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锰核土壤不同土层锰氧化细菌群落结构与多样性研究

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
缩略语表第10-11页
1 前言第11-22页
    1.1 自然界中的锰氧化物第11页
    1.2 锰氧化物的生物成因第11-16页
        1.2.1 锰氧化细菌第12-14页
        1.2.2 锰氧化物的生物成因机制第14-16页
    1.3 土壤微生物群落结构和多样性研究方法第16-20页
        1.3.1 研究方法概述第16-17页
        1.3.2 荧光原位杂交(FISH)第17页
        1.3.3 核糖体DNA扩增片段限制性内切酶分析(ARDRA)第17-18页
        1.3.4 末端限制性片段长度多态性(T-RFLP)第18页
        1.3.5 变性梯度凝胶电泳(DGGE)第18-19页
        1.3.6 16S rDNA克隆文库第19-20页
        1.3.7 单链构象多态性(SSCP)第20页
    1.4 土壤环境的锰氧化细菌研究进展第20-21页
    1.5 研究目的和意义第21-22页
2. 材料与方法第22-36页
    2.1 材料第22-24页
        2.1.1 样品第22页
        2.1.2 主要仪器设备第22页
        2.1.3 主要试剂第22-23页
        2.1.4 PCR引物第23页
        2.1.5 分析软件第23-24页
        2.1.6 培养基第24页
        2.1.7 菌株和载体第24页
    2.2 方法第24-36页
        2.2.1 样品的采集和保存第24-25页
        2.2.2 土壤化学性质的测定第25页
        2.2.3 土壤可培养好氧细菌的计数和分离第25页
        2.2.4 分离细菌的锰氧化活性测定及鉴定第25-28页
        2.2.5 各层土壤的富集培养及取样第28-29页
        2.2.6 各层原始土壤及土壤富集液总DNA的提取第29-30页
        2.2.7 总DNA的PCR反应及产物纯化第30-31页
        2.2.8 变性梯度凝胶电泳(DGGE)分析第31-33页
        2.2.9 用"压碎与浸泡法"回收DGGE的优势条带第33页
        2.2.10 扩增回收的DGGE条带第33页
        2.2.11 PCR产物的克隆第33-36页
3. 结果与分析第36-57页
    3.1 不同土层的理化性质第36页
    3.2 各土层可培养好氧细菌种群总数测定及分离纯化第36-37页
    3.3 各土层分离细菌的锰氧化活性测定结果第37-40页
    3.4 高锰氧化活性菌株的鉴定第40-45页
        3.4.1 高锰氧化活性菌株16S rRNA基因的扩增第40-41页
        3.4.2 高锰氧化活性菌株的ARDRA分析第41-42页
        3.4.3 高锰氧化活性菌株系统进化树的建立第42-45页
    3.5 各土层的富集培养液的pH值测定第45-46页
    3.6 土壤及土壤富集液的总DNA抽提结果第46-47页
    3.7 土壤及土壤富集液的总DNA的PCR扩增结果第47-48页
    3.8 变性梯度凝胶电泳及图谱分析第48-56页
        3.8.1 变性梯度凝胶电泳(DGGE)第48-53页
        3.8.2 仙农指数(The Shannon index of bacterial diversity,H)分析第53-54页
        3.8.3 多维尺度(multidimensional scaling,MDS)分析第54-56页
    3.9 DNA片段的回收、克隆、测序第56-57页
4. 讨论第57-63页
    4.1 锰氧化细菌的多样性第58-59页
    4.2 锰氧化细菌的组成第59-61页
    4.3 不同浓度的锰对土壤细菌群落多样性的影响第61-63页
参考文献第63-73页
附录第73-86页
攻读硕士学位期间的论文情况第86-87页
致谢第87页

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