摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
第一章 文献综述 | 第15-25页 |
1.1 柳枝稷的研究现状 | 第15-18页 |
1.1.1 柳枝稷的概述 | 第15-17页 |
1.1.2 柳枝稷在我国的发展潜力分析 | 第17-18页 |
1.2 植物分蘖性状的研究进展 | 第18-21页 |
1.2.1 禾本科植物分蘖生长的规律 | 第18页 |
1.2.2 影响分蘖的主要因素 | 第18页 |
1.2.3 植物激素在分蘖发育中的作用 | 第18-19页 |
1.2.4 环境因素对分蘖的影响 | 第19页 |
1.2.5 植物分蘖调控基因的研究现状 | 第19-21页 |
1.3 甲基磺酸乙酯(EMS)诱变在植物育种中的应用 | 第21页 |
1.4 RNA-seq技术在分子生物学中的应用 | 第21-22页 |
1.5 论文选题目的、技术路线及研究方案 | 第22-25页 |
1.5.1 目的意义 | 第22-23页 |
1.5.2 技术路线 | 第23-24页 |
1.5.3 研究方案 | 第24-25页 |
第二章 柳枝稷不同品种(系)的抗逆性鉴定 | 第25-46页 |
2.1 材料与方法 | 第25-26页 |
2.1.1 试验材料 | 第25页 |
2.1.2 试验方法 | 第25-26页 |
2.1.3 测定项目与方法 | 第26页 |
2.1.4 数据处理 | 第26页 |
2.2 试验结果与分析 | 第26-42页 |
2.2.1 柳枝稷不同品种(系)的抗旱性鉴定 | 第26-33页 |
2.2.1.1 干旱对柳枝稷叶片相对含水量的影响 | 第26-27页 |
2.2.1.2 干旱对柳枝稷叶绿素含量的影响 | 第27-28页 |
2.2.1.3 干旱对柳枝稷分蘖期根冠比的影响 | 第28-29页 |
2.2.1.4 干旱对柳枝稷分蘖期MDA含量的影响 | 第29-30页 |
2.2.1.5 干旱对柳枝稷分蘖期保护酶活性的影响 | 第30-32页 |
2.2.1.6 复水后柳枝稷幼苗的生长变化 | 第32-33页 |
2.2.2 柳枝稷不同品种(系)的耐酸碱性鉴定 | 第33-38页 |
2.2.2.1 酸碱胁迫对柳枝稷幼苗分蘖的影响 | 第33页 |
2.2.2.2 酸碱胁迫对柳枝稷幼苗株高的影响 | 第33-34页 |
2.2.2.3 酸碱胁迫对柳枝稷幼苗鲜重的影响 | 第34-35页 |
2.2.2.4 酸碱胁迫对柳枝稷幼苗根冠比的影响 | 第35页 |
2.2.2.5 酸碱胁迫对柳枝稷幼苗MDA含量的影响 | 第35-36页 |
2.2.2.6 酸碱胁迫对柳枝稷幼苗根系活力的影响 | 第36-37页 |
2.2.2.7 酸碱胁迫对柳枝稷幼苗光合速率的影响 | 第37-38页 |
2.2.3 N、P、K对柳枝稷幼苗生长发育的影响 | 第38-42页 |
2.2.3.1 氮胁迫对柳枝稷苗期生长发育的影响 | 第38-40页 |
2.2.3.2 磷钾胁迫对柳枝稷苗期生长发育的影响 | 第40-42页 |
2.3 结论与讨论 | 第42-46页 |
第三章 柳枝稷分蘖突变体的创制 | 第46-55页 |
3.1 材料与方法 | 第46-47页 |
3.1.1 实验材料 | 第46页 |
3.1.2 试验方法 | 第46页 |
3.1.3 测定指标 | 第46页 |
3.1.4 数据处理 | 第46-47页 |
3.2 结果与分析 | 第47-52页 |
3.2.1 柳枝稷种子EMS诱变体系的建立 | 第47-49页 |
3.2.1.1 EMS对柳枝稷种子发芽率的影响 | 第47页 |
3.2.1.2 EMS对柳枝稷种子成苗率的影响 | 第47-48页 |
3.2.1.3 EMS对柳枝稷MDA含量的影响 | 第48页 |
3.2.1.4 EMS对柳枝稷保护酶活性的影响 | 第48-49页 |
3.2.2 柳枝稷分蘖突变体表型性状的初步研究 | 第49-52页 |
3.2.2.1 突变体的分蘖性状 | 第49-50页 |
3.2.2.2 突变体的含氮量与粗蛋白含量 | 第50-51页 |
3.2.2.3 突变体的激素含量 | 第51-52页 |
3.3 结论与讨论 | 第52-55页 |
第四章 利用RNA-seq技术对柳枝稷分蘖突变体进行研究 | 第55-69页 |
4.1 材料与方法 | 第55-56页 |
4.1.1 实验材料 | 第55页 |
4.1.2 实验方法 | 第55页 |
4.1.3 RNA-seq试验流程 | 第55页 |
4.1.4 RNA-seq信息分析流程 | 第55-56页 |
4.2 结果与分析 | 第56-68页 |
4.2.1 序列分析与组装 | 第56-57页 |
4.2.2 Unigenes分析 | 第57页 |
4.2.3 Unignes注释 | 第57-59页 |
4.2.4 Gene Ontology(GO)注释 | 第59页 |
4.2.5 基因的同源蛋白的(COG)聚类分析 | 第59-61页 |
4.2.6 基因的KEGG注释 | 第61页 |
