摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第12-26页 |
1.1 我国绒山羊概况 | 第12-13页 |
1.1.1 我国绒山羊主要品种及特征 | 第12页 |
1.1.2 我国绒山羊生产的重要意义 | 第12-13页 |
1.2 毛囊的结构与功能、形态发生、周期性生长及其分子调控机制 | 第13-19页 |
1.2.1 毛囊的结构与功能 | 第13-14页 |
1.2.2 毛囊的形态发生 | 第14-15页 |
1.2.3 毛囊的周期性生长 | 第15-17页 |
1.2.4 毛囊周期性生长的分子调控机制 | 第17-19页 |
1.3 FGF 家族及 FGF5 基因的研究进展 | 第19-21页 |
1.3.1 FGF 家族 | 第19页 |
1.3.2 FGF 家族的结构 | 第19-20页 |
1.3.3 FGF 家族的功能 | 第20-21页 |
1.3.4 FGF5 基因功能的研究进展 | 第21页 |
1.4 RNA 干扰技术 | 第21-26页 |
1.4.1 RNA 干扰的作用机制 | 第22-24页 |
1.4.2 RNA 干扰技术的应用 | 第24-26页 |
实验研究 | 第26-53页 |
第二章 绒山羊 FGF5 基因毛囊特异性表达载体的构建及转染胎儿成纤维细胞的表达检测 | 第26-41页 |
2.1 实验材料 | 第26-28页 |
2.1.1 载体、菌株和细胞 | 第26页 |
2.1.2 试剂 | 第26-27页 |
2.1.3 仪器设备 | 第27页 |
2.1.4 常用试剂配置 | 第27-28页 |
2.2 实验方法 | 第28-33页 |
2.2.1 绒山羊 FGF5 基因毛囊特异性表达载体 pEGFP-N1-KF 的构建 | 第28-31页 |
2.2.2 绒山羊胎儿成纤维细胞的电转染 | 第31-32页 |
2.2.3 qRT-PCR 检测 FGF5 的表达量 | 第32-33页 |
2.2.4 Western blotting 检测 P2A 的剪切效率 | 第33页 |
2.3 结果 | 第33-38页 |
2.3.1 绒山羊 FGF5 基因毛囊特异性表达载体 pEGFP-N1-KF 的构建结果 | 第33-37页 |
2.3.2 绒山羊胎儿成纤维细胞的电转染结果 | 第37页 |
2.3.3 FGF5 基因的 qRT-PCR 检测结果 | 第37-38页 |
2.3.4 Western blotting 检测结果 | 第38页 |
2.4 讨论 | 第38-40页 |
2.5 小结 | 第40-41页 |
第三章 绒山羊 FGF5 基因的 RNA 干扰研究 | 第41-53页 |
3.1 实验材料 | 第41-42页 |
3.1.1 载体、菌株和细胞 | 第41页 |
3.1.2 试剂 | 第41页 |
3.1.3 仪器设备 | 第41-42页 |
3.2 实验方法 | 第42-45页 |
3.2.1 shRNA 干扰片段的设计 | 第42-43页 |
3.2.2 RNAi 表达载体 pGPU6-shRNA 的构建 | 第43页 |
3.2.3 辅助载体 pFGF5-N1 的构建 | 第43-44页 |
3.2.4 RNAi 表达载体与辅助载体在绒山羊胎儿成纤维细胞中的共转染 | 第44页 |
3.2.5 共转染细胞的 qRT-PCR 分析 | 第44页 |
3.2.6 共转染细胞的 Western blotting 半定量分析 | 第44-45页 |
3.3 结果 | 第45-51页 |
3.3.1 RNAi 表达载体 pGPU6-shRNA 的构建结果 | 第45-46页 |
3.3.2 辅助载体 pFGF5-N1 的构建结果 | 第46-48页 |
3.3.3 RNAi 表达载体与辅助载体的共转染结果 | 第48-50页 |
3.3.4 qRT-PCR 检测 RNAi 结果 | 第50页 |
3.3.5 Western blotting 检测 RNAi 结果 | 第50-51页 |
3.4 分析 | 第51-52页 |
3.5 小结 | 第52-53页 |
全文结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
作者简介 | 第63页 |