中文摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10-11页 |
(一)前言 | 第13-25页 |
1.研究背景 | 第13页 |
2.研究现状 | 第13-25页 |
2.1 配子发生 | 第13-16页 |
2.2 配子发生调控 | 第16-18页 |
2.3 小鼠配子的体外诱导 | 第18-22页 |
2.4 长链非编码RNA | 第22-25页 |
(二)材料和方法 | 第25-37页 |
1.材料 | 第25-29页 |
1.1 实验动物 | 第25页 |
1.2 实验细胞 | 第25页 |
1.3 实验试剂与培养基 | 第25-27页 |
1.4 实验耗材与仪器 | 第27-28页 |
1.5 引物序列 | 第28-29页 |
2.方法 | 第29-37页 |
2.1 饲养细胞的制备 | 第29-30页 |
2.2 小鼠E3.5天囊胚的获取 | 第30-31页 |
2.3 小鼠E6.5外胚层细胞获取 | 第31页 |
2.4 小鼠E12.5原始生殖细胞获取 | 第31页 |
2.5 大量细胞RNA提取 | 第31-32页 |
2.6 少量细胞RNA提取 | 第32页 |
2.7 总RNA中去除Ribosome RNA | 第32-33页 |
2.8 高通量测序文库构建 | 第33-35页 |
2.9 RNA-Seq数据处理 | 第35-36页 |
2.10 实时荧光定量PCR | 第36-37页 |
(三)实验结果 | 第37-50页 |
1.体外诱导PGCLCs体系的建立 | 第37-41页 |
1.1 EpiLCs体外分化 | 第37-38页 |
1.2 PGCLCs体外分化 | 第38-41页 |
2.体外诱导PGCLCs过程中文库构建与检测 | 第41-45页 |
2.1 二代测序文库的构建 | 第41-42页 |
2.2 数据质量检测 | 第42-43页 |
2.3 数据中mRNA表达量变化 | 第43-45页 |
3.体外诱导PGCLCs分化过程中lncRNA表达特点 | 第45-48页 |
3.1 数据中lncRNA的挑选 | 第45-46页 |
3.2 lncRNA表达的验证 | 第46-48页 |
4.获取小鼠体内细胞 | 第48-50页 |
(四)讨论 | 第50-52页 |
综述 | 第52-59页 |
参考文献 | 第59-69页 |
致谢 | 第69-70页 |