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南京地区异育银鲫出血性败血症病原的鉴定

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-10页
第一篇 文献综述第11-25页
    第一章 鲤疱疹病毒2型的研究进展第11-25页
        1 病原学第11-16页
            1.1 病毒分类地位第11-12页
            1.2 病毒基因组结构第12-15页
            1.3 病毒的分离培养第15-16页
        2 流行病学第16-17页
            2.1 病原分布第16页
            2.2 宿主与传播途径第16页
            2.3 临床症状与组织病变第16-17页
        3 鲤疙疹病毒2型感染的免疫学研究第17-19页
            3.1 灭活疫苗第17-18页
            3.2 亚单位疫苗第18页
            3.3 鲤鱼抗CyHV2感染的免疫应答基因第18-19页
        4 小结第19-20页
        参考文献第20-25页
第二篇 试验研究第25-59页
    第二章 南京地区异育银鲫出血性败血症病原的检测第25-43页
        1 材料第26页
            1.1 病鱼第26页
            1.2 主要试剂第26页
            1.3 主要仪器第26页
        2 方法第26-29页
            2.1 病史调查第26页
            2.2 水质监测第26-27页
            2.3 分子生物学检测第27-28页
            2.4 斑马鱼致病性实验第28页
            2.5 多位点序列分型第28-29页
        3 结果第29-37页
            3.1 病史调查第29-30页
            3.2 水质检测第30页
            3.3 临床症状第30-31页
            3.4 分子生物学检测第31-35页
            3.5 斑马鱼致病性试验第35-36页
            3.7 多位点序列分型第36-37页
        4 讨论第37-39页
        参考文献第39-43页
    第三章 CYHV2病原纯化及ORF30基因的克隆表达第43-59页
        1 材料第43-44页
            1.1 病料、载体、菌株第43-44页
            1.2 主要试剂第44页
            1.3 主要仪器第44页
            1.4 实验动物第44页
        2 方法第44-50页
            2.1 病料处理第44页
            2.2 差速离心第44页
            2.3 蔗糖浓度梯度离心第44-45页
            2.4 病毒粒子的电镜观察第45页
            2.5 ORF30基因的引物设计与合成第45页
            2.6 病毒核酸的提取第45页
            2.7     ORF30基因的扩增及琼脂糖凝胶电泳检测第45-46页
            2.8 PCR产物的回收第46页
            2.9 目的基因与pET32a的连接与转化第46页
            2.10 重组质粒pET32a-ORF30克隆菌的筛选与鉴定第46-47页
            2.11 重组质粒pET32a-ORF30诱导条件的优化第47页
            2.12 SDS-PAGE鉴定第47页
            2.13 pET32a-ORF30融合蛋白的大量表达第47-48页
            2.14 上清蛋白的纯化第48页
            2.15 实验动物的免疫接种第48页
            2.16 采血、分离血清及多克隆抗体效价的测定第48-49页
            2.17 Western blot鉴定第49-50页
        3 结果第50-54页
            3.1 病毒纯化第50-51页
            3.2 ORF30基因的PCR扩增第51页
            3.3 ORF30基因克隆质粒的鉴定第51-52页
            3.4 重组质粒pET32a-ORF30诱导条件的优化第52-53页
            3.5 重组质粒大量表达的上清蛋白纯化第53页
            3.6 多克隆抗体效价的测定第53页
            3.7 Western blot鉴定第53-54页
        4 讨论第54-56页
        参考文献第56-59页
全文总结第59-61页
致谢第61页

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