| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 缩略词表(ABBREVIATION) | 第12-13页 |
| 1 前言 | 第13-23页 |
| 1.1 电针镇痛研究现状 | 第13-18页 |
| 1.1.1 电针镇痛的特点 | 第13-14页 |
| 1.1.2 电针镇痛机制 | 第14-16页 |
| 1.1.3 电针耐受研究现状 | 第16-18页 |
| 1.2 miRNA与疼痛 | 第18-20页 |
| 1.2.1 miRNA在神经疾病中的研究 | 第19页 |
| 1.2.2 Let-7b | 第19-20页 |
| 1.2.3 miRNA与电针耐受 | 第20页 |
| 1.3 Penk1基因与电针的相关研究 | 第20-21页 |
| 1.4 研究内容 | 第21-22页 |
| 1.5 研究目的及意义 | 第22页 |
| 1.5.1 研究目的 | 第22页 |
| 1.5.2 研究意义 | 第22页 |
| 1.6 研究创新点 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-40页 |
| 2.1 主要仪器 | 第23页 |
| 2.2 主要试剂 | 第23-25页 |
| 2.2.1 试剂购买 | 第23-24页 |
| 2.2.2 试剂配制 | 第24-25页 |
| 2.3 大鼠下丘脑神经元细胞提取与培养 | 第25-27页 |
| 2.4 let-7b-5p靶基因预测与验证 | 第27-31页 |
| 2.4.1 靶基因预测以及预测靶基因3'UTR双荧光素酶报告载体及其突变载体构建 | 第27-29页 |
| 2.4.2 靶基因鉴定 | 第29-31页 |
| 2.5 实验动物及分组 | 第31-32页 |
| 2.5.1 实验动物 | 第31页 |
| 2.5.2 动物处理及分组 | 第31-32页 |
| 2.6 电针 | 第32-33页 |
| 2.7 大鼠痛阈变化率测定 | 第33页 |
| 2.8 样品采集 | 第33-34页 |
| 2.9 荧光定量PCR | 第34-37页 |
| 2.9.1 总RNA提取 | 第34页 |
| 2.9.2 总RNA质量检测 | 第34页 |
| 2.9.3 引物设计与合成 | 第34页 |
| 2.9.4 样品cDNA制备 | 第34-35页 |
| 2.9.5 普通PCR | 第35-36页 |
| 2.9.6 PCR产物克隆 | 第36页 |
| 2.9.7 序列比对 | 第36-37页 |
| 2.9.8 荧光定量PCR | 第37页 |
| 2.9.9 miRNA表达量分析 | 第37页 |
| 2.10 免疫印迹 | 第37-39页 |
| 2.10.1 样品处理及蛋白含量测定 | 第37-38页 |
| 2.10.2 SDS-丙烯酰胺凝胶电泳 | 第38-39页 |
| 2.10.3 转印 | 第39页 |
| 2.10.4 免疫反应 | 第39页 |
| 2.10.5 发光及条带分析 | 第39页 |
| 2.11 数据统计分析 | 第39-40页 |
| 3 结果和分析 | 第40-48页 |
| 3.1 let-7b靶基因预测 | 第40页 |
| 3.2 双荧光素酶报告质粒构建结果 | 第40-42页 |
| 3.3 大鼠神经元细胞鉴定 | 第42-43页 |
| 3.4 双荧光素酶报告质粒信号检测 | 第43-44页 |
| 3.5 大鼠鼠尾痛阈变化 | 第44-45页 |
| 3.6 炎症电针耐受大鼠下丘脑let-7b表达变化 | 第45-46页 |
| 3.7 电针耐受大鼠下丘脑PENK蛋白表达变化 | 第46-48页 |
| 4 讨论 | 第48-52页 |
| 4.1 大鼠侧脑室注射模型和足底炎症模型构建 | 第48-49页 |
| 4.2 let-7b对电针大鼠痛阈的影响 | 第49-50页 |
| 4.3 CFA炎症电针耐受大鼠let-7b表达变化 | 第50页 |
| 4.4 let-7b对电针大鼠下丘脑PENK蛋白表达的影响 | 第50-52页 |
| 全文总结 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-65页 |
| 论文补充材料 | 第65-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
