| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-43页 |
| 1.1 黄瓜遗传转化研究进展 | 第14-23页 |
| 1.1.1 遗传转化的方法 | 第15页 |
| 1.1.2 农杆菌介导的黄瓜遗传转化模式与影响因素 | 第15-18页 |
| 1.1.3 黄瓜遗传转化的形式 | 第18-20页 |
| 1.1.4 黄瓜转基因植株的鉴定 | 第20-23页 |
| 1.2 黄瓜基因定位研究进展 | 第23-35页 |
| 1.2.1 GY14和9930在基因定位中的应用 | 第23-24页 |
| 1.2.2 分子标记SSR、InDel及SNP在基因定位中的应用 | 第24-26页 |
| 1.2.3 质量性状基因定位策略 | 第26-31页 |
| 1.2.4 高通量测序技术在黄瓜质量性状基因定位中的应用 | 第31-34页 |
| 1.2.5 黄瓜重要园艺性状的定位 | 第34-35页 |
| 1.3 黄瓜果实皮色研究进展 | 第35-41页 |
| 1.3.1 黄瓜果实皮色的种类及研究价值 | 第35-37页 |
| 1.3.2 其他黄瓜果实性状对果皮颜色的影响 | 第37-40页 |
| 1.3.3 黄瓜果实皮色的基因定位 | 第40-41页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第41-43页 |
| 第二章 黄瓜高效遗传转化体系的建立 | 第43-71页 |
| 2.1 材料与方法 | 第43-51页 |
| 2.1.1 材料 | 第43-44页 |
| 2.1.2 超表达载体的构建与农杆菌的电击转化 | 第44-45页 |
| 2.1.3 分化培养基中激素浓度的筛选 | 第45页 |
| 2.1.4 种子的消毒处理与外植体的获取 | 第45-46页 |
| 2.1.5 农杆菌的培养与浸染液制备 | 第46-47页 |
| 2.1.6 外植体的侵染与共培养 | 第47-48页 |
| 2.1.7 分化培养 | 第48页 |
| 2.1.8 生根与驯化移栽 | 第48-49页 |
| 2.1.9 PCR筛选与qPCR验证 | 第49页 |
| 2.1.10 转基因植株的GUS染色 | 第49-51页 |
| 2.1.11 叶片表面积及叶片细胞面积的测量 | 第51页 |
| 2.2 结果与分析 | 第51-64页 |
| 2.2.1 不同基因型黄瓜材料的不定芽诱导率 | 第51-52页 |
| 2.2.2 不同外植体类型对不定芽诱导率的影响 | 第52-53页 |
| 2.2.3 农杆菌侵染液浓度对侵染效果的影响 | 第53-54页 |
| 2.2.4 共培养条件对外植体生长的影响 | 第54页 |
| 2.2.5 分化培养基中不同浓度卡那霉素的筛选效果 | 第54-57页 |
| 2.2.6 生根培养基中卡那霉素对转基因植株的筛选作用 | 第57页 |
| 2.2.7 转基因植株的鉴定 | 第57-59页 |
| 2.2.8 转基因种子在含卡那霉素培养基上的萌发再生能力 | 第59-61页 |
| 2.2.9 GUS染色鉴定转基因植株 | 第61页 |
| 2.2.10 转基因植株中外源基因的遗传稳定性 | 第61-62页 |
| 2.2.11 基于Poinsett76及卡那霉素筛选的转基因体系 | 第62-64页 |
| 2.2.12 H19中超表达LL基因 | 第64页 |
| 2.3 讨论 | 第64-70页 |
| 2.3.1 黄瓜转基因体系大同小异,关键参数略有不同 | 第64-66页 |
| 2.3.2 黄瓜子叶外植体上不能混有顶端分生组织 | 第66页 |
| 2.3.3 AS,Silweet-77和真空泵对转化效率的影响 | 第66-67页 |
| 2.3.4 共培养后,不同颜色外植体对转化效率的影响 | 第67页 |
| 2.3.5 ABA在不定芽诱导中的作用 | 第67-68页 |
| 2.3.6 初始分化培养基上诱导出的不定芽需要继代培养一次 | 第68-69页 |
| 2.3.7 一些抗性幼苗有PCR结果,但是没有相应表型 | 第69-70页 |
