中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
符号说明 | 第10-12页 |
前言 | 第12-17页 |
研究现状、成果 | 第12-15页 |
研究目的、方法 | 第15-17页 |
一、miR-1975对宫颈癌细胞的的作用研究 | 第17-34页 |
1.1 材料和方法 | 第17-26页 |
1.1.1实验材料 | 第17-18页 |
1.1.2 实验方法 | 第18-26页 |
1.2 结果 | 第26-30页 |
1.2.1 Real-time PCR验证miR-1975过表达P53后miR-1975差异性表达 | 第26-27页 |
1.2.2 pcDNA3/pri-miR-1975质粒的构建 | 第27页 |
1.2.3 细胞转染效率检测 | 第27-28页 |
1.2.4 Real-time PCR检测pcDNA3/pri-miR-1975质粒的有效性 | 第28页 |
1.2.5 miR-1975对宫颈癌细胞生长活性的影响 | 第28-29页 |
1.2.6 miR-1975对宫颈癌细胞生长能力的影响 | 第29-30页 |
1.3 讨论 | 第30-33页 |
1.3.1 miR-1975在肿瘤中的作用 | 第31页 |
1.3.2 miR-1975对宫颈癌HeLa细胞的表型影响 | 第31-33页 |
1.4 小结 | 第33-34页 |
二、miR-1975在宫颈癌中靶基因的确定 | 第34-49页 |
2.1 材料和方法 | 第34-41页 |
2.1.1 实验材料 | 第34-36页 |
2.1.2 实验方法 | 第36-41页 |
2.2 结果 | 第41-46页 |
2.2.1 EGFP荧光报告载体的构建 | 第41-43页 |
2.2.2 EGFP荧光报告载体实验验证WZ是miR-1975的直接作用靶基因 | 第43-44页 |
2.2.3 Real-Time PCR方法检测在过表达miR-1975后的宫颈癌HeLa细胞中WZ mRNA的表达水平 | 第44-45页 |
2.2.4 Western blot检测在过表达miR-1975后的宫颈癌HeLa细胞中WZ蛋白的表达水平 | 第45-46页 |
2.3 讨论 | 第46-47页 |
2.3.1 荧光报告载体实验的应用 | 第46-47页 |
2.3.2 miR-1975对靶基因WZ的负性调节作用 | 第47页 |
2.4 小结 | 第47-49页 |
三、靶基因WZ在宫颈癌中的作用研究 | 第49-54页 |
3.1 材料和方法 | 第49-50页 |
3.1.1 实验材料 | 第49页 |
3.1.2 实验方法 | 第49-50页 |
3.2 结果 | 第50-53页 |
3.2.1 pSilencer/si-WZ质粒的构建 | 第50页 |
3.2.2 Western blot验证pSilencer/si-WZ质粒的有效性 | 第50-51页 |
3.2.3 MTT检测基因WZ对宫颈癌细胞生长活性的影响 | 第51-52页 |
3.2.4 细胞集落形成实验分析WZ对宫颈癌细胞集落形成能力的影响 | 第52页 |
3.2.5 细胞生长曲线实验分析WZ对宫颈癌细胞生长能力的影响 | 第52-53页 |
3.3 讨论 | 第53页 |
3.4 小结 | 第53-54页 |
结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-60页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第60-61页 |
综述 MicroRNA与P53之间的相互作用 | 第61-66页 |
综述参考文献 | 第64-66页 |
致谢 | 第66页 |