| 摘要 | 第6-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一部分 斑马鱼dio3b基因的鉴定以及D3a和D3b酶学特性和表达谱的研究 | 第14-72页 |
| 引言 | 第14-16页 |
| 材料与方法 | 第16-38页 |
| 一、主要试剂 | 第16-17页 |
| 二、实验仪器和设备 | 第17-18页 |
| 三、方法 | 第18-38页 |
| （一）直系同源预测 | 第18页 |
| （二） 3'cDNA末端快速扩增技术 | 第18-22页 |
| （三） 表达载体的构建 | 第22页 |
| （四） 定点突变及突变产物获得 | 第22-27页 |
| （五） 细胞培养和转染 | 第27-28页 |
| （六） 酶活检测 | 第28-30页 |
| （七） Western bolt法检测蛋白产物 | 第30-31页 |
| （八） 原位杂交 | 第31-38页 |
| 结果 | 第38-68页 |
| 1 斑马鱼同源基因Dio3a和Dio3b的同源性鉴定以及基因结构比较 | 第38-48页 |
| 2 酶的动力学方程和斑马鱼dio3基因的差异表达 | 第48-64页 |
| 3 斑马鱼dio3b不存在印迹表达 | 第64-65页 |
| 4 斑马鱼脱碘酶家族的酶活特性与哺乳动物的不同 | 第65-68页 |
| 讨论 | 第68-71页 |
| 结论 | 第71-72页 |
| 第二部分 脱碘酶D3b在斑马鱼发育中的功能研究 | 第72-112页 |
| 引言 | 第72-80页 |
| 一、斑马鱼简介 | 第72-73页 |
| 二、斑马鱼作为研究甲状腺激素生理和代谢的模式生物 | 第73-78页 |
| 1 斑马鱼早期发育过程中甲状腺激素水平 | 第73-74页 |
| 2. 甲状腺激素受体在斑马鱼发育过程中的表达 | 第74-75页 |
| 3. 马鱼发育过程中脱碘酶的表达和分布 | 第75-77页 |
| 4. 鱼作为甲状腺激素相关蛋白基因沉默的模型 | 第77-78页 |
| 三、研究背景 | 第78-80页 |
| 材料与方法 | 第80-91页 |
| 试剂 | 第80-81页 |
| 方法 | 第81-91页 |
| 一、斑马鱼的饲养和药物处理 | 第81页 |
| 二、胚胎注射 | 第81-83页 |
| 三、酶活检测 | 第83-84页 |
| 四、Tunel | 第84-86页 |
| 五、身体长度测量 | 第86页 |
| 六、RealtimePCR检测基因表达差异 | 第86-91页 |
| 结果 | 第91-106页 |
| 1. 斑马鱼发育早期不同脱碘酶的表达谱 | 第91-93页 |
| 2. 斑马鱼D3b表达降低导致斑马鱼身体变短 | 第93-106页 |
| 2.1 Morpholin o介导的敲除可以导致D3酶活性的下降 | 第93-95页 |
| 2.2 D3b的敲除可以导致斑马鱼身体变短 | 第95-99页 |
| 2.3 甲状腺激素可以诱导D3a和D3b的表达 | 第99-101页 |
| 2.4 甲状腺激素通过诱导凋亡途径导致斑马鱼身体长度变短 | 第101-106页 |
| 讨论 | 第106-111页 |
| 结论 | 第111-112页 |
| 参考文献 | 第112-119页 |
| 致谢 | 第119-121页 |
| 已发表文章 | 第121页 |
