致谢 | 第5-6页 |
中文摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
缩略语 | 第9-10页 |
目次 | 第10-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-33页 |
1.1 真核生物互斥可变剪接研究进展 | 第12-24页 |
1.1.1 RNA剪接 | 第12-13页 |
1.1.2 可变剪接 | 第13页 |
1.1.3 可变剪接与人类疾病研究 | 第13-17页 |
1.1.4 可变剪接的类型 | 第17-18页 |
1.1.5 互斥剪接 | 第18-24页 |
1.2 多药耐药性蛋白(MRP)基因的研究进展 | 第24-27页 |
1.2.1 人MRP基因研究进展 | 第25-26页 |
1.2.2 秀丽隐杆线虫MRP1基因的研究进展 | 第26-27页 |
1.3 肌球蛋白重链(MHC)基因的研究进展 | 第27-29页 |
1.3.1 动物Mhc基因的研究进展 | 第27-28页 |
1.3.2 Mhc基因的互斥剪接研究 | 第28-29页 |
1.4 秀丽隐杆线虫及其在生物学研究中的应用 | 第29-33页 |
1.4.1 秀丽隐杆线虫的基本特点 | 第29-30页 |
1.4.2 秀丽隐杆线虫的生活史 | 第30-31页 |
1.4.3 秀丽隐杆线虫的研究与应用 | 第31-33页 |
第二章 实验方案设计 | 第33-37页 |
2.1 研究目的及意义 | 第33-34页 |
2.2 研究内容 | 第34-35页 |
2.2.1 线虫物种及其他代表物种MRP1基因互斥外显子的序列分析 | 第34页 |
2.2.2 秀丽隐杆线虫MRP1基因互斥剪接机制的初步研究 | 第34页 |
2.2.3 膜翅Mhc互斥可变剪接研究 | 第34-35页 |
2.3 技术路线 | 第35-37页 |
2.3.1 线虫MRP基因互斥外显子剪接的研究 | 第35-36页 |
2.3.2 膜翅目Mhc互斥可变剪接的初步研究 | 第36-37页 |
第三章 秀丽隐杆线虫MRP1基因互斥剪接机制的初步研究 | 第37-68页 |
3.1 材料与试剂 | 第37-39页 |
3.2 实验方法 | 第39-49页 |
3.2.1 秀丽隐杆线虫及其他物种MRP1基因序列分析 | 第39页 |
3.2.2 引物设计 | 第39-40页 |
3.2.3 秀丽隐杆线虫的培养与保存 | 第40-41页 |
3.2.4 秀丽隐杆线虫总RNA的提取及检测 | 第41页 |
3.2.5 总RNA逆转录合成第一链eDNA模板 | 第41-42页 |
3.2.6 PCR扩增目的基因 | 第42-43页 |
3.2.7 MRP1互斥剪接基因PCR产物酶切检测 | 第43-44页 |
3.2.8 基因组模板提取 | 第44页 |
3.2.9 PCR产物的胶回收(Biospin胶回收试剂盒) | 第44-45页 |
3.2.10 PCR产物的T载体连接反应 | 第45页 |
3.2.11 E.coli TG1感受态细胞的制备 | 第45-46页 |
3.2.12 连接产物转化感受态细胞 | 第46页 |
3.2.13 阳性菌落扩大培养 | 第46页 |
3.2.14 抽提质粒DNA | 第46-47页 |
3.2.15 质粒酶切鉴定 | 第47页 |
3.2.16 秀丽隐杆线虫野生型表达载体的构建 | 第47-48页 |
3.2.17 秀丽隐杆线虫表达载体的显微注射 | 第48-49页 |
3.3 结果与分析 | 第49-64页 |
3.3.1 MRP1基因互斥外显子进化分析 | 第49-54页 |
3.3.2 秀丽隐杆线虫MRP1基因外显子表达分析 | 第54-55页 |
3.3.3 秀丽隐杆线虫互斥剪接顺式作用元件分析 | 第55页 |
3.3.4 秀丽隐杆线虫互斥剪接的初步研究 | 第55-59页 |
3.3.5 膜翅目Mhc互斥可变剪接进化动态初步分析 | 第59-63页 |
3.3.6 膜翅目Mhc互斥可变剪接顺式作用元件初步研究 | 第63-64页 |
3.4 讨论 | 第64-68页 |
3.4.1 MRP1基因互斥可变剪接进化动态 | 第64-66页 |
3.4.2 秀丽隐杆线虫互斥可变剪接顺式调控元件 | 第66-67页 |
3.4.3 膜翅目Mhc互斥可变剪接进化动态和顺式作用元件研究 | 第67-68页 |
研究创新点及展望 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-76页 |
个人简历 | 第76页 |