| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| 1.1 概述 | 第13页 |
| 1.2 人血小板衍生生长因子 | 第13-17页 |
| 1.2.1 人血小板衍生生长因子介绍 | 第13-14页 |
| 1.2.2 人血小板衍生生长因子受体及信号通路 | 第14-15页 |
| 1.2.3 人血小板衍生生长因子的应用 | 第15-17页 |
| 1.3 家蚕转基因过表达体系 | 第17-23页 |
| 1.3.1 家蚕转基因技术的建立与发展 | 第17-18页 |
| 1.3.2 家蚕转基因技术的应用 | 第18-23页 |
| 第二章 引言 | 第23-25页 |
| 2.1 研究背景与目的 | 第23页 |
| 2.2 主要研究内容 | 第23-24页 |
| 2.2.1 转PDGF家蚕的获得及分子检测 | 第23-24页 |
| 2.2.2 转PDGF家蚕蚕丝中重组蛋白的分离纯化与活性检测 | 第24页 |
| 2.2.3 PDGF重组蚕丝促进细胞增殖的活性检测 | 第24页 |
| 2.3 技术路线 | 第24-25页 |
| 第三章 转PDGF家蚕的获得及分子检测 | 第25-45页 |
| 3.1 材料与方法 | 第25-38页 |
| 3.1.1 实验材料、试剂及仪器 | 第25-26页 |
| 3.1.2 主要溶液及配制 | 第26-28页 |
| 3.1.3 PDGF基因的合成 | 第28页 |
| 3.1.4 家蚕转基因表达载体的构建 | 第28-32页 |
| 3.1.5 转基因载体的显微注射与后代荧光筛选 | 第32-33页 |
| 3.1.6 基因组PCR | 第33-34页 |
| 3.1.7 反向PCR | 第34-35页 |
| 3.1.8 荧光定量PCR | 第35-36页 |
| 3.1.9 重组蛋白的表达检测 | 第36-38页 |
| 3.2 结果与分析 | 第38-43页 |
| 3.2.1 PDGF基因的合成 | 第38页 |
| 3.2.2 家蚕转基因表达载体的构建 | 第38-39页 |
| 3.2.3 培育转基因家蚕 | 第39-40页 |
| 3.2.4 PDGF基因插入位点的鉴定 | 第40-41页 |
| 3.2.5 PDGF基因的转录分析 | 第41-42页 |
| 3.2.6 重组PDGF蛋白的表达检测 | 第42-43页 |
| 3.3 讨论 | 第43-45页 |
| 第四章 转PDGF家蚕蚕丝中重组蛋白的分离纯化与活性检测 | 第45-55页 |
| 4.1 材料与方法 | 第45-50页 |
| 4.1.1 实验材料、试剂及仪器 | 第45页 |
| 4.1.2 主要溶液及配制 | 第45-47页 |
| 4.1.3 重组PDGF蛋白的提取与分离纯化 | 第47-48页 |
| 4.1.4 NIH/3T3细胞培养 | 第48-49页 |
| 4.1.5 促细胞增殖活性 | 第49-50页 |
| 4.1.6 促细胞迁移活性 | 第50页 |
| 4.2 结果与分析 | 第50-53页 |
| 4.2.1 重组PDGF蛋白的分离纯化 | 第50-52页 |
| 4.2.2 重组PDGF蛋白具有促进细胞增殖的活性 | 第52-53页 |
| 4.2.3 重组PDGF蛋白具有促进细胞迁移的活性 | 第53页 |
| 4.3 讨论 | 第53-55页 |
| 第五章 PDGF重组蚕丝素材的功能研究 | 第55-65页 |
| 5.1 材料与方法 | 第55-58页 |
| 5.1.1 实验材料、试剂及仪器 | 第55页 |
| 5.1.2 主要溶液及配制 | 第55-56页 |
| 5.1.3 扫描电镜观察 | 第56页 |
| 5.1.4 红外光谱分析 | 第56页 |
| 5.1.5 力学性能测试 | 第56页 |
| 5.1.6 细胞毒性 | 第56-57页 |
| 5.1.7 促细胞增殖活性 | 第57页 |
| 5.1.8 重组PDGF蛋白的释放特征分析 | 第57-58页 |
| 5.1.9 蛋白质印迹 | 第58页 |
| 5.2 结果与分析 | 第58-63页 |
| 5.2.1 PDGF重组蚕丝的基本性质 | 第58-60页 |
| 5.2.2 PDGF重组蚕丝不具有细胞毒性 | 第60-61页 |
| 5.2.3 PDGF重组蚕丝具有促进细胞增殖的活性 | 第61-62页 |
| 5.2.4 重组PDGF蛋白的释放特征 | 第62页 |
| 5.2.5 PDGF重组蚕丝浸提液激活ERK通路 | 第62-63页 |
| 5.3 讨论 | 第63-65页 |
| 第六章 总结与讨论 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-75页 |
| 在学期间所发表的文章情况 | 第75-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