| 2.3.8 瓜很多器官的 GUS 染色较为困难 | 第70页 |
| 2.4 小结 | 第70-71页 |
| 第三章 黄瓜嫩果白色果皮基因W的定位 | 第71-91页 |
| 3.1 材料与方法 | 第71-75页 |
| 3.1.1 材料 | 第71-72页 |
| 3.1.2 定位群体的构建 | 第72页 |
| 3.1.3 表型数据的收集 | 第72-73页 |
| 3.1.4 遗传标记的开发 | 第73-74页 |
| 3.1.5 DNA提取、PCR及凝胶电泳 | 第74页 |
| 3.1.6 遗传图谱的构建 | 第74-75页 |
| 3.2 结果与分析 | 第75-87页 |
| 3.2.1 绿色与白色嫩果黄瓜果实营养品质的差异分析 | 第75页 |
| 3.2.2 黄瓜嫩果白色果皮性状的遗传分析 | 第75-76页 |
| 3.2.3 w基因的初步定位 | 第76-79页 |
| 3.2.4 Q30与Q24的全基因组测序 | 第79-82页 |
| 3.2.5 w基因的精细定位 | 第82-86页 |
| 3.2.6 w基因的精准定位 | 第86-87页 |
| 3.3 讨论 | 第87-90页 |
| 3.3.1 亲本选择是基因定位的关键 | 第87-88页 |
| 3.3.2 BSA池可以快速锁定染色体位置 | 第88页 |
| 3.3.3 GY14与9930在基因定位中的应用 | 第88-90页 |
| 3.4 小结 | 第90-91页 |
| 第四章 黄瓜嫩果白色果皮基因W的克隆与功能分析 | 第91-102页 |
| 4.1 材料与方法 | 第91-93页 |
| 4.1.1 材料 | 第91页 |
| 4.1.2 APRR2/aprr2基因的克隆 | 第91-92页 |
| 4.1.3 实时定量PCR分析 | 第92页 |
| 4.1.4 果皮细胞中叶绿素含量测定及叶绿体的显微结构观察 | 第92-93页 |
| 4.1.5 系统发育树分析 | 第93页 |
| 4.2 结果与分析 | 第93-100页 |
| 4.2.1 APRR2/aprr2基因的分子克隆 | 第93-95页 |
| 4.2.2 APRR2的系统进化树分析 | 第95-97页 |
| 4.2.3 APRR2的时空差异表达分析 | 第97-98页 |
| 4.2.4 绿色果皮细胞中的叶绿素含量与叶绿体数目均高于白色果皮 | 第98-100页 |
| 4.3 讨论 | 第100-101页 |
| 4.4 小结 | 第101-102页 |
| 第五章 黄瓜APRR2的转基因验证 | 第102-110页 |
| 5.1 材料与方法 | 第102-105页 |
| 5.1.1 材料 | 第102页 |
| 5.1.2 RNAi载体的构建 | 第102-104页 |
| 5.1.3 RNAi载体转入农杆菌 | 第104页 |
| 5.1.4 黄瓜遗传转化操作 | 第104-105页 |
| 5.2 结果与分析 | 第105-106页 |
| 5.2.1 RNAi载体的构建 | 第105-106页 |
| 5.2.2 使用RNAi技术干扰9930中APRR2基因的表达 | 第106页 |
| 5.2.3 使用RNAi技术干扰Poinsett76中APRR2基因的表达 | 第106页 |
| 5.3 讨论 | 第106-109页 |
| 5.3.1 APRR2的RNAi试验进一步验证了本研究的黄瓜转基因体系高效且稳定 | 第106-108页 |
| 5.3.2 转基因植株的育性一般不高 | 第108页 |
| 5.3.3 RNAi也可以产生明显的表型变化 | 第108-109页 |
| 5.4 小结 | 第109-110页 |
| 第六章 结论、创新点与展望 | 第110-112页 |
| 6.1 结论 | 第110页 |
| 6.2 创新点 | 第110-111页 |
| 6.3 展望 | 第111-112页 |
| 参考文献 | 第112-128页 |
| 附录 | 第128-156页 |
| 缩略词 | 第156-157页 |
| 致谢 | 第157-158页 |
| 作者简介 | 第158页 |
