摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第15-35页 |
1.2 细菌群体感应 | 第16-23页 |
1.2.1 革兰氏阴性菌的群体感应 | 第18-20页 |
1.2.2 革兰氏阳性菌的群体感应 | 第20-21页 |
1.2.3 种间群体感应 | 第21-23页 |
1.3 大肠杆菌群体感应 | 第23-27页 |
1.3.1 大肠杆菌群体感应系统 | 第23-25页 |
1.3.2 胞内第二信使C-di-GMP及信号传递作用 | 第25-27页 |
1.4 大肠杆菌群体感应系统一和系统二间的联系 | 第27-28页 |
1.5 T4噬菌体 | 第28-29页 |
1.6 细菌群体感应和噬菌体研究进展 | 第29-33页 |
1.7 技术路线 | 第33页 |
1.8 研究目的和意义 | 第33-35页 |
第二章 大肠杆菌ydiV基因的敲除及遗传回补 | 第35-50页 |
2.1 实验材料和方法 | 第36-38页 |
2.1.1 菌株及质粒 | 第36页 |
2.1.2 培养基的配置 | 第36-37页 |
2.1.3 抗生素的配制 | 第37-38页 |
2.2 方法 | 第38-44页 |
2.2.1 仪器和试剂 | 第38页 |
2.2.2 BW25113感受态细胞的制备 | 第38-39页 |
2.2.3 ydiV基因的敲除 | 第39-42页 |
2.2.4 ydiV回补质粒的提取 | 第42-43页 |
2.2.5 ydiV-pCA24N转化△ydiV-BW25 113感受态细胞 | 第43页 |
2.2.6 SDS-PAGE检测YdiV蛋白 | 第43-44页 |
2.2.7 菌落形态及菌株生理生化特征鉴定 | 第44页 |
2.3 试验结果 | 第44-48页 |
2.3.1 ydiV敲除菌株的构建 | 第44-46页 |
2.3.2 ydiV基因遗传回补 | 第46页 |
2.3.3 SDS-PAGE检测YdiV蛋白 | 第46-47页 |
2.3.4 菌株形态及生理生化特征鉴定 | 第47-48页 |
2.4 讨论 | 第48-50页 |
第三章 基因敲除前后T4感染率的影响 | 第50-61页 |
3.1 实验材料 | 第51-52页 |
3.1.1 实验菌株 | 第51页 |
3.1.2 培养基的配置 | 第51-52页 |
3.2 实验方法 | 第52-54页 |
3.2.1 仪器和试剂 | 第52-53页 |
3.2.2 △ydiV菌株、△sdiA菌株和野生型菌株一步生长曲线 | 第53页 |
3.2.3 T4噬菌体一步生长曲线和感染复数的测定 | 第53页 |
3.2.4 ydiV和sdiA敲除前后T4噬菌体感染情况 | 第53-54页 |
3.2.5 信号分子对噬菌体侵染的影响 | 第54页 |
3.3 实验结果 | 第54-59页 |
3.3.1 △ydiV、△sdiA菌株和野生型菌株一步生长曲线 | 第54-56页 |
3.3.2 T4噬菌体一步生长曲线和感染复数的测定 | 第56-57页 |
3.3.3 sdiA和ydiV敲除前后T4噬菌体感染情况 | 第57-58页 |
3.3.4 信号分子对噬菌体侵染的影响 | 第58-59页 |
3.4 讨论 | 第59-61页 |
第四章 影响T4噬菌体侵染机制的初步探究 | 第61-80页 |
4.1 实验材料和方法 | 第61-63页 |
4.1.1 实验菌株 | 第61-62页 |
4.1.2 培养基的配置 | 第62-63页 |
4.2 实验方法 | 第63-70页 |
4.2.1 试剂和仪器 | 第63-64页 |
4.2.2 △ydiV菌株和Wt菌株温度耐受性和pH耐受性试验 | 第64页 |
4.2.3 ydiV敲除菌株和遗传回补菌株T4噬菌体侵染情况 | 第64-65页 |
4.2.4 T4吸附率的测定 | 第65页 |
4.2.5 生物膜—24孔板微量法测定生物膜 | 第65-66页 |
4.2.6 半定量RT-PCR比较ydiV基因敲除后相关基因表达量 | 第66-70页 |
4.3 结果与分析 | 第70-78页 |
4.3.1 AydiV菌株和Wt菌株温度耐受性和pH耐受性 | 第70-72页 |
4.3.2 ydiV敲除菌株和遗传回补菌株T4噬菌体侵染情况 | 第72-73页 |
4.3.3 T4吸附率的测定 | 第73-76页 |
4.3.4 敲除ydiV对生物膜的影响 | 第76页 |
4.3.5 ydiV基因敲除菌株相关基因表达量变化 | 第76-78页 |
4.4 讨论 | 第78-80页 |
第五章 总结与展望 | 第80-83页 |
致谢 | 第83-84页 |
参考文献 | 第84-91页 |
附录A 攻读硕士期间发表论文目录 | 第91-92页 |
附录B 试验药品与设备 | 第92-94页 |
B.1 主要溶液及其配制 | 第92页 |
B.1.1 1%琼脂糖凝胶的配制 | 第92页 |
B.1.2 TAE电泳缓冲液 | 第92页 |
B.1.3 TBE电泳缓冲液 | 第92页 |
B.2 主要仪器 | 第92-93页 |
B.3 试剂及酶制品 | 第93-94页 |