 第37-38页 |
| 2.4 增加两个红霉素生物合成基因簇的重组菌株的获得 | 第38-40页 |
| 2.5 红霉素A产量分析 | 第40-41页 |
| 2.6 红霉素各组分浓度分析 | 第41-43页 |
| 3 讨论 | 第43-46页 |
| 第四章 链霉菌SH-62中三个可能的次级代谢产物生物合成基因簇的异源表达 | 第46-58页 |
| 1 前言 | 第46页 |
| 2 潮霉素A生物合成基因簇(hgm)的研究 | 第46-50页 |
| 2.1 生物信息学分析 | 第46-47页 |
| 2.2 异源表达 | 第47-49页 |
| 2.3 发酵培养基的选择 | 第49-50页 |
| 3 有效霉素A类似物生物合成基因簇(vlm)的研究 | 第50-53页 |
| 3.1 生物信息学分析 | 第50-51页 |
| 3.2 异源表达 | 第51-53页 |
| 4 羊毛硫抗生素生物合成基因簇的研究 | 第53-56页 |
| 4.1 生物信息学分析 | 第53-54页 |
| 4.2 异源表达 | 第54-56页 |
| 5 讨论 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
