| 致谢 | 第6-10页 |
| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 1 绪论 | 第14-30页 |
| 1.1 细菌鞭毛的结构与组装 | 第14-15页 |
| 1.2 细菌鞭毛的调控 | 第15-20页 |
| 1.3 极端鞭毛定位和数量调控的分子机制 | 第20-22页 |
| 1.4 细菌不同菌落形态的形成机制 | 第22-23页 |
| 1.5 鞭毛的功能 | 第23-25页 |
| 1.6 本研究的背景、主要内容及意义 | 第25-30页 |
| 2 S onedensis中FlrBC对鞭毛的调控及鞭毛丝蛋白表达对运动性的影响 | 第30-51页 |
| 2.1 材料与方法 | 第32-36页 |
| 2.1.1 菌株、质粒和培养条件 | 第32页 |
| 2.1.2 阅读框内缺失突变株的构建和回补菌株 | 第32-34页 |
| 2.1.3 生物信息学分析 | 第34页 |
| 2.1.4 S. oneidensis生长的测定和运动性检测 | 第34页 |
| 2.1.5 β-半乳糖苷酶活性实验 | 第34-35页 |
| 2.1.6 实时定量PCR(qRT-PCR) | 第35页 |
| 2.1.7 鞭毛蛋白的纯化 | 第35页 |
| 2.1.8 免疫印记分析实验 | 第35-36页 |
| 2.2 结果与分析 | 第36-47页 |
| 2.2.1 flrC的缺失不会影响S. oneidensis的运动性 | 第36-39页 |
| 2.2.2 flrB和flrC的同时缺失对运动性的影响 | 第39-40页 |
| 2.2.3 flrBC操纵子受RpoN和FlrA调控 | 第40-43页 |
| 2.2.4 FlaB的过表达导致△flrBC的超级运动性表型 | 第43-45页 |
| 2.2.5 鞭毛丝蛋白FlaA和FlaB的比例决定运动性 | 第45-47页 |
| 2.3 讨论 | 第47-51页 |
| 2.3.1 S. oneidensis中FlrBC在鞭毛调控等级中作用机制的变异 | 第47-49页 |
| 2.3.2 运动性与鞭毛丝蛋白组分之间的关系 | 第49-51页 |
| 3 FlrBC对S. oneidensis鞭毛数量和定位及其它方面的影响 | 第51-75页 |
| 3.1 材料与方法 | 第53-57页 |
| 3.1.1 菌株、质粒和培养条件 | 第53页 |
| 3.1.2 阅读框内缺失突变株、回补菌株、定点突变菌株的构建和生理特性的测定 | 第53页 |
| 3.1.3 透射电子显微镜观察(TEM) | 第53-55页 |
| 3.1.4 实时定量PCR(qRT-PCR) | 第55页 |
| 3.1.5 鞭毛蛋白的纯化 | 第55页 |
| 3.1.6 GFP融合蛋白的表达和荧光定量分析 | 第55-56页 |
| 3.1.7 细菌单杂交(B1H)实验 | 第56页 |
| 3.1.8 转座突变分析和插入位点的鉴定 | 第56-57页 |
| 3.1.9 接合实验 | 第57页 |
| 3.2 结果与分析 | 第57-70页 |
| 3.2.1 过量表达FlrC诱导侧生多鞭毛的表型 | 第57-60页 |
| 3.2.2 FlrC过表达引起的多鞭毛表型与flhG表达变化无关 | 第60-62页 |
| 3.2.3 FlrC可能以非磷酸化形式被激活 | 第62-65页 |
| 3.2.4 FlhF和FlrD对FlrC过表达时多鞭毛表型的影响 | 第65-67页 |
| 3.2.5 感受激酶SO4002对△flrBC运动性的影响 | 第67-69页 |
| 3.2.6 二元系统FlrBC对接合的影响 | 第69-70页 |
| 3.3 讨论 | 第70-75页 |
| 3.3.1 鞭毛定位的调控机制研究 | 第70-71页 |
| 3.3.2 二元系统调控蛋白在鞭毛运动性中的作用机制 | 第71-73页 |
| 3.3.3 鞭毛二元系统FlrBC在调控其他生理过程中的作用 | 第73-75页 |
| 4 胞外蛋白在S. oneidensis无鞭毛突变体菌落形态转变的作用 | 第75-90页 |
| 4.1 材料与方法 | 第76-78页 |
| 4.1.1 菌株、质粒和培养条件 | 第76页 |
| 4.1.2 阅读框内缺失突变株、回补菌株和表型鉴定 | 第76页 |
| 4.1.3 转座子突变和插入位点鉴定 | 第76页 |
| 4.1.4 Tricine-SDS-PAGE、免疫印记杂交实验和高表达蛋白的测序鉴定 | 第76-78页 |
| 4.1.5 透射电子显微镜观察(TEM) | 第78页 |
| 4.1.6 EPS和胞外蛋白的纯化和定量 | 第78页 |
| 4.1.7 序列分析 | 第78页 |
| 4.2 结果与分析 | 第78-86页 |
| 4.2.1 无鞭毛褶皱突变体的插入突变子的筛选 | 第78-83页 |
| 4.2.2 SO1072的过表达是无鞭毛菌株菌落形态转变的重要原因 | 第83-84页 |
| 4.2.3 SO1072的补偿表达作用 | 第84-86页 |
| 4.2.4 SO1072的表达可能受c-di-GMP介导 | 第86页 |
| 4.3 讨论 | 第86-90页 |
| 5 论文总结 | 第90-94页 |
| 5.1 主要研究成果 | 第90-91页 |
| 5.2 创新之处 | 第91-92页 |
| 5.3 不足和展望 | 第92-94页 |
| 参考文献 | 第94-110页 |
| 附录 | 第110-123页 |
| 作者简介 | 第123页 |
