| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 符号说明 | 第10-11页 |
| 文献综述 | 第11-22页 |
| 1 病原学 | 第12页 |
| 2 流行病学 | 第12-13页 |
| 2.1 传染源 | 第12页 |
| 2.2 传播途径 | 第12-13页 |
| 2.3 易感人群 | 第13页 |
| 3 主要毒力因子及致病作用 | 第13-16页 |
| 3.1 志贺毒素 | 第14页 |
| 3.2 pO157质粒 | 第14-15页 |
| 3.3 LEE致病岛 | 第15-16页 |
| 3.3.1 Eae基因 | 第15页 |
| 3.3.2 Tir基因 | 第15页 |
| 3.3.3 编码Ⅲ型分泌系统(esc或sep)及其分泌蛋白(esp)的基因 | 第15-16页 |
| 4 致病机理及临床特征 | 第16-17页 |
| 4.1 致病机理 | 第16页 |
| 4.2 临床特征 | 第16-17页 |
| 5 检测方法 | 第17-20页 |
| 5.1 细菌分离法检测 | 第17页 |
| 5.2 免疫学检测方法 | 第17-19页 |
| 5.2.1 免疫磁珠法 | 第18页 |
| 5.2.2 免疫荧光法 | 第18页 |
| 5.2.3 凝集试验法 | 第18页 |
| 5.2.4 胶体金免疫检测技术 | 第18-19页 |
| 5.3 分子生物学检测方法 | 第19-20页 |
| 5.3.1 聚合酶链反应(PCR)技术 | 第19页 |
| 5.3.2 基因芯片技术 | 第19页 |
| 5.3.3 生物传感技术 | 第19-20页 |
| 6 防治 | 第20页 |
| 7 实验目的及意义 | 第20-22页 |
| 研究一 大肠杆菌O157：H7鞭毛蛋白的原核表达 | 第22-34页 |
| 摘要 | 第22页 |
| 1 材料 | 第22-24页 |
| 1.1 菌株和质粒 | 第22页 |
| 1.2 工具酶与试剂 | 第22页 |
| 1.3 培养基及常用溶液 | 第22-24页 |
| 1.4 主要仪器 | 第24页 |
| 2 方法 | 第24-28页 |
| 2.1 EHEC O157：H7鞭毛flic基因的扩增 | 第24-25页 |
| 2.2 pMD18-T-Flic质粒的构建及筛选 | 第25-26页 |
| 2.3 pET-28a-Flic质粒的构建及筛选 | 第26-27页 |
| 2.4 His-Flic-H7融合蛋白的诱导表达及SDS-PAGE分析 | 第27页 |
| 2.5 融合蛋白His-Flic-H7的大量表达及纯化 | 第27-28页 |
| 2.6 融合蛋白His-Flic-H7的Western-blot分析 | 第28页 |
| 3 结果 | 第28-33页 |
| 3.1 Flic基因的扩增 | 第28页 |
| 3.2 pMD18-T-Flic重组质粒的鉴定 | 第28-30页 |
| 3.3 重组质粒pET-28a-Flic的鉴定 | 第30页 |
| 3.4 His-Flic-H7融合蛋白诱导表达的SDS-PAGE分析 | 第30-31页 |
| 3.5 His-Flic-H7融合蛋白的大量诱导及纯化 | 第31页 |
| 3.6 His-Flic-H7融合蛋白的Western-blot | 第31-33页 |
| 4 讨论 | 第33-34页 |
| 研究二 大肠杆菌O157：H7鞭毛蛋白的单克隆抗体制备 | 第34-43页 |
| 摘要 | 第34页 |
| 1 材料 | 第34-35页 |
| 1.1 细胞和抗原 | 第34页 |
| 1.2 实验动物 | 第34页 |
| 1.3 主要试剂 | 第34页 |
| 1.4 主要仪器 | 第34页 |
| 1.5 主要培养基 | 第34-35页 |
| 2 方法 | 第35-38页 |
| 2.1 小鼠的免疫 | 第35页 |
| 2.2 细胞融合 | 第35-36页 |
| 2.3 阳性克隆的筛选 | 第36-37页 |
| 2.4 杂交瘤细胞的亚克隆 | 第37页 |
| 2.5 腹水的制备 | 第37页 |
| 2.6 单克隆抗体的亚类鉴定 | 第37页 |
| 2.7 单克隆抗体的特异性检测 | 第37页 |
| 2.8 单克隆抗体效价的检测 | 第37-38页 |
| 3 结果 | 第38-42页 |
| 3.1 血清及包被抗原的工作浓度的确定 | 第38-39页 |
| 3.2 杂交瘤细胞的筛选及亚克隆 | 第39页 |
| 3.3 单克隆抗体亚类的鉴定 | 第39-40页 |
| 3.4 单克隆抗体的特异性检测 | 第40-41页 |
| 3.5 抗体效价的检测 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-50页 |
| 研究结论 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