4.2.7 差异基因的分析 | 第61-63页 |
4.2.8 植物激素途径中的功能基因 | 第63-64页 |
4.2.9 柳枝稷木质素合成中功能基因 | 第64-66页 |
4.2.10 柳枝稷分蘖调控基因的Real-time PCR分析 | 第66-67页 |
4.2.11 SSR和SNP开发 | 第67-68页 |
4.3 结论与讨论 | 第68-69页 |
第五章 柳枝稷分蘖调控基因PvPIN1的克隆及其功能验证 | 第69-85页 |
5.1 材料与方法 | 第69-73页 |
5.1.1 试验材料 | 第69页 |
5.1.2 试验方法 | 第69-73页 |
5.1.2.1 Total RNA的提取(附表 3) | 第69页 |
5.1.2.2 RT-PCR合成cDNA第一链 | 第69-70页 |
5.1.2.3 引物设计和片段的扩增 | 第70页 |
5.1.2.4 目的条带的回收 | 第70页 |
5.1.2.5 PCR回收产物的克隆 | 第70页 |
5.1.2.6 T载体的大肠杆菌DH5α 的转化 | 第70页 |
5.1.2.7 单菌落的挑选 | 第70-71页 |
5.1.2.8 干扰载体和表达载体的构建 | 第71-72页 |
5.1.2.9 转基因过程 | 第72-73页 |
5.1.2.10 基因组DNA的提取(附表 4) | 第73页 |
5.1.2.11 Southern blot(附表 5) | 第73页 |
5.1.2.12 Teal time(RT)-PCR检测基因表达量 | 第73页 |
5.2 结果与分析 | 第73-83页 |
5.2.1 PvPIN1基因的克隆 | 第73-77页 |
5.2.1.1 序列克隆 | 第73页 |
5.2.1.2 PIN1基因开放阅读框(ORF)序列分析 | 第73-76页 |
5.2.1.2 PvPIN1序列的结构域分析 | 第76-77页 |
5.2.2 PvPIN1基因的功能验证 | 第77-83页 |
5.2.2.1 转基因植株的PCR和Southern blot检测 | 第77-79页 |
5.2.2.2 转基因柳枝稷中PvPIN1基因在的表达量分析 | 第79-80页 |
5.2.2.3 柳枝稷转基因植株的生长素含量 | 第80-81页 |
5.2.2.4 PvPIN1基因对柳枝稷生长发育的影响 | 第81-82页 |
5.2.2.5 生长素极性运输抑制剂(TIBA)干扰生长素运输 | 第82-83页 |
5.3 结论与讨论 | 第83-85页 |
第六章 柳枝稷分蘖调控基因PvTB1的克隆及其功能验证 | 第85-95页 |
6.1 实验材料与方法 | 第85页 |
6.1.1 试验材料同第五章 | 第85页 |
6.1.2 试验方法同第五章 | 第85页 |
6.2 结果与分析 | 第85-93页 |
6.2.1 PvTB1基因的克隆 | 第85-88页 |
6.2.1.1 柳枝稷TB1序列的克隆 | 第85-86页 |
6.2.1.2 柳枝稷TB1基因序列分析 | 第86-88页 |
6.2.1.3 PvTB1蛋白结果预测 | 第88页 |
6.2.1.4 PvTB1基因的进化树分析 | 第88页 |
6.2.2 PvTB1基因的功能验证 | 第88-93页 |
6.2.2.1 柳枝稷转PvTB1基因的鉴定 | 第88-90页 |
6.2.2.2 荧光定量PCR检测PvTB1基因的表达量 | 第90-91页 |
6.2.2.3 转基因植株的生长素和细胞分裂素含量 | 第91-92页 |
6.2.2.4 PvTB1基因的表达量与柳枝稷表型间的关系 | 第92-93页 |
6.3 结论与讨论 | 第93-95页 |
第七章 柳枝稷基因枪转化法中采用国产裂解膜代替进.膜的可行性研究 | 第95-100页 |
7.1 材料与方法 | 第95-96页 |
7.1.1 试验材料 | 第95页 |
7.1.2 试验方法 | 第95-96页 |
7.2 结果与分析 | 第96-98页 |
7.2.1 国产与进.裂解膜的爆裂时压强的比较 | 第96-97页 |
7.2.2 国产与进.裂解膜对潮霉素抗性愈伤组织率的影响 | 第97页 |
7.2.3 国产与进.裂解膜对抗性愈伤植株分化的影响 | 第97页 |
7.2.4 转基因植株的PCR鉴定 | 第97-98页 |
7.3 结论与讨论 | 第98-100页 |
第八章 结论与展望 | 第100-102页 |
8.1 主要结论 | 第100-101页 |
8.2 研究创新点 | 第101页 |
8.3 研究展望 | 第101-102页 |
参考文献 | 第102-113页 |
附录 | 第113-120页 |
附录1 柳枝稷水培培养基的配比 | 第113-114页 |
附表2 试验中所用的培养基 | 第114-115页 |
附表 3 Total RNA的提取 | 第115-116页 |
附表4 柳枝稷基因组DNA的提取方法 | 第116-117页 |
附表 5 Southern blot (上海生工提供) | 第117-120页 |
致谢 | 第120-121页 |
作者简介 | 第121-122页 |