摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
第一篇 文献综述 | 第11-25页 |
第一章 鲤疱疹病毒2型的研究进展 | 第11-25页 |
1 病原学 | 第11-16页 |
1.1 病毒分类地位 | 第11-12页 |
1.2 病毒基因组结构 | 第12-15页 |
1.3 病毒的分离培养 | 第15-16页 |
2 流行病学 | 第16-17页 |
2.1 病原分布 | 第16页 |
2.2 宿主与传播途径 | 第16页 |
2.3 临床症状与组织病变 | 第16-17页 |
3 鲤疙疹病毒2型感染的免疫学研究 | 第17-19页 |
3.1 灭活疫苗 | 第17-18页 |
3.2 亚单位疫苗 | 第18页 |
3.3 鲤鱼抗CyHV2感染的免疫应答基因 | 第18-19页 |
4 小结 | 第19-20页 |
参考文献 | 第20-25页 |
第二篇 试验研究 | 第25-59页 |
第二章 南京地区异育银鲫出血性败血症病原的检测 | 第25-43页 |
1 材料 | 第26页 |
1.1 病鱼 | 第26页 |
1.2 主要试剂 | 第26页 |
1.3 主要仪器 | 第26页 |
2 方法 | 第26-29页 |
2.1 病史调查 | 第26页 |
2.2 水质监测 | 第26-27页 |
2.3 分子生物学检测 | 第27-28页 |
2.4 斑马鱼致病性实验 | 第28页 |
2.5 多位点序列分型 | 第28-29页 |
3 结果 | 第29-37页 |
3.1 病史调查 | 第29-30页 |
3.2 水质检测 | 第30页 |
3.3 临床症状 | 第30-31页 |
3.4 分子生物学检测 | 第31-35页 |
3.5 斑马鱼致病性试验 | 第35-36页 |
3.7 多位点序列分型 | 第36-37页 |
4 讨论 | 第37-39页 |
参考文献 | 第39-43页 |
第三章 CYHV2病原纯化及ORF30基因的克隆表达 | 第43-59页 |
1 材料 | 第43-44页 |
1.1 病料、载体、菌株 | 第43-44页 |
1.2 主要试剂 | 第44页 |
1.3 主要仪器 | 第44页 |
1.4 实验动物 | 第44页 |
2 方法 | 第44-50页 |
2.1 病料处理 | 第44页 |
2.2 差速离心 | 第44页 |
2.3 蔗糖浓度梯度离心 | 第44-45页 |
2.4 病毒粒子的电镜观察 | 第45页 |
2.5 ORF30基因的引物设计与合成 | 第45页 |
2.6 病毒核酸的提取 | 第45页 |
2.7 ORF30基因的扩增及琼脂糖凝胶电泳检测 | 第45-46页 |
2.8 PCR产物的回收 | 第46页 |
2.9 目的基因与pET32a的连接与转化 | 第46页 |
2.10 重组质粒pET32a-ORF30克隆菌的筛选与鉴定 | 第46-47页 |
2.11 重组质粒pET32a-ORF30诱导条件的优化 | 第47页 |
2.12 SDS-PAGE鉴定 | 第47页 |
2.13 pET32a-ORF30融合蛋白的大量表达 | 第47-48页 |
2.14 上清蛋白的纯化 | 第48页 |
2.15 实验动物的免疫接种 | 第48页 |
2.16 采血、分离血清及多克隆抗体效价的测定 | 第48-49页 |
2.17 Western blot鉴定 | 第49-50页 |
3 结果 | 第50-54页 |
3.1 病毒纯化 | 第50-51页 |
3.2 ORF30基因的PCR扩增 | 第51页 |
3.3 ORF30基因克隆质粒的鉴定 | 第51-52页 |
3.4 重组质粒pET32a-ORF30诱导条件的优化 | 第52-53页 |
3.5 重组质粒大量表达的上清蛋白纯化 | 第53页 |
3.6 多克隆抗体效价的测定 | 第53页 |
3.7 Western blot鉴定 | 第53-54页 |
4 讨论 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-59页 |
全文总结 | 第59-61页 |
致谢 | 第61页 |