| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 1 文献综述 | 第9-19页 |
| 1.1 种子脱水耐性 | 第9-11页 |
| 1.2 植物抗逆机制概述 | 第11-13页 |
| 1.3 LEA 蛋白 | 第13-19页 |
| 1.3.1 LEA 基因的结构和表达调控 | 第13-14页 |
| 1.3.2 LEA 蛋白的分类 | 第14-17页 |
| 1.3.3 LEA 蛋白的结构和功能 | 第17-18页 |
| 1.3.4 LEA 基因的研究进展 | 第18-19页 |
| 2 引言 | 第19-21页 |
| 2.1 研究目的及意义 | 第19页 |
| 2.2 研究主要内容 | 第19-20页 |
| 2.3 研究技术路线 | 第20页 |
| 2.4 创新之处 | 第20-21页 |
| 3 烟草 NtLEA1 基因的克隆与分析 | 第21-39页 |
| 3.1 实验材料与试剂 | 第21-23页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第21页 |
| 3.1.2 实验试剂和仪器 | 第21-22页 |
| 3.1.3 主要试剂配制方法 | 第22-23页 |
| 3.2 实验方法与步骤 | 第23-27页 |
| 3.2.1 NtLEA1 基因的电子克隆 | 第23页 |
| 3.2.2 材料的处理 | 第23页 |
| 3.2.3 总 RNA 的提取和检测 | 第23-24页 |
| 3.2.4 cDNA 的合成和检测 | 第24-25页 |
| 3.2.5 NtLEA1 基因的分子克隆 | 第25-26页 |
| 3.2.6 阳性克隆的 PCR 鉴定和测序 | 第26-27页 |
| 3.2.7 生物信息学分析 | 第27页 |
| 3.2.8 半定量 PCR 表达分析 | 第27页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第27-37页 |
| 3.3.1 总 RNA 的检测 | 第27-28页 |
| 3.3.2 cDNA 的检测 | 第28-29页 |
| 3.3.3 烟草 NtLEA1 基因的克隆 | 第29页 |
| 3.3.4 烟草 NtLEA1 基因的生物信息学分析 | 第29-36页 |
| 3.3.5 烟草 NtLEA1 基因的表达分析 | 第36-37页 |
| 3.4 讨论 | 第37-39页 |
| 4 NtLEA1 烟草转基因过表达研究 | 第39-53页 |
| 4.1 实验材料与试剂 | 第39-40页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第39页 |
| 4.1.2 实验试剂与仪器 | 第39页 |
| 4.1.3 主要试剂的配制方法 | 第39-40页 |
| 4.2 实验方法与步骤 | 第40-44页 |
| 4.2.1 NtLEA1 基因过表达载体的构建 | 第40页 |
| 4.2.2 农杆菌感受态的制备 | 第40-41页 |
| 4.2.3 电转化农杆菌 | 第41页 |
| 4.2.4 叶盘法转化烟草 | 第41-42页 |
| 4.2.5 转基因植株的生物学鉴定 | 第42-43页 |
| 4.2.6 转基因植株抗盐性分析 | 第43-44页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第44-51页 |
| 4.3.1 NtLEA1 过表达载体的构建 | 第44-46页 |
| 4.3.2 重组农杆菌菌液 PCR 鉴定 | 第46页 |
| 4.3.3 叶盘转化法获得过表达植株 | 第46-48页 |
| 4.3.4 转基因植株的生物学鉴定 | 第48-49页 |
| 4.3.5 转基因植株的抗盐性分析 | 第49-51页 |
| 4.4 讨论 | 第51-53页 |
| 5 总结与展望 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 附录 | 第62页 |
| A. 已发表的文章 | 第62页 |
| B. 参加的研究课题 | 第62页 |