| 中文摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-9页 |
| 引言 | 第9-16页 |
| 1 结构生物学简介 | 第9-10页 |
| 2 X-射线晶体学 | 第10-14页 |
| ·X射线晶体学的简要背景 | 第10-11页 |
| ·蛋白质结晶 | 第11-12页 |
| ·蛋白质分子溶液分散性及晶体生长难易检测手段之一—动态光散射 | 第12-14页 |
| ·晶体优化方法之一-接种(seeding) | 第14页 |
| 3 本文研究目的和意义 | 第14-16页 |
| 第一章 腾冲嗜热菌核糖体循环因子(TteRRF)初步晶体学研究 | 第16-40页 |
| ·核糖体再循环因子(RRF)简介 | 第16页 |
| ·RRF的研究历史 | 第16-17页 |
| ·RRF的功能 | 第17-18页 |
| ·RRF分子作用机理 | 第18-21页 |
| ·RRF催化翻译后复合物解体的反应过程 | 第18-19页 |
| ·具体分子机制-tRNA-mimic和反tRNA-mimic模型 | 第19-20页 |
| ·其他物种RRF三维结构 | 第20-21页 |
| ·腾冲嗜热菌简介和其RRF作为模型功能研究介绍 | 第21页 |
| ·材料 | 第21-22页 |
| ·主要仪器 | 第22页 |
| ·pET-DBTteRRF表达载体的构建 | 第22-27页 |
| ·pET-DB载体 | 第22-23页 |
| ·PE-TDBTteRRF表达载体的构建 | 第23-27页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第27-29页 |
| ·RRF蛋白分子的甲基化处理 | 第29-30页 |
| ·纯化后RRF检测 | 第30-32页 |
| ·测定蛋白浓度 | 第30页 |
| ·利用动态光测溶液中蛋白聚合状态的均匀性 | 第30-31页 |
| ·利用SDS-PAGE检测RRF蛋白纯度 | 第31-32页 |
| ·RRF晶体筛选和生长 | 第32-34页 |
| ·野生型RRF晶体筛选 | 第32页 |
| ·甲基化RRF晶体筛选 | 第32-34页 |
| ·RRF晶体衍射 | 第34-38页 |
| ·防冻液的选用 | 第34-35页 |
| ·数据收集和处理 | 第35-38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| 第二章 极端嗜热菌ATCC-27502 ATP合成酶全酶(FOF1-ATPase)的提取,纯化和结晶 | 第40-53页 |
| ·ATP合酶的亚基组成和结构 | 第40-42页 |
| ·ATP合酶的亚基组成 | 第40-42页 |
| ·ATP合酶结构 | 第42-45页 |
| ·ATP合酶的整体结构 | 第42-43页 |
| ·ATP合酶的各亚基结构研究概况 | 第43-45页 |
| ·ATP合酶旋转催化机理 | 第45-46页 |
| ·膜蛋白晶体生长 | 第46-47页 |
| ·极端嗜热菌ATCC27502特征及研究意义 | 第47页 |
| ·材料 | 第47页 |
| ·仪器 | 第47-48页 |
| ·细菌培养,收集,重悬,破碎,提膜 | 第48页 |
| ·膜蛋白抽提 | 第48页 |
| ·膜蛋白纯化 | 第48-51页 |
| ·FoF1-ATPase结晶条件的筛选 | 第51-52页 |
| ·讨论 | 第52-53页 |
| 第三章 沙冬青钙调神经磷酸酶B样蛋白1(AmCBL1)的初步晶体学研究 | 第53-71页 |
| ·植物体内的钙信号传递元件 | 第53页 |
| ·CBL/CIPK信号系统的生物学功能 | 第53-54页 |
| ·CBL及CBL-CIPK complex结构研究进展 | 第54页 |
| ·CBL1研究意义 | 第54-55页 |
| ·实验材料 | 第55页 |
| ·表达载体的构建 | 第55-60页 |
| ·突变体构建 | 第60-61页 |
| ·基因诱导表达 | 第61-62页 |
| ·AmCBL1蛋白纯化和检测 | 第62-65页 |
| ·晶体筛选 | 第65-66页 |
| ·突变体晶体的生长 | 第66-68页 |
| ·晶体衍射 | 第68-70页 |
| ·讨论 | 第70-71页 |
| 结论 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-81页 |
| 个人简介 | 第81-82页 |
| 导师简介 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
