| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略语表(Abbreviation) | 第10-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-19页 |
| 1.1 结核病的病原学 | 第12页 |
| 1.2 结核病的流行特征 | 第12-14页 |
| 1.3 结核分枝杆菌的耐药机制 | 第14-16页 |
| 1.3.1 药物作用靶点的基因突变 | 第14-15页 |
| 1.3.2 细胞壁通透性的改变 | 第15页 |
| 1.3.3 药物外排泵的作用 | 第15-16页 |
| 1.3.4 水解酶对药物的降解作用 | 第16页 |
| 1.4 结核分枝杆菌双组份信号转导系统研究进展 | 第16-18页 |
| 1.4.1 双组份信号转导系统 | 第16-17页 |
| 1.4.2 双组份信号转导系统与耐药性的关系 | 第17-18页 |
| 1.5 孤儿反应调节因子Rv3143 | 第18-19页 |
| 2 研究目的与意义 | 第19-20页 |
| 3 材料与方法 | 第20-38页 |
| 3.1 材料 | 第20-27页 |
| 3.1.1 菌株、质粒及细胞 | 第20页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第20-21页 |
| 3.1.3 培养基和抗生素的配制 | 第21-22页 |
| 3.1.4 主要的溶液配制 | 第22-24页 |
| 3.1.5 引物 | 第24-27页 |
| 3.2 实验方法 | 第27-38页 |
| 3.2.1 结核分枝杆菌的复苏和培养 | 第27页 |
| 3.2.2 菌株的鉴定 | 第27-28页 |
| 3.2.3 Rv3143蛋白的原核表达及纯化 | 第28-30页 |
| 3.2.4 兔抗Rv3143蛋白多克隆抗体的制备 | 第30页 |
| 3.2.5 Western Blot | 第30-31页 |
| 3.2.6 XTT法测定细菌活性 | 第31-32页 |
| 3.2.7 刃天青法测定药物的MIC | 第32页 |
| 3.2.8 生长特性测定 | 第32页 |
| 3.2.9 细胞内药敏实验 | 第32-33页 |
| 3.2.10 转录组测序样品的制备 | 第33-34页 |
| 3.2.11 耻垢分枝杆菌总RNA的提取 | 第34页 |
| 3.2.12 荧光定量PCR | 第34-36页 |
| 3.2.13 表面等离子共振实验 | 第36-37页 |
| 3.2.14 凝胶迁移实验 | 第37页 |
| 3.2.15 细胞壁通透性的测定 | 第37-38页 |
| 4 结果与分析 | 第38-52页 |
| 4.1 Rv3143序列比对 | 第38页 |
| 4.2 菌株的鉴定 | 第38-40页 |
| 4.3 Rv3143蛋白的原核表达及纯化 | 第40-41页 |
| 4.3.1 Rv3143蛋白的原核表达及纯化 | 第40-41页 |
| 4.3.2 Rv3143蛋白浓度的测定 | 第41页 |
| 4.4 Western Blot结果 | 第41-42页 |
| 4.5 菌株药物敏感性的测定 | 第42-43页 |
| 4.5.1 细菌细胞增殖的测定 | 第42页 |
| 4.5.2 MIC的测定 | 第42-43页 |
| 4.6 细菌生长特性的测定 | 第43页 |
| 4.7 细胞内药敏实验 | 第43-44页 |
| 4.8 转录组测序 | 第44-48页 |
| 4.8.1 转录组测序结果整理 | 第44-46页 |
| 4.8.2 转录组测序结果的验证 | 第46-47页 |
| 4.8.3 差异基因的分类 | 第47-48页 |
| 4.9 靶基因的筛选 | 第48-49页 |
| 4.10 凝胶迁移实验结果 | 第49-50页 |
| 4.11 细胞壁通透性的测定 | 第50-52页 |
| 5 讨论 | 第52-55页 |
| 5.1 耻垢分枝杆菌用于结核分枝杆菌的研究 | 第52页 |
| 5.2 Rv3143对耻垢分枝杆菌药物敏感性的影响 | 第52-53页 |
| 5.3 Rv3143蛋白调控基因的筛选 | 第53-54页 |
| 5.4 Rv3143对耻垢分枝杆菌药物敏感性的调控 | 第54-55页 |
| 6 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-63页 |
| 致谢 | 第63页 |