| 符号说明 | 第4-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-30页 |
| 1.1 禾谷镰刀菌研究进展 | 第11-17页 |
| 1.1.1 小麦赤霉病概述 | 第11-12页 |
| 1.1.2 禾谷镰刀菌生物学特征 | 第12-13页 |
| 1.1.3 禾谷镰刀菌致病机制及毒素研究 | 第13-14页 |
| 1.1.4 禾谷镰刀菌基因组学研究进展 | 第14-17页 |
| 1.2 真菌磷脂酶C研究进展 | 第17-25页 |
| 1.2.1 磷脂和磷脂酶 | 第17-18页 |
| 1.2.2 磷脂酶C的种类和结构 | 第18-20页 |
| 1.2.3 磷脂酶C的活性调节及信号转导 | 第20-22页 |
| 1.2.4 真菌磷脂酶C功能研究 | 第22-25页 |
| 1.3 植物病原真菌遗传转化研究进展 | 第25-28页 |
| 1.3.1 原生质体-聚乙二醇(PEG)介导转化法 | 第26页 |
| 1.3.2 限制酶介导转化法 | 第26-27页 |
| 1.3.3 农杆菌介导转化法 | 第27页 |
| 1.3.4 基因沉默 | 第27-28页 |
| 1.3.5 转座子插入突变法 | 第28页 |
| 1.4 研究目的和意义 | 第28-30页 |
| 2 材料和方法 | 第30-49页 |
| 2.1 实验材料 | 第30-34页 |
| 2.1.1 供试菌株 | 第30页 |
| 2.1.2 供试质粒 | 第30页 |
| 2.1.3 酶及生化试剂 | 第30页 |
| 2.1.4 培养基及主要生化试剂的配制 | 第30-32页 |
| 2.1.5 PCR引物 | 第32-33页 |
| 2.1.6 主要实验仪器及耗材 | 第33-34页 |
| 2.2 实验方法 | 第34-49页 |
| 2.2.1 禾谷镰刀菌PLC1基因序列分析 | 第34页 |
| 2.2.2 禾谷镰刀菌PLC1基因的克隆及序列测定 | 第34-38页 |
| 2.2.3 禾谷镰刀菌PLC1基因敲除突变体的获得 | 第38-44页 |
| 2.2.4 禾谷镰刀菌PLC1基因回复突变体的获得 | 第44-46页 |
| 2.2.5 禾谷镰刀菌PLCI基因功能验证 | 第46-49页 |
| 3 结果与分析 | 第49-68页 |
| 3.1 禾谷镰刀菌PLC1基因克隆及序列分析 | 第49-53页 |
| 3.1.1 禾谷镰刀菌PLC基因家族及各基因推导的氨基酸结构分析 | 第49-50页 |
| 3.1.2 禾谷镰刀菌PLC1基因的克隆 | 第50-52页 |
| 3.1.3 禾谷镰刀菌PLC1核苷酸序列及推导的氨基酸序列 | 第52-53页 |
| 3.2 禾谷镰刀菌PLCl基因敲除实验 | 第53-58页 |
| 3.2.1 禾谷镰刀菌PLC1基因敲除载体的构建及验证 | 第53-56页 |
| 3.2.2 原生质体的制备和转化 | 第56页 |
| 3.2.3 禾谷镰刀菌PLC1基因敲除突变体的获得及验证 | 第56-58页 |
| 3.3 禾谷镰刀菌基因敲除突变体回复实验 | 第58-60页 |
| 3.3.1 禾谷镰刀菌PLC1基因回复载体的构建及转化验证 | 第58-60页 |
| 3.3.2 禾谷镰刀菌PLC1基因回复突变体的获得及验证 | 第60页 |
| 3.4 突变体的表型及毒素含量分析 | 第60-68页 |
| 3.4.1 敲除FgPLC1基因对菌丝在不同压力胁迫下生长的影响 | 第60-61页 |
| 3.4.2 FgPLCl基因参与分生孢子产生及形态建成 | 第61-64页 |
| 3.4.3 敲除FgPLC!基因对禾谷镰刀菌有性世代的影响 | 第64页 |
| 3.4.4 敲除基因对禾谷镰刀菌7W5、基因表达量的影响 | 第64-65页 |
| 3.4.5 敲除FgPLC1基因对禾谷镰刀菌有性世代的影响 | 第65-68页 |
| 4. 讨论 | 第68-70页 |
| 5 总结与展望 | 第70-72页 |
| 5.1 全文总结 | 第70-71页 |
| 5.2 研究展望 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第85页 |
