摘要 | 第5-6页 |
abstract | 第6-7页 |
英文缩略表 | 第11-12页 |
第一章 引言 | 第12-29页 |
1.1 水稻条纹病毒的研究进展 | 第12-15页 |
1.1.1 水稻条纹叶枯病的发生状况 | 第12-13页 |
1.1.2 水稻条纹病毒的基因组结构、编码的蛋白及蛋白功能 | 第13-14页 |
1.1.3 水稻条纹病毒的传播介体及循回路径 | 第14-15页 |
1.2 以昆虫为介体的植物病毒传播机制研究 | 第15-21页 |
1.2.1 非持久型传播 | 第15-16页 |
1.2.2 半持久型传播 | 第16-17页 |
1.2.3 持久非增殖型病毒传播 | 第17-19页 |
1.2.4 持久增殖型病毒传播 | 第19-21页 |
1.3 蛋白质与蛋白质互作研究技术概述 | 第21-27页 |
1.3.1 酵母双杂交系统 | 第21-25页 |
1.3.1.1 酵母双杂交系统的原理及优缺点 | 第21-22页 |
1.3.1.2 其他类型的双杂交系统 | 第22-23页 |
1.3.1.3 酵母双杂交系统在研究植物病毒中的应用 | 第23-25页 |
1.3.2 其他蛋白质互作验证方法的简述 | 第25-27页 |
1.4 论文研究的目的和意义 | 第27-29页 |
第二章 LSST6序列扩增及分析 | 第29-36页 |
2.1 材料与方法 | 第29-31页 |
2.1.1 灰飞虱Total RNA提取 | 第29页 |
2.1.2 ST6基因序列的扩增 | 第29-31页 |
2.1.3 LsST6基因序列生物学分析 | 第31页 |
2.2 实验结果与分析 | 第31-34页 |
2.2.1 灰飞虱Total RNA检测 | 第31页 |
2.2.2 LsST6基因序列的扩增及序列比对 | 第31-32页 |
2.2.3 LsST6蛋白质结构预测 | 第32-33页 |
2.2.4 进化树分析 | 第33-34页 |
2.3 本章小结及讨论 | 第34-36页 |
第三章 灰飞虱LSST6与水稻病毒外壳蛋白的互作验证 | 第36-48页 |
3.1 材料方法 | 第36-43页 |
3.1.1 酵母双杂交系统验证RSV/RGSV NP或RBSDV/SRBSDV p10与Ls ST6互作 | 第36-38页 |
3.1.2 真核表达系统表达RSV NP及LsST6蛋白 | 第38-42页 |
3.1.3 免疫共沉淀验证RSV NP与灰飞虱LsST6蛋白互作 | 第42-43页 |
3.2 实验结果 | 第43-46页 |
3.2.1 载体构建 | 第43-44页 |
3.2.2 LsST6与RSV/RGSV NP以及RBSDV/SRBSDV p10共转酵母细胞表达的互作验证 | 第44-45页 |
3.2.3 LsST6与RSV/RGSV NP以及RBSDV/SRBSDV p10共转Sf9细胞表达的互作验证 | 第45-46页 |
3.3 本章小结与讨论 | 第46-48页 |
第四章 RSV NP与LSST6在SF9细胞及灰飞虱体内的表达和定位 | 第48-57页 |
4.1 材料方法 | 第48-51页 |
4.1.1 RSV NP与LsST6在Sf9细胞中的定位 | 第48-49页 |
4.1.2 LsST6在介体灰飞虱体内不同组织的表达量检测 | 第49-50页 |
4.1.3 LsST6和RSV在中肠上皮细胞中的定位 | 第50-51页 |
4.2 实验结果 | 第51-56页 |
4.2.1 病毒外壳蛋白和灰飞虱LsST6在Sf9细胞中的定位 | 第51-52页 |
4.2.2 LsST6荧光定量引物的检测 | 第52页 |
4.2.3 LsST6在灰飞虱不同组织中的相对表达量检测及组织定位 | 第52-53页 |
4.2.4 RSV在消化道内的侵染扩散及与LsST6在中肠上皮细胞中的共定位 | 第53-56页 |
4.3 本章小结与讨论 | 第56-57页 |
第五章 RSV病毒粒子侵染SF9细胞 | 第57-62页 |
5.1 材料方法 | 第57-59页 |
5.1.1 RSV病毒粒子侵染Sf9细胞 | 第57页 |
5.1.2 DIG-Northernblot | 第57-59页 |
5.2 实验结果 | 第59-61页 |
5.2.1 RSV病毒粒子侵染Sf9细胞的检测 | 第59页 |
5.2.2 RT-qPCR及DIG-Northernblot | 第59-61页 |
5.3 本章小结与讨论 | 第61-62页 |
第六章 RNAI干扰LSST6的表达对RSV的侵染及含量的影响 | 第62-70页 |
6.1 实验方法 | 第62-63页 |
6.1.1 dsRNA合成 | 第62页 |
6.1.2 显微注射无毒灰飞虱 | 第62-63页 |
6.1.3 斑点杂交筛选带毒灰飞虱 | 第63页 |
6.1.4 显微注射带毒灰飞虱 | 第63页 |
6.2 实验结果 | 第63-67页 |
6.2.1 dsRNA合成 | 第63-64页 |
6.2.2 注射dsLsST6对灰飞虱体内LsST6的表达影响 | 第64-65页 |
6.2.3 注射dsLsST6对无毒灰飞虱获毒以及传毒的影响 | 第65-66页 |
6.2.4 注射dsLsST6对带毒灰飞虱体内RSV含量以及传毒的影响 | 第66-67页 |
6.3 本章小结 | 第67-70页 |
第七章 全文总结 | 第70-74页 |
7.1 实验结果总结 | 第70-71页 |
7.2 讨论 | 第71-74页 |
参考文献 | 第74-85页 |
致谢 | 第85-86页 |
作者简历 | 第86-87页 |
附录1 | 第87-89页 |
附录2 | 第89-98页 |