| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 一、前言 | 第13-31页 |
| 1.1 低磷胁迫应答反应研究进展 | 第13-20页 |
| 1.1.1 低磷胁迫分子调控通路研究进展 | 第13-14页 |
| 1.1.2 低磷胁迫对根系形态建成的相关研究 | 第14-15页 |
| 1.1.3 低磷调控网络中重要转录因子PHR1研究进展 | 第15-17页 |
| 1.1.4 其它重要的应答低磷胁迫相关基因 | 第17-20页 |
| 1.2 生长素对植物发育调控研究进展 | 第20-27页 |
| 1.2.1 生长素信号途径研究进展 | 第21-22页 |
| 1.2.2 生长素对根系形态建成的影响 | 第22-23页 |
| 1.2.3 ARF家族基因的结构及功能 | 第23-25页 |
| 1.2.4 生长素应答元件的研究 | 第25页 |
| 1.2.5 ARF7,ARF19诱导侧根形成的分子机制 | 第25-27页 |
| 1.3 生长素改变根系结构参与磷吸收代谢 | 第27-29页 |
| 1.3.1 ARF响应磷信号的相关研究 | 第28-29页 |
| 1.3.2 生长素信号对PHR1的调控 | 第29页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第29-31页 |
| 二、材料和方法 | 第31-42页 |
| 2.1 实验材料及器材 | 第31-35页 |
| 2.1.1 拟南芥材料及基因信息 | 第31页 |
| 2.1.2 菌种和载体 | 第31页 |
| 2.1.3 工具酶及试剂盒 | 第31页 |
| 2.1.4 常用储存液及缓冲液 | 第31-34页 |
| 2.1.5 常用培养基 | 第34-35页 |
| 2.1.6 实验所用仪器设备 | 第35页 |
| 2.2 实验方法 | 第35-42页 |
| 2.2.1 拟南芥的种子处理及生长条件 | 第35-36页 |
| 2.2.2 拟南芥基因组DNA的提取 | 第36页 |
| 2.2.3 拟南芥RNA的提取,消化及反转录 | 第36页 |
| 2.2.4 突变体的鉴定 | 第36页 |
| 2.2.5 载体的构建 | 第36-37页 |
| 2.2.6 大肠杆菌、农杆菌感受态细胞的的制备 | 第37页 |
| 2.2.7 农杆菌介导的拟南芥浸花法遗传转化 | 第37-38页 |
| 2.2.8 GUS活性的组织化学分析 | 第38页 |
| 2.2.9 无机磷含量的测定 | 第38页 |
| 2.2.10 花青素含量的测定方法 | 第38-39页 |
| 2.2.11 半定量RT-PCR,定量qRT-PCR分析 | 第39页 |
| 2.2.12 酵母单杂交实验 | 第39页 |
| 2.2.13 ARF7,ARF19蛋白原核表达纯化 | 第39-40页 |
| 2.2.14 ARF7,ARF19抗体制备及纯化 | 第40页 |
| 2.2.15 Western blot检测 | 第40页 |
| 2.2.16 EMSA实验 | 第40页 |
| 2.2.17 染色质免疫共沉淀 | 第40页 |
| 2.2.18 生物信息学分析软件 | 第40-42页 |
| 三、结果与分析 | 第42-62页 |
| 3.1 PHR1表达受低磷和生长素诱导分析 | 第42-44页 |
| 3.1.1 PHR1启动子表达模式分析 | 第42页 |
| 3.1.2 PHR1表达受低磷诱导 | 第42-43页 |
| 3.1.3 PHR1表达受生长素诱导 | 第43-44页 |
| 3.2 PHR1启动子生长素应答元件分析 | 第44-46页 |
| 3.2.1 PHR1启动子生物信息学分析 | 第44-45页 |
| 3.2.2 PHR1启动子生长素应答元件缺失分析 | 第45-46页 |
| 3.3 ARF7和ARF19表达受低磷诱导 | 第46-48页 |
| 3.4 ARF7和ARF19是PHR1上游转录调控因子 | 第48-57页 |
| 3.4.1 酵母单杂实验验证ARF7和ARF19能与PHR1启动子结合 | 第48-49页 |
| 3.4.2 EMSA实验验证ARF7和ARF19能与PHR1启动子生长素应答元件结合 | 第49-50页 |
| 3.4.3 ChIP实验验证ARF7和ARF19能与PHR1启动子生长素应答元件结合 | 第50-51页 |
| 3.4.4 ARF7和ARF19正调控PHR1 | 第51-54页 |
| 3.4.5 arf7,arf19和arf7arf19突变体中PSI相关基因表达 | 第54页 |
| 3.4.6 phr1突变体及PHR1过量表达转基因拟南芥鉴定 | 第54-55页 |
| 3.4.7 低磷胁迫下arf7,arf19和arf7arf19的表型 | 第55-57页 |
| 3.5 phr1突变体对生长素的敏感性改变 | 第57-58页 |
| 3.6 ChIP实验分析ARF7,ARF19调控其它MYB-CC家族基因 | 第58-59页 |
| 3.7 WRKY75不受ARF7和ARF19的调控 | 第59-61页 |
| 3.8 低磷条件下PHR1对侧根的调控不依赖于LBD16和LBD29 | 第61-62页 |
| 四、讨论 | 第62-68页 |
| 4.1 生长素调控PHR1基因表达 | 第62-63页 |
| 4.2 PHR1是ARF7和ARF19的直接靶基因 | 第63-64页 |
| 4.3 arf7,arf19和arf7arf19突变体中低磷应答基因(PSI)表达下调 | 第64-65页 |
| 4.4 PHR1基因突变或过表达改变拟南芥对生长素的敏感性 | 第65-66页 |
| 4.5 ARF7,ARF19调控其它MYB-CC家族基因 | 第66页 |
| 4.6 小结 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-78页 |
| 附录 | 第78-83页 |
| 硕士期间参与发表的论文 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
