| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| Abbreviations | 第11-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-37页 |
| 1.1 稻瘟病菌的威胁 | 第13页 |
| 1.2 稻瘟病菌危害症状 | 第13-14页 |
| 1.3 稻瘟病菌生物学特性 | 第14-15页 |
| 1.4 稻瘟菌致病性分子机理研究的必要性 | 第15-16页 |
| 1.5 稻瘟病菌是研究病原真菌的模式菌株 | 第16-17页 |
| 1.6 稻瘟菌基因组研究进展 | 第17页 |
| 1.7 稻瘟菌致病性分子机理研究进展 | 第17-27页 |
| 1.7.1 分生孢子的形成及萌发机制的研究 | 第17-19页 |
| 1.7.2 附着胞的形成与发育 | 第19-27页 |
| 1.8 APSES类转录因子的研究进展 | 第27-34页 |
| 1.8.1 APSES类转录因子的结构特征 | 第27-29页 |
| 1.8.2 APSES类转录因子在控制真菌生长发育和致病中的作用研究 | 第29-30页 |
| 1.8.3 APSES类转录调节蛋白基因表达调控中的研究 | 第30页 |
| 1.8.4 Mbp1类APSES转录因子在细胞周期调控中起关键作用 | 第30-34页 |
| 1.8.5 稻瘟病菌中APSES转录因子 | 第34页 |
| 1.9 本研究的论文依据及研究意义 | 第34-37页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第37-63页 |
| 2.1 实验材料 | 第37-46页 |
| 2.1.1 稻瘟菌菌株材料 | 第37页 |
| 2.1.2 细菌菌株材料 | 第37页 |
| 2.1.3 酵母菌株材料 | 第37页 |
| 2.1.4 植物材料 | 第37页 |
| 2.1.5 质粒载体 | 第37-38页 |
| 2.1.6 工具酶类、常用试剂盒及化学试剂 | 第38-40页 |
| 2.1.7 常用筛选抗生素 | 第40页 |
| 2.1.8 常用培养基及配方 | 第40页 |
| 2.1.9 常用溶液及配方 | 第40-42页 |
| 2.1.10 本研究所用引物 | 第42-46页 |
| 2.2 常用实验仪器 | 第46页 |
| 2.3 实验方法 | 第46-63页 |
| 2.3.1 稻瘟菌培养及相关操作方法 | 第46-49页 |
| 2.3.2 分子生物学方法 | 第49-63页 |
| 第三章 APSES类转录因子基因PCG2的分离及敲除体生物学表型鉴定 | 第63-71页 |
| 3.1 PCG2基因的分离及表型鉴定 | 第63-65页 |
| 3.1.1 突变体菌落生长速度明显减弱 | 第63页 |
| 3.1.2 突变体PZ2008产孢量明显减慢 | 第63页 |
| 3.1.3 突变体PZ2008附着胞形成率和侵染菌丝形成率均降低 | 第63-64页 |
| 3.1.4 突变体PZ2008对寄主大麦致病性明显减弱 | 第64页 |
| 3.1.5 突变体PZ2008的表型与插入标记共分离 | 第64页 |
| 3.1.6 突变体的表型是由于插入标记破坏了实验室已知基因的启动子所引起的 | 第64-65页 |
| 3.2 PCG2敲除体的部分生物学功能分析 | 第65-69页 |
| 3.2.1 敲除体的验证 | 第66-67页 |
| 3.2.2 PCG2控制细胞的生长和细胞的分裂 | 第67页 |
| 3.2.3 PCG2在稻瘟病菌的侵入的过程起重要作用 | 第67-69页 |
| 3.3 PCG2的互补体完全恢复△PCG2敲除体的表型缺陷 | 第69页 |
| 3.4 结论与讨论 | 第69-71页 |
| 第四章 Pcg2在稻瘟病菌生长发育及致病过程中的分子机理的研究 | 第71-103页 |
| 4.1 通过RACE的方法获得PCG2的编码序列 | 第71-73页 |
| 4.2 Pcg2结构特征分析 | 第73页 |
| 4.3 稻瘟菌Pcg2与酵母S.erevisiae的Swi4-Mbpl类转录因子同源 | 第73-74页 |
| 4.4 稻瘟菌Pcg2定位于细胞核 | 第74-77页 |
| 4.4.1 融合蛋白Pcg2::Gfp定位于细胞核 | 第74-75页 |
| 4.4.2 Pcg2还存在未知的核定位信号 | 第75-77页 |
| 4.5 Pcg2在附着胞阶段表达量最高 | 第77-78页 |
| 4.6 Pcg2包含两个独立的转录激活结构域 | 第78-81页 |
| 4.6.1 Pcg2具有转录激活活性 | 第78-79页 |
| 4.6.2 Pcg2具有两个独立的转录激活结构域 | 第79-81页 |
| 4.7 Pcg2结合的顺势元件的研究 | 第81-83页 |
| 4.7.1 Pcg2蛋白的体外纯化 | 第81页 |
| 4.7.2 EMSA(凝胶电泳迁移率实验)证明Pcg2结合序列 | 第81-83页 |
| 4.8 APSES、ANK1结构域和C-端是Pcg2行使功能所必需的 | 第83-84页 |
| 4.9 Pcg2调控的途径的研究 | 第84-87页 |
| 4.10 Pcg2负调控靶标基因的鉴定 | 第87-95页 |
| 4.10.1 MoBTB1基因受Pcg2的负调控 | 第87页 |
| 4.10.2 Pcg2可以结合MoBTB1基因启动子区域的MCB box | 第87-88页 |
| 4.10.3 MoBTB1编码产物定位于细胞核 | 第88-89页 |
| 4.10.4 MoBTB1基因的敲除 | 第89-90页 |
| 4.10.5 MoBTB1基因的敲除不影响稻瘟病菌的生长和致病力 | 第90-91页 |
| 4.10.6 MoBTB1基因为稻瘟病菌菌丝生长的负调控因子 | 第91-95页 |
| 4.11 Pcg2正调控靶标基因的鉴定 | 第95-96页 |
| 4.11.1 MoUNQ1基因受Pcg2的正调控 | 第95页 |
| 4.11.2 Pcg2能够识别并结合MoUNQ1基因启动子区域的MCB box | 第95-96页 |
| 4.12 Pcg2体内存在形式及转录功能分析 | 第96-98页 |
| 4.13 结论与讨论 | 第98-103页 |
| 第五章 全文总结 | 第103-105页 |
| 参考文献 | 第105-113页 |
| 致谢 | 第113-115页 |
| 附录 | 第115-139页 |
| 作者简历 | 第139-140页 |
