| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 插图和附表清单 | 第7-8页 |
| 缩略语表 | 第8-9页 |
| 1 引言 | 第9-21页 |
| 1.1 马传染性贫血概述 | 第9页 |
| 1.2 马传染性贫血病毒概述 | 第9-12页 |
| 1.2.1 EIAV的形态结构和理化性质 | 第10页 |
| 1.2.2 EIAV的生物学特性 | 第10-11页 |
| 1.2.3 EIAV的基因组和蛋白 | 第11-12页 |
| 1.3 EIAV感染周期 | 第12-13页 |
| 1.4 Rev蛋白 | 第13-18页 |
| 1.4.1 Rev蛋白的功能域和结构 | 第13-15页 |
| 1.4.2 Rev蛋白的作用 | 第15-17页 |
| 1.4.3 Rev的多样性 | 第17-18页 |
| 1.5 单克隆抗体技术 | 第18-19页 |
| 1.6 表位鉴定技术 | 第19-20页 |
| 1.7 研究目的和意义 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-31页 |
| 2.1 材料 | 第21-23页 |
| 2.1.1 病毒株、质粒和菌株 | 第21页 |
| 2.1.2 主要试剂及实验动物 | 第21-22页 |
| 2.1.3 溶液和常用培养基 | 第22-23页 |
| 2.1.4 仪器 | 第23页 |
| 2.2 方法 | 第23-31页 |
| 2.2.1 Rev基因原核表达重组质粒的构建 | 第23-24页 |
| 2.2.2 重组质粒的鉴定 | 第24-25页 |
| 2.2.3 重组质粒的原核表达 | 第25页 |
| 2.2.4 蛋白纯化 | 第25-26页 |
| 2.2.5 Rev蛋白单克隆抗体的制备 | 第26-29页 |
| 2.2.6 表位鉴定 | 第29-31页 |
| 3 结果 | 第31-36页 |
| 3.1 Rev基因 | 第31-32页 |
| 3.2 重组质粒pET-Rev的鉴定 | 第32页 |
| 3.3 蛋白SDS-PAGE分析 | 第32-33页 |
| 3.4 单克隆抗体的制备和鉴定 | 第33-35页 |
| 3.4.1 阳性杂交瘤细胞株筛选方法(ELISA)的建立 | 第33页 |
| 3.4.2 融合后杂交瘤细胞的筛选 | 第33页 |
| 3.4.3 单抗亚型鉴定结果 | 第33页 |
| 3.4.4 单抗Western blot鉴定结果 | 第33-34页 |
| 3.4.5 单抗间接免疫荧光(IFA)鉴定结果 | 第34页 |
| 3.4.6 腹水效价的测定 | 第34-35页 |
| 3.4.7 腹水的纯化 | 第35页 |
| 3.5 抗原表位鉴定 | 第35-36页 |
| 3.5.1 抗原表位的初步鉴定 | 第35页 |
| 3.5.2 抗原表位的精确鉴定 | 第35-36页 |
| 4 讨论 | 第36-38页 |
| 4.1 重组质粒的构建和表达 | 第36-37页 |
| 4.2 单抗与抗原的反应活性 | 第37页 |
| 4.3 阳性杂交瘤细胞的筛选及腹水的制备 | 第37页 |
| 4.4 表位鉴定 | 第37-38页 |
| 4.5 2D9 MAb的应用前景 | 第38页 |
| 5 结论 | 第38-39页 |
| 致谢 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-46页 |
| 作者简介 | 第46页 |